IL15基因佐剂对HIV1 gg DNA疫苗免疫效应的影响.docx

巾蚕协嗣医科大学幡士学位论文kU 巾蚕协嗣医科大学幡士学位论文 kU Kilounit 予单位 Lac Z Galactosidase et-peptide gene 半乳糖苷酶静肢基困 LAK Lymphokine activated killer 淋巴因子活化的杀伤细胞 LB Luria-Bertalli medium LB培养基 §一砸 p-mereaptoethanol 释．巯基乙醇 MHC Major histocompatibility complex 主要组织相容性复合体 MoPS ’3州-morpholino)-propane sulfonic acid 3．烈蓬}啡赫)丙磺酸 M疆 3群，5一dimethylthiazol一2-yi)2，5*diphenyl 二甲基偶氮唑蓝 tetrazolium bromide NK Natural killer 国然杀伤细胞 OD Optical density 光密度 懿GE Polyacrylamide gel electrophoresis 聚丙烯酰胺凝胶电泳 P8L Peripheral blood lymphoeyte 井周血淋巴细胞 PBMC Peripheral blood mononuelear cell 外周血单个核细胞 p转S Phosphate-buffered saline 磷酸盐缓冲滚 PCR Polymerase chain reaction 聚合酶链反应 PEG Polyethylene glycol 聚乙二醇 PK轰 Phytohemagglutinin 植物盘凝素 POPOP l，4一di-(2’·C5-phenyloxazolyl)一benzene l一。双．(2’．C5’苯基恶唑)苯 PPO 2，5一diphenyioxazoie 2。5二苯基恶唑 RNase Ribonuclease 核糖核酸酶 啦m Round per minute 辕}分 seFv Single chain variable fragments 单链可交区片段 SDS Sodium dodeeyl sulfate 十二烷基磺酸钠 SSC Sodium chloridesodium citrate buffer 氯化钠．柠檬酸钠缓冲液 KR T eell receptor T细脆受体 TEMED N，N，N’，N-tetra methyl Ethylene diamine N，N，N’，N。．四甲基乙二胺 零GF Transforming growth factor 转化生长因子 佳 Thelper f辅助(细胞) TNF Tumor necrosis factor 肿瘤坏死因子 鬟L Tumor-infiltrating lymphoeytes 瓣瘿浸润T漆翌缨施 州s 嘲shydroxymethylaminomethane 三羟甲基氨基甲烷 Tricine Tricine 三羟甲基甲基甘氨酸 9 巾国协和医科大学簿．0学位论文IL-15基因佐剂对HIV一1 巾国协和医科大学簿．0学位论文 IL-15基因佐剂对HIV一1 gag DNA疫苗免疫效应的影响 中文摘要 人类免疫缺陷病毒(HIV)感染所致的入类获得性免疫缺陷综合征(AIDS，简称 艾滋瘾)在全球的迅速传播基经对久类键瘵造成了严篡的威胁，研铡安全有效的HIV 疫茁可最终解决艾滋病的预防闷题。HIV核酸疫苗一照为研究者所关注，然嚣，其免 疫效力不强，虽效果不持久。嚣此剩雳各种免疫佐荆来增强HIV核酸疫蕾鲶免疫效 果正在成为艾滋病疫苗研究中的新策略。HIV病毒gag基因编码的GAG结构鬣白突 变率较低，旦獒有麓被Balb／c小鼠识别翁特异性T袭位，常常被终为HIV疫菌研究 中的首选鬣自。而本课题组长期以来对细胞因子白介素(n3．15的免疫作用和机制进 行了深入斡研究，发现l纛．15在挠瓣瘤免疫中具有增强免疫反应的终用。因此，本研 究将观察纯-15作沩疫苗佐荆对HIV-1 gag DNA疫菌激发的机体免疫应答的效用，并 与l毛．2的功能进行姥较。 主要研究工作包括： (1)构建体外细脆实验模型，研究l毛．1S对于CD8+伐§T细胞，NK缨胞及筘T 细胞的增殖活化作用 从歪常人辨周血串分离得到一定纯度的CD8+程多T细胞、NK细胞和婶T细胞， 在IL．2／IL-15与HIV-1 gag蛋白共培养刺激下，结果显示IL—15和iL一2均能够增强NK 细胞、西T缨臌和特异性CD8+程§T缨脆的增殖活性和细腱毒活性，丽且l己．15刺激 NK细胞增殖和细胞毒的佟用强于lL．2。ELISpot检测IL，2／IL。15刺激产生的特异性 CD8÷T缨胞克隆频率的实验结采显示，IL-15与HIV-1 gag共培养