IL8基因真核表达载体的构建及其对OVCAR3细胞生学机制的分析.docx

英文缩写英文缩写 英文缩写 英文缩写 IL．8 Interleukin．8 白细胞介素8 MMP Matrix Metallo Proteinases 基质金属蛋白酶 VEGF vascular endothelial 血管内皮(细胞) growth factor 生长因子 PBMC Peripheral Blood 外周血单个核细 Mononuclear Cell 胞 MTT Methyl Thiazolyl Tetrazoliu四甲基偶氮唑蓝 LPA Lysophosphatidic Acid 溶血磷脂酸 ImPCR reverse transcription． 逆转录聚合 polymerse chain reaction 酶链式反应 PBS phosphate buffered saline 磷酸盐缓冲液 FCM flow cytometry 流式细胞仪 CXCR chemoattractant cytokine 趋化因子受体 rec印tor PI Proliferation index 增殖指数 ELISA Enzyme linked 酶联免疫吸附 Immunosorbent 试验 bFGF basic fibroblast 基本的成纤维 growth factor 细胞生长因子 TNF tumor necrosis factor 肿瘤坏死因子 INF Interferon 干扰素 TGF tumor growth factor 肿瘤生长因子 河北医科大学 河北医科大学 学位论文使用授权及知识产权归属承诺 本学位论文在导师(或指导小组)的指导下，由本人独立完成。 本学位论文研究所获的研究成果，其知识产权归河北医科大学所有。 河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学 位论文主要内容相关的论文，第一署名单位为河北医科大学，试验材 料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则， 承担相应的法律责任。 研究生签名：磊嘲 导师签名．榴学院领导签名： 诱幸弓月形日 河北医科大学 研究生学位论文独创性声明 本论文是在导师指导。F进行的研究工作及取得的研究成果，除了 文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人已经发表或撰 写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写， 文责自负。 研究生躲参晴导师躲徽 D 8年弓。月彩日 中文摘要IL．8基因真核表达载体的构建及其对OVCAR．3 中文摘要 IL．8基因真核表达载体的构建及其对OVCAR．3 细胞生物学机制的研究 摘 要 目的：卵巢癌是威胁妇女健康常见的妇科肿瘤，因其早 期发现较难，肿瘤类型多，组织结构复杂并各具不同的生物 学特性，一直是妇科肿瘤领域研究的热点。上皮性癌其恶性 程度比间质性肿瘤高，治疗效果远不如生殖细胞癌，此种肿 瘤发展迅速，不易早期诊断，死亡率高，是该领域中最有待 研究的一种肿瘤，因此一种新的治疗方法亟待需要。基因的 异常表达及其与卵巢肿瘤的发生发展关系的研究己成为分 子生物学研究的热点。卵巢癌的发生和发展是一个复杂、多 步骤的过程，与许多基因和蛋白的表达密切相关。 白细胞介素8(interleukin 8，IL．8)，是Yoshimur于1987 年发现的第一个趋化性细胞因子，属于CXC家族，在炎症 和免疫过程中起重要的调节作用。近来作为恶性肿瘤相关分 子越来越多地引起了研究者的关注。目前已知多种肿瘤细胞 均可分泌IL．8，实体肿瘤组织IL．8过表达与肿瘤生长侵袭转 移密切相关，而其促进肿瘤发生发展的机制尚不完全清楚。 近年重组技术的建立与发展在理论和实践上为卵巢癌 治疗提供了新的策略——基因治疗有望成为卵巢癌治疗的 新途径。理想的治疗基因应有效的抑制肿瘤细胞生长，而对 正常组织、细胞无明显抑制作用。本研究将人IL．8基因克隆 到真核表达载体pcDNA3．1(十)中，在脂质体作用下瞬时转染 低表达IL-8基因的上皮性卵巢癌细胞株OVCAR．3中，探讨 中文摘要该基因诱导的上皮性卵巢癌细胞功能的改变及其生物学机 中文摘要 该基因诱导的上皮性卵巢癌细胞功能的改变及其生物学机 制，为迸一步研究IL．8基因治疗上皮性卵巢癌的提供了可行 性。 方法：1构建IL．8基因真核表达载体提取健康志愿 者外周血单个核细胞(PBMC)的总RNA，通过RT-PCR扩 增IL．8编码序列基因片段，并将其克隆至PMD．18T载体构 成PMD．18T／IL．8，BamHI和XhoI双酶切后，与经相同双酶 切后的真核pCDNA3．1(+)表达载体连接，构建成 pcDNA3．I(+)／IL．8重组质粒。 2瞬时转染人卵巢癌细胞OVCAR．3 以脂质体