荷斯坦奶牛乳房炎相关基因多态性研究-动物遗传育种与繁殖专业论文.docxVIP

目录第一章文献综述 目录 第一章文献综述 1 1．1荷斯坦奶牛乳房炎概述 ．2 1．2候选基因研究进展 ．3 1．3本研究的目的意义 ．7 第二章材料与方法 8 2．1材料 ．8 2．2实验方法与步骤 10 2．3数据统计与分析方法 17 第三章结果与分析 ．19 3．1荷斯坦奶牛基因组DNA的提取和PCR扩增结果 19 3．2荷斯坦奶牛乳房炎相关基因多态性分析结果 21 3．3荷斯坦奶牛乳房炎相关基因Sequenom检测结果 ．24 3．4群体遗传学统计分析结果 29 3．5基因多态位点与SCS最小二乘统计分析结果 32 第四章讨论 34 4．1候选基因遗传特性分析 34 4．2候选基因多态性分析 34 4．3候选基因多态性与乳房炎相关分析 35 第五章结论 37 参考文献 ．．38 致谢 ．45 个人简介 ．46 III 万方数据 宁夏大学硕士学位论文 宁夏大学硕士学位论文 第一章文献综述 第一章文献综述 世界上饲养的奶牛品种主要包括：荷斯坦奶牛，娟姗牛，更赛牛和爱尔夏牛等，大多数国家 以荷斯坦奶牛为主。 荷斯坦奶牛，原产于荷兰北部的北荷兰省和西弗里生省。因荷斯坦奶牛产奶量居各奶牛品种 之首，且饲料报酬高，生长发育快，受到各国饲养者的喜爱。各国在长期的驯化及系统的选育中， 形成了各具特征的荷斯坦奶牛，并冠以该国国名。 在我国，利用引进国外的荷斯坦奶牛与黄牛杂交，经过长期的选育形成了“中国黑白花牛”， 于1992年正式更名为“中国荷斯坦奶牛”。中国荷斯坦奶牛在全国各地的表现也不尽相同，总 体反应是对高温气候条件适应性较差，造成产奶量下降。 宁夏位于中国西北东部，年平均气温5．3—9．9C，符合荷斯坦奶牛不耐高温的生活习性，成为 全国十大牧区之一。奶产业被自治区列为农业五大战略性主导产业之一，截止2015年，宁夏奶 牛存栏56．7万头，牛奶产量62．4万吨。奶产业成为自治区优势产业，全区28家乳品加工企业， 年加工鲜奶产量居全国前列，奶产品销售覆盖了全国26个省区。 自20世纪80年的以来，欧美等国家研究了大量的药物和方法用于治疗奶牛乳房炎，然而， 都收效甚微。种种研究结果表明遗传效应对奶牛乳房炎的发病率具有一定的影响，可以在一定的 程度上控制乳房炎。因此，对乳房炎抗性的遗传选择，已然成为一种新的趋势，这种抗病育种的 防患未然的措施，对现代畜牧业预防疾病具有重要的意义，可以永久的改变群体遗传组成，长期 有效的控制疾病的发生。 万方数据 宁夏大学硕士学位论文 宁夏大学硕士学位论文 第一章文献综述 1．1荷斯坦奶牛乳房炎概述 乳房炎是荷斯坦奶牛最大的疾病隐患之一，给经济带来巨大的损失。目前预防和治疗的方法 主要依赖大量的抗生素，严重威胁了公共营养安全。随着分子生物技术的迅速发展，抗病育种技 术的使用已愈发趋于纯熟。 1．1．1奶牛乳房炎发生及分类 奶牛乳房炎(Mastitis)--般分为临床性乳房炎(clinical mastitis)和隐性乳房炎(hidden mastitis) (又称为亚临床性乳房炎，subclinical mastiffs)两种类型。临床性乳房炎表现为：乳房红肿，发 炎，流脓等症状。隐性乳房炎虽然不具有临床表现，但是通过药物和仪器可以检测到。目前对隐 性乳房炎的检测方法有：乳汁pH值检测法、乳汁导电性检测法、酶检验法和乳汁体细胞检测法 等。据报道，细菌、真菌、霉形体、病毒等80多种病原微生物都可以引发奶牛乳房炎，也有报 道称有150多种【1捌。奶牛乳房炎的主要病原菌包括：金黄色葡萄球菌(SA)、无乳链球菌(SAG)、 大肠杆菌(CO)和其他链球菌(OS，或环境性链球菌ES)等；次要病原菌包括：凝固酶阴性葡 萄球菌(CNS)、牛棒状杆菌(CB)及其他细菌(OTH)等【3·5】。这些病原菌通常寄生在奶牛身 上，有的附着于牛场内的牛床、草垫，运动场的泥土里等奶牛赖以生存的栖息之地上，导致奶牛 乳房炎的发病率极高。 产生奶牛乳房炎的因素有很多种，通常是由环境因素和管理因素造成的。一般情况下，乳房 炎的患病率夏季比冬季高；泌乳量高的奶牛患病几率较大，而胎次高的奶牛患病几率更高【6】。饲 养环境和管理水平也会影响乳房炎的发病率【，】，比如，采用机械挤奶的牛群乳房炎的发病率更高； 而饲养环境偏阴暗、潮湿且污秽较多的牛场，牛群患乳房炎的几率更高；频繁更换日粮和饲养方 式的改变也会增加乳房炎的发病率。 免疫遗传学中研究表明，奶牛乳头的形状、长度、分泌的角质蛋白以及乳腺管的形态、机体 参与免疫机制等，都对乳房炎的抵抗力有直接影响【8】。 1．1．2奶牛乳房炎的危害 乳房炎是一种由病原性微生物感染乳头、侵害乳腺而引发的炎症。乳房炎会导致奶牛产奶量 骤减，引起乳房红肿、疼痛，奶牛也会伴有发烧、拒食等症状，而隐性乳房炎对牛群的危