荷斯坦牛中性粒细胞β防御素基因克隆及其原核表达质粒的构建-基础兽医学专业论文.docxVIP

AbstractA Abstract A specific pair of primers were designed and synthesized according t0 the sequence of boVine B-defcnsin gene published in GenBank．Tbtal cenular RNA was purified fh)m the BoVine Neutrophil cell with the total鼢忱isolation kit．nen the BoVine B—defensin cDNA 触gment was amplified by reVerse transcription-polymerase chain(RT-PCR)，the IU’-PCR produCts were insened into the pMDl8一T cloning VeCtor．Then the cDNA fragment of interest was sequenced． ne result showed that the obtained 189 bp DNA仃a舯ent is identical with the BNBD一7 sequence registered in GenBaIll【．The cDNA仃agment code 63锄ino acid reSidues．Compared with the gene published in GenBank，the cDNA identity was 96．3％．Tlle products were insened into the Vector pET-32a锄d pQE-30 to constmCt prokaryotic Expression Plasmids pET-32a／BNBD-7 and pQE一30／BNBD-7 haVe laid a foundation for later expression， biological function姐d actiVity study of B-defensin． KeywOrds：B-Defensin，prokaryotic D【pression，boVine II 英文缩略表ⅡI 英文缩略表 ⅡI 英文缩写 英文金称 中文名称 X-ga1 S-brom伽今chloro-3-indolyl-?-D-g a1actoside 5-澳-4-氯-3-巧|睐-?-D-半乳 糖昔 μg Microgram 微克 μm M阳00 微米 EDTA Ethylenediam inetetraacetic acid 乙二胶四乙酸 IV 独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得 独创性声明 本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得 的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中 不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得新疆农业大 学或其他教育单位的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对 本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。 研究生签名：承-＼双启 时间： 夕口7，年 f月矽日 关于学位论文使用授权的说明 本人完全了解新疆农业大学有关保留、使用学位论文的规定，即：新 疆农业大学有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子文 档，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文，允许论 文被查阅和借阅。本人授权新疆农业大学将学位论文的全部或部分内容编 入有关数据库进行检索，可以公布(包括刊登)论文的全部或部分内容。 (必威体育官网网址的学位论文在解密后应遵守此协议) 研究生签名：繁I双凡 时间：≯口。7r年 ‘月互d日 导师签名野始救帆叩年舌月彩日 新疆农业大学硕+学位论文第一章文献综述 新疆农业大学硕+学位论文 第一章文献综述 引言 生命机体具有内在的防御系统，以抵御有害微生物的侵入和清除一些异常细胞Ⅲ。 随着分子生物学的不断发展，世界上许多科学家越来越认识到从分子水平上弄清宿主防 御的机理圆，对防治人类及动植物的诸多疾病具有十分重要的意义。自60年代以来，科 学家们己从动物和昆虫中分离到了许多微生物抗性和细胞毒性肽啪，如防御素 (defensins，DEF)H”、杀菌肽(cbcmpins，magainins，meHtti璐)等。这些肽都具有彼此不同 的特异性，防御素是其中最大家族之一。防御素是由美国加利福尼亚大学R．L．Lehrer等 于1985年首次命名的，当时是用来描述人和兔子嗜中性白细胞中同源的一类微生物抗性 和细胞毒性肽(龃timjcmbial孤d c”otoxic