L.plantum和E.coli细胞壁肽聚糖缓释微球对小鼠肠道菌群及机体疫调节作用的研究.docx

分类号 分类号 一 U D C 一 密级 署哦 泸产篝 硕士研究生学位论文 L．plantum和E口D／／细胞壁肽聚糖缓释微球 对小鼠肠道菌群及机体免疫调节作用的研究 申请人：范佳惠 学 号：2121231 培养单位：生命科学学院 学科专业：微生物学 研究方向：微生物产品开发与制备 指导教师：孙庆申 完成日期：2014年3月27日 万方数据 lIII lIII I I I II II II II III I IIl Y2770408 中文摘要 中文摘要 肽聚糖的生物活性越来越受到人们的关注，本课题的目的是通过比较革兰氏 阳性细菌(植物乳杆菌为代表)和革兰氏阴性细菌(大肠杆菌为代表)细胞壁肽聚糖对 肠道菌群组成和机体免疫调节活性的影响，为肽聚糖作为潜在疫苗的开发提供前 期的数据支持。 本实验通过三氯乙酸法分离了大肠杆菌细胞壁肽聚糖，得到大肠杆菌肽聚糖 的提取率为(11．2±1．35呦。并以壳聚糖作为壁材，通过化学交联法制备了大肠杆 菌肽聚糖(EPG)微球，通过扫描电镜观察证明EPG微球成球性良好，该微球载药量 为(43．5l±4．66)g／lOOg，包封率为(91．20±1．82)％。 肽聚糖微球对小鼠肠道菌群及免疫功能的调节作用。研究数据显示：肽聚糖 微球组小鼠肠道中的有益菌乳酸杆菌、双歧杆菌显著高于生理盐水组(P0．01)， 条件致病菌肠杆菌、肠球菌显著低于生理盐水组(P0．01)，血清中溶菌酶含量、IgG 含量、IL．2含量、肠粘膜中SIgA的含量、肝脏指数、脾脏指数均显著高于生理盐 水组(PO．01)。 肽聚糖微球对大肠杆菌感染小鼠模型的保护作用。结果显示，肽聚糖微球组 小鼠肠道菌群中有益菌的数量显著高于生理盐水组(PO．01)，条件致病茵数量显 著低于生理盐水组(P0．01)，血清中IgG含量、IL—10含量、肠粘膜中的SIgA的 含量显著高于生理盐水组(P0．05)。1L．6的含量显著低于生理盐水组(P0．01)。 本研究结果表明，大肠杆菌肽聚糖微球成球性良好、性能稳定，两种肽聚糖 微球具有良好的调节肠道菌群及机体免疫功能的能力。可以有效增强机体免疫能 力，对大肠杆菌感染小鼠引起的小鼠肠道菌群失调、肠道免疫功能紊乱具有有效 的且持久的预防保护效果，两种肽聚糖在保护效果上无显著性差异，初步显示肽 聚糖在保护效果上具有非特异性，为肽聚糖作为疫苗的进一步开发奠定基础。 关键词：肽聚糖复合微球；肠道菌群；免疫调节 万方数据 黑龙江大学硕士学位论文Abstra 黑龙江大学硕士学位论文 Abstra ct The biological’activities of peptidoglycan are getting more and more attention． This thesis aims to compare the effects of microencapsulated peptidoglycan from gram positive bacteria(represented by L．plantum)and gram negative bacteria(represented by E．coli)on intestinal flora and systematics immunity,whereby providing experimental data for potential vaccine development of peptidoglycan． E．coli peptidoglycan was separated by trichloroacetic acid method，with(1 1．2± 1．35)％extraction yield．E．coli prptidoglycan(EPG)microspheres was prepared by chemical crosslinking process using chitosan as wall materials．Scanning electronic microscopy(SEM)results showed good spherity EPG microspheres．This microspheres has laoding capacy of(43．51±4．66)g／1009 and encapsulation rate at(91．20±1．82)％． The results from regulation effects of peptidoglycan microsphere on mouse intestinal flora and immune fuction showed that the numbe