L异谷氨酰胺类肽化合物的设计 合成及性分析.docx

山尊大学硕士学位论文符号说明 山尊大学硕士学位论文 符号说明 ACE Angiotensin Converting Enzyme 血管紧张素转化酶 APN aminopeptidase N 氨肽酶N APNIs arninopeptiidase N inhibitors 氨肽酶N抑制剂 CMR Calculated Molar Refraction 计算摩尔折光率 CRF Corticotropin Releasing Factor 促肾上腺皮质释放因子 DCC N,N-Dicyclohexylcarbodiimide 二环己基碳二亚胺 ECM Extra-C,：ellular Matrix 细胞外基质 ESI．MS Electro-Spray Ionization Mass Spectrum 电喷雾电离质谱 ICso Half Inhibitory Concentration 半数抑制浓度 IR Infrared absorption spectrum 红外光谱 MMPs Matrix metallopeptidases 基质金属蛋白酶 NMR Nuclear Magnetic Resonance 核磁共振 TLC Thin,一．1ayer Chromatography 薄层层析 THF Tetrahydrofuran 四氢呋喃 VLC Vacuum Liquid Chromatography 减压柱层析 5 原创性声明 原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文是本人在导师的指导下，独立 进行研究所取得的成果。除文中已注明引用的内容外，本论文不包含 其他个人或集体已发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要 贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式表明。本声明的法律责任 由本人承担。 论文作者签名 关于学位论文使用授权的声明 本人完全了解山东大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学 校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件或电子版，允许论 文被查阅和借阅；本人授权山东大学可以将本学位论文的全部或部分 内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段 保存论文和汇编本学位论文。 (必威体育官网网址论文在解密后应遵守此规定) 一糍噼新签名趱醐血也w 山孚大亏硕士学位论文L一异谷氨酰胺类肽化合物的设计、合成及活性研究 山孚大亏硕士学位论文 L一异谷氨酰胺类肽化合物的设计、合成及活性研究 专业：药物化学 研究生：廖一静 导师：徐文方教授 摘要 氨肽酶是一类广泛存在于动、植物细胞的肽链端解酶，哺乳类动物的氨肽 酶，包括氨肽酶A、B、N等数种。氨肽酶N(APN，CDl3)是一类膜型锌 离子依赖性的外肽酶，在人各种组织和细胞(内皮细胞、上皮细胞、成纤维细 胞和白细胞)中都有广泛表达。在体内该酶能调节活性肽反应，影响人免疫功 能，同时APN在恶性肿瘤细胞的增殖、分化、侵袭以及血管生成过程中起重 要作用。尚有研究表明APN是人冠状病毒TEGV和229E的受体。因此APN 是研究抗肿瘤抗病毒药物的一个重要靶点。 基于酶活性位点的三维结构以及已知APN抑制剂与酶的结合模式，利厢 Chem 3D Ultra 7．0软件进行分析和优化，本文设计并合成了两个系列共十五 个L一异谷氨酰胺类肽衍生物。本研究以L一谷氨酸为基本骨架， 3，4．二氯 苯甲酸形成酰氯后与之发生酰化反应，经环合反应得到关键中间体环状酸酐 (化合物3)，再经氨解反应合成目标化合物，其化学结构经过红外光谱、电 喷雾质谱和核磁共振谱(氢谱、碳谱、碳氢异核多键相关谱)确证。 对所合成的化合物均进行了体外初步生物活性评价，体外抑酶试验中，选 择两类酶(触N和MMP．2，9)分别进行了活性筛选。在抑制APN活性试验 中，以L．亮氨酰一对硝基苯胺为底物，测定化合物对APN的抑制活性；试验 结果表明，本文设计合成的大多数目标化合物均具有较好的抑制APN的活性。 初步构效关系分析，含有短脂肪侧链和芳香环氨基侧链的化合物均具活性，后 者活性相对较强；同时含杂环的氨基侧链亦具有较强的活性，含有异羟肟酸基 山孽大学硕士学位论文的化合物表现出较好的抑制活性。在抑制MMP．2，9活性试验中，以琥珀酰明 山孽大学硕士学位论文 的化合物表现出较好的抑制活性。在抑制MMP．2，9活性试验中，以琥珀酰明 胶为底物，TNBSA为显色剂，测定化合物对明胶酶的抑制活性；结果表明所 合成的化合物对明胶酶也有一定的抑制作用，但不及对APN的抑制活性强。 本文所设计合成的L一异谷氨酰胺类肽化合物，在体外对氨肽酶表现出较 好的抑制活性；初步筛选出一个活性较强、结构全新的APN抑制剂，预计其 在体内也应具有较好的抗肿瘤活性，为创新性抗肿瘤药物的研究开发提供了新 的结构骨架和研究方向。 关键词：L一异谷氨酰胺、氨肽酶N类肽抑制