MMP及CollagenⅢ在女性盆底功能障碍性疾病患者子宫主韧带组织中的表达及其意义.docx

中文摘要MMP一3及Collagenlll在女性盆底功能障碍性疾病患者 中文摘要 MMP一3及Collagenlll在女性盆底功能障碍性疾病患者 子宫主韧带组织中的表达及其意义 摘 要 目的：女性盆底功能障碍性疾病(pelvic floor dysfunction，PFD)是一种 常见的妇科疾病，主要发生于中老年妇女，近年来，随着社会趋于老龄化， 其发病率也不断增高。PFD给广大妇女身体及心理造成了很大的危害，对 于广大医务工作者而言，只有明确其发病机制，才能更好的在临床中进行 有效的诊治。 本研究通过检测PFD患者子宫主韧带组织中胶原蛋白III型 (CollagenlII)及分解胶原蛋白III的基质金属蛋白酶．3(MMP．3)的表达 水平，进而分析胶原蛋白III及MMP．3的表达水平与PFD发病的关系。 方法： 1 研究对象：标本取自2009年3月至2010年12月河北省 人民医院妇科收治的PFD患者26例作为实验组，诊断标准参照盆腔器官 脱垂定量分期法(POP—Q)，入选患者均为III、Ⅳ期POP。其中16例为绝 经前女性，10例为绝经后女性。选取同期因妇科良性病变行子宫切除术 的非PFD女性24例为对照组，其中14例为绝经前女性，10例为绝经后 女性。所有研究对象均无松皮病、肺气肿、烟雾病等弹性纤维异常疾病， 无生殖道、泌尿系感染，绝经前患者子宫内膜均处于增殖期，近3个月内 未服用激素类药物，术后病理检查证实为非子宫内膜异位症等雌激素相关 疾病。 2 实验方法：于术中取宫颈旁O．5cm范围内的子宫主韧带组织 (0．5×0．5x0．5cm3)，并经甲醛固定，常规石蜡包埋，部分组织切片行HE 染色，以明确组织学结构。本研究所有对象术前均签署知情同意书。采用 免疫组化方法，检测绝经前PFD组(16例)、绝经前对照组(14例)、绝 经后PFD组(10例)和绝经后对照组(10例)共4组50例患者子宫主 韧带组织中MMP．3及CollagenlII表达水平。 3 实验试剂：主要试剂有兔抗人III型胶原单克隆抗体、兔抗人MMP一3 多克隆抗体、S．P试剂盒、液体DAB酶底物显色试剂盒、磷酸氢二钠、 磷酸二氢钠、氯化钠，过氧化氢等。 中文摘要4免疫组化图像分析：①选择光镜下400倍视野，每张免疫组化片上随 中文摘要 4免疫组化图像分析：①选择光镜下400倍视野，每张免疫组化片上随 机选择5个视野，每个视野拍摄5幅照片；②采用Motic Med 6．0数码医 学图像分析系统分析各组子宫主韧带组织中MMP．3、CollagenIII免疫组织 化学染色的阳性区平均灰度值。然后计算平均值。 5运用SPSS(13．O)软件对数据进行统计学分析。 结果：1 PFD发病的主要影响因素 影响PFD发生的主要因素有患者的年龄、分娩次数、体重指数，绝 经年龄有关系，将绝经前与绝经后PFD组与对照组上述各主要因素进行比 较，经两均数比较t．检验，各组在各主要因素上均无显著性差异(PO．05)， 说明两组间具有较好的可比性。 2光镜观察结果 实验组女性子宫主韧带组织中胶原密度降低，排列稀疏、细碎，束间 含有血管、平滑肌等结构，细胞排列松散，细胞核存在固缩、碎裂等现象； 对照组中可见胶原纤维为淡红色，染色均匀，且含量丰富，呈束状、编织 状排列，细胞排列规则，致密，细胞核蓝染，位于胶原纤维周边，无固缩、 碎裂等现象。 3免疫组化结果 3．1 MMP．3表达结果的比较 MMP．3主要定位于胞浆中，阳性反应物为棕黄色，对每张切片在高 倍镜下观察，利用计算机系统测定其平均灰度值。 绝经前PFD组子宫主韧带组织中MMP．3表达的平均灰度值为 89．76士7．86，绝经前对照组平均灰度值为73．68士7．02，经统计学配对t检 验分析：PFD组与对照组相比，P=0．01(PO．05)，有显著性差异。 绝经后PFD组子宫主韧带组织中MMP．3的平均灰度值为 106．23±4．28，绝经后对照组平均灰度值为91．29-土7．16，经统计学配对t检 验：PFD组与对照组相比，P=0．001(PO．05)，有显著性差异。 3．2 Collagen-HI表达结果的比较 Collagen．III主要定位于胞核或胞浆中，阳性反应物为棕黄色，对每张 切片在高倍镜下观察，利用计算机系统测定其平均灰度值。 绝经前PFD组子宫主韧带组织中Collagen．III的平均灰度值为 1 02．06士7．76，绝经前对照组平均灰度值为89．59士9．89，经统计学配对t检 中文摘要验：PFD组与对照组相比，P=0．003，(PO．05)有显著性差异。 中文摘要 验：PFD组与对照组相比，P=0．003，(PO．05)有显著性差异。 绝经后PFD组子宫主韧带组织中Collagen．III的