MTHFR IL28B基因态性与HBV感染后疾病转归关系的研究.docx

天津医科大学硕士学位论文 中文摘要 人体感染乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus，HBV)后，在宿主和病毒等因素的 共同作用下，将呈现复杂多样的临床转归，包括病毒自然清除后自愈、无症状 病毒携带者以及持续感染进展为慢性肝炎(CriB)、肝硬化或原发性肝癌(HCC)等。 越来越多的证据表明，宿主基因多态性在HBV感染后疾病的进展和转归过程中 发挥重要作用。因此，探讨宿主亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR，叶酸代谢的关 键酶)和白介素．28B(IL．28B，在病毒清除时发挥重要作用)的基因多态性对HBV 感染后疾病进展的影响具有重要临床意义。 研究目的：通过大样本分析MTHFR和IL．28B基因的2个SNP位点在各 类肝病中的分布特点，探讨其与HBV感染后疾病进展的关系。通过检测肝病患 者血清中同型半胱氨酸(HCY)、叶酸和MTHFR的水平，分析其相互关联性及与 肝病进展的相关性。 研究方法：采用TaqMan SNP基因分型的方法对不同进展阶段的HBV感染 者进行MTHFR rsl801 133位点(C—T)、IL．28B rs8099917位点(T—G)的多态性 检测。并挑选乙肝自愈组、肝硬化组和HCC组研究对象各30例，采用酶联免 疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测血清HCY、MTHFR和叶酸的水平。 研究结果：1．MTHFR基因：3060例研究对象的基因型分布：TT型占29．3％、 CT占48．9％、CC占21．8％；等位基因频率：T为53．8％、C为46．2％。该位点 基因型和等位基因频率在各组、总体以及各组女性间的差异均无统计学意义(P O．05)；在男性各组中，HCC组T等位基因频率最低(49．8％)且差异具有统计学 意义(P0．05)。经校正年龄和性别后的Logistic回归分析表明，TT型和T等位 基因降低HCC的风险，以健康组为对照时(OR=0．588，P=0．003；OR=0．768， P=0．003)、以自愈组为对照时(OR=0．598，P=0．01；OR=0．772，P=0．001)。进一 步按性别进行分层分析，以健康组为对照时，TT型降低男性HCC风险 (OR--0．587，P=0．017)；TT型在女性各组的风险均无统计差异，但是CT型却降 低女性HCC的风险(OR--0．486，P=0．012)；当以自愈组为对照时，TT型降低男 性肝硬化和HCC的风险(OR=0．624，P=0．046；OR=0．470，P=0．002)，而对女性 各组依然无差异。同样，等位基因的分析也表明，T降低男性肝硬化和HCC的 风险(OR=0．791，P=0???048；OR=0。681，P=0．002)，而在女性各组风险度均无统计 差异(PO．05)。与临床特征相关性分析显示，TT型有利于男性HBsAg转化并降  天津医科大学硕士学位论文 低AFP水平(HBsAg：OR=0．763，P=0．049；AFP：OR=0．6 1 7，P=0．023)；对于女 性，TT型却增加Child—pugh B级和C级以及7-GT II(+)的风险性(B级：OR=2．007， P=0．024：C级：OR=5．127，P--0．013；y-GTII(+)：OR=9．310，P=0．033)。 2．血清HCY、叶酸和MTHI琅检测：随着肝功能水平的降低，血清HCY水 平增高，且差异具有统计学意义fPO。05)；血清叶酸和MTHFR水平在自愈组中 显著高于肝硬化组和肝癌组(P0．01)。三个指标的相关性分析显示，叶酸和 MTt-IFR呈显著的正相关(所有研究对象：r=0．90，P=0．00；慢性肝病患者r=0．78， P--0．oo)。三个指标在不同临床特征的组间分层分析显示，具有饮酒史的肝病患 者血清HCY水平高于无饮酒史者(t=．1．92，P=0．060)。HBsAg(一)和HBV DNA( 500copies／m1)的肝病患者血清MTHFR和叶酸水平分别高于HBsAg(+)矛D HBV DNA(耋500copies／m1)者(P0．05)。 3．IL．28B基因：486例研究对象的基因型和等位基因的频率分布：TT型占 89．3％、GT占10．5％、GG占0．2％；T为94．5％，G为5．5％。该位点基因型和 等位基因频率在各组间及各组内不同性别间的差异均无统计学意义(P0．05)。以 健康组为对照经性别和年龄因素调整后，TG／GG型在自愈组、肝硬化组和肝癌 组的OR值(95％CI)分别为1．589(0．735--一3．437)、P=0．239；1．351(o．550～3．316)、 P=0．512：1．704(0．717～4．052)、P=O．228。与临床特征相关性分析表明，肝癌组 TG／GG型携带者Y．GTII阳性的风险是T