HPVHuman papllomavirus在结直肠癌中的流行病学研究.docx

浙 江 浙 江 大 学 硕 士 学 位 论 文 即 v (H u m a n p 即 ilxo m avir us ) 在 结 直 肠 癌 中 的 流 行 病 学 研 究 致 谢 本 论 文 的 主 要 工 作 是 在 浙 江 大 学 医 学 院 附 属 第 一 医 院微 生 态研 究 中心 完 成 .:. 感 谢 导 师项 春 生研 究 员对 我 的指 导 、学术 上 的教 诲 、生 活上 的 关 心 帮 助 和 思 想 上 的启 迪 。 .:. 感 谢 牟 晓 洲 师兄 、凌 宗欣 师兄 、陈伟 光 师兄 、孔建 明 、刘 芳 等 同 学在 实 验 过 程 中 给 予 的 帮 助 。 .:. 感 谢 实 验 室博 士后 张琼 老 师 、工 作 人 员李 益 飞 、袁 立 的帮 助 . .:. 感 谢 宿 舍 的姐 妹 和 王 丹 等朋 友 在 生 活 上 给 予 的支 持 。 .:. 感 谢 我 的家 人 在 我精 神 上 和 生 活 上 的 默 默 支 持 。 赵 娜 加 10 年 1 月 浙 江 浙 江 大 学 硕 士 学 位 论 文 H P v (H u m a n p 叩 i llo m a vi ru s ) 在 结 直 肠 癌 中 的 流 行 病 学 研 究 摘 要 人 乳 头瘤 病 毒 (H um an p ap illom av irus，H P v ) 感 染 和 宫颈 癌 的相 关性 已经 确 定 ，但 是 H P V 感 染 与结 直肠 癌 的 关 系 以及 H P V 病 毒 是 否 可 以通 过 血 液传 播 至 今 还 没 有 一个 定 论 。 为 了调 查 H P V 在 结 直肠 癌 病 人 中的存 在 情 况 ，并 同 时研 究 H P V D N A 是 否 可 以通 过 血 液 传 播 以及 在 结 直肠 癌 病 人 外 周 血 中检 出 H P V D N A 是 否 可 以作 为 一个 诊 断 结 直肠 癌 的分 子标 记 ，本 实验 收集 了 % 对 配 对 的结 直 肠 癌 病 人 的癌 组 织 、癌 旁粘 膜 和 外周 血 ， 同 时 收集 了 48 例 健 康 体 检 者 的外 周 血 ， 用 通用 引物 P G M Y/ G P P c R 的方 法检 测 其 中 HP v D N A 的存 在 情 况 ，并用 焦磷 酸 测序 和 反 向斑 点杂 交 的方 法 进 行 HP V 分 型分 析 。结 果 在 犯 例 ( 33 .3% ) 病 人 样 品 ( 结 直 肠 癌 组 织或 癌 旁 粘 膜 或 外周 血 ) 中检 测到 HP V D N A 的存 在 。其 中癌 组 织 中检 测 到 28 例 (2 9.2% )，癌 旁粘 膜 中检 测 到 3 例 ( 3.1% )，外周 血 中检 测 到 4 例 (4.2% )。在 4 8 例 健 康 志愿 者 的血 液 样 品中共检 测 到 3 例 ( 6.3% ) H P v 阳性 样 品。分 型 结果 显 示 H P V 16 型 为 主 要 感 染 型别 ，35 例 H P v 阳性 病 人 样 品 中 33 例 为 H P V 16 ( 9 1.4 % )，其 余 三例 分 别 为 H P V 18 、H P V 5 1 、H P V 59 。3 例 H P V 阳 性 志愿 者 血 液 中均 为 H P v 16 。癌 组 织和癌 旁 中的检 出率 有 显著 差 异(P 0.00 1)， 显 示 即 V 可 能对 结 直 肠 癌 的发 生发 展 有 一定 作用 。病 人 外周 血 和 健 康 志愿 者 的 外周 血 H P V D N A 检 出率 并 没 有 显著 差 异 ，所 以我们 认 为 外周 血 中 HP V D N A 的 存 在 并 不 能作 为 预 测 癌 症 风 险 的 一个 分 子 标 记 ，但 是 H P V D N A 在 血 液 中 的检 出 提 示血 液 可 能是 H P V 传 播 的途 径 之 一 。 为 进 一步研 究 H P v 16 E 6 癌 基 因在 结 直肠 癌 发 生 、发 展 中所 起 的作 用 ，本 实验 构 建 了 p E G F P 一H P v l6 E 6 真 核 表 达 载体 ，为后 期 机 制研 究打 下基 础 。 同 时 我们 还 研 发 了一 种 利 用 M G B Ta qm an 探 针 荧 光 定 量 P c R 同 时检 测 H P v 16 、 18 的方 法 。 关键 词 : H P V ， 结 直 肠