FEN1基因的遗传学和表观遗传学调控及其与多种肿瘤发生发展关系-肿瘤学(基础)专业毕业论文.docx

北京协和医学院博士学位论文／杨明 北京协和医学院博士学位论文／杨明 摘要 摘要 背景和目的：FENI(Flap endonuclease 1)通过参与多种DNA代谢途径在维护基 因组稳定性和防止细胞恶性转化过程中发挥重要作用．FENI基因的遗传学和表观遗 传学改变可能影响其表达水平，从而与宿主的肿瘤易感性和肿瘤进展相关。本研究筛 查了汉族人群FENl基因功能性遗传变异及其启动子甲基化状态的改变并探讨其与 肿瘤发生发展的关系。 方法：以全基因策略分析FENI遗传变异；用一系列生物化学实验研究遗传变异 对基因功能的影响。以彗星实验(Comet test)测定携带不同基因型焦炉作业工人白细 胞DNA损伤修复程度。以重亚硫酸盐．DNA测序法分析FENl启动子甲基化改变， 实时定量PCR检测FENI mRNA表达量。以cDNA芯片和组织芯片技术检测陋Ⅳ， 在多种肿瘤标本中的表达情况。以病例．对照研究方法分析遗传变异与肿瘤易感性的 关系，相关程度以多因素logistic回归计算的比值Et(odds ratio，OR)及其95％可信区 限(confidence interval，c0表示。所有统计检验均为双侧检验。 结果：DNA测序发现FENl基因存在两个高度连锁的单核苷酸多态，liP-69G／A 和4150G／T多态。位于启动子区的一69A---}G改变可能增加抑制性转录因子结合从而 降低FENl转录活性，而4150G---T改变增加FENI表达。在焦炉作业工人中，携带 FENl--69G或41 50G等位基因者DNA损伤程度显著高于携带-69A或41 50T者。含 1，013例肺癌和l，131例对照的病例．对照分析显示，--69GG或4150GG基因型单独或 与吸烟有相乘的联合作用增加肺癌发病风险。与相应的正常组织相比，多种肿瘤中 FENI mRNA的表达显著上调。在伴有不典型增生的良性乳腺疾病和各种乳腺痛组织 中皆有FENI表达，且其表达量随肿瘤的进展而逐渐升高。FENI启动子含两个CpG 岛。其中CpG岛2在肿瘤组织中的去甲基化可能是导致FENl在多种肿瘤组织中表 达增高的主要原因。 结论：FENl在肿瘤发生和发展的不同阶段通过相应的遗传学和表观遗传学改变 分别与个体的肿瘤易感性和肿瘤进展相关。 关键词：FENl；单核苷酸多态；DNA甲基化；肿瘤易感性；肿瘤进展 北京协和医学院博：}：学位论文／杨明 北京协和医学院博：}：学位论文／杨明 摘要 Differential Expression of FENl Caused by DNA Genetic and Epigenetic Changes Is Associated with Multiple Cancers ABSTRACT Background＆Aims：Flap endonuclease I(FEN 1)，involved in many DNA metabolic pathways，plays all essential role in maintaining genome integrity and cancer development． The genetic and epigenetic changes of FENl gene might contribute to differential FENl expression and，thus，be associated with individual susceptibility to cancer development and poor prognosis．This study sought to identify single nucleotide polymorphisms(SNPs) in the FENl gene and aberrant methylation of its promoter CpG islands and evaluated their effects on tumor development and progression． Methods：DNA samples