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IL-17对小鼠结癌肿瘤组织中细胞因子表达及CD4T细胞亚群分布的影响
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研究生签轹蠕 导师签章:翮
僻r月7日
万方数据
目 录
中文摘要 ·1
英文摘要 5
研究论文IL—17在小鼠结肠癌发生发展中的作用
前言月U舌 .1’l 0U
材料与方法 ··1l
结果 ··23
附图 ··26
附表 ··36
讨论 ..39
结论 ... 42
参考文献 ··43
综述IL.17对肿瘤微环境的影响 ..45
致谢 ..52
个人简历 ..53
万方数据
中文摘要
IL.17在小鼠结肠癌发生发展中的作用
摘 要
目的:结肠癌是临床上常见的消化道肿瘤之,’,好发于50~60岁人 群,占所有癌症的第三位。【l,2】随着经济的高速发展,人们的生活水平不 断提高,由此带来的饮食结构改变,如少纤维多脂肪,使得该病的发病率 在全球范围内呈现逐年升高趋势。13]目前对于结肠癌的治疗仍以手术作为 首选方式,术后或术前结合化学治疗等辅助方法取得,。定效果,但是其5 年生存率低耐药性强等诸多因素,【4J促使我们亟待寻求更为有效的治疗手 段。上个世纪80年代,肿瘤的生物治疗问世,至今已经成为第四种肿瘤 治疗方法,而其中的免疫治疗为最常用的方法之一一。【5】免疫疗法就是通过 增强人体免疫力,调整机体抗瘤能力,达到抑制肿瘤的发生、发展及转移。 细胞因子是一类具有多种生物学效应的小分子蛋白,其家族成员很多在肿 瘤的发生、发展中起到重要作用,【6】因此细胞因子治疗已成为肿瘤免疫治 疗的常用手段之一。IL.17作为Thl7细胞的特征性细胞因子,其在肿瘤 t}l的作川引起厂我们的兴趣,前期研究结果显示接种C26/pcDNA3.1.IL一1 7 细胞的小鼠移植瘤体积明显小于接种C26细胞和C26/pcDNA3.1细胞的小
鼠移植瘤大小,这说明IL.17可以抑制肿瘤的生长,但是IL.17并不影响
各组小鼠的生存期。因此,本研究将对IL.17在结肠癌发生发展中的作用 进行深入研究,并探讨其抗瘤机制。
方法: 1荷瘤小鼠脾细胞亚群分布检测
荷瘤小鼠接种肿瘤细胞后35天,取各组小鼠脾脏,利用密度梯度离 心法分离脾淋巴细胞,分别提取各组脾淋巴细胞的RNA,Real.Time PCR 法检测与各Th细胞相关的特征性细胞因子和转录因子的表达。
2 IL.17对肿瘤组织中淋巴细胞浸润情况检测 荷瘤小鼠接种肿瘤细胞后35天,取各组小鼠肿瘤组织,甲醛固定后
制备蜡块,切片后HE染色法观察接种C26/pcDNA3.1.IL.17细胞的小鼠 肿瘤组织与接种C26/pcDNA3.1细胞和接种C26细胞的小鼠肿瘤组织中淋 巴细胞浸润数量的区别。
万方数据
中文摘要
3 IL.1 7对肿瘤组织中血管密度影响情况检测 荷瘤小鼠接种肿瘤细胞后35天,取各组小鼠肿瘤组织,甲醛固定后
制备蜡块,切片后免疫组化法标记血管,对比三组荷瘤小鼠肿瘤组织中血 管数量。
4荷瘤小鼠肿瘤组织中相关细胞因子检测 荷瘤小鼠接种肿瘤细胞后35天,Real.Time PCR法和Western blot法
检测肿瘤组织中相关细胞因子的表达情况。 5荷瘤小鼠肿瘤组织中Thl,Th2,Thl7,Treg细胞特征性转录因子
的表达情况检测
荷瘤小鼠接种肿瘤细胞后35天,分别取各组小鼠肿瘤组织,Real.Time PCR法分别检测Thl、Th2、Thl7、Treg细胞的特征性转录因子。
6 IL.17对肿瘤细胞凋亡情况研究 荷瘤小鼠接种肿瘤细胞后35天,取各组小鼠肿瘤组织,甲醛固定制
备蜡块,切片后TUNEL法检测各肿瘤组织中凋亡细胞数量。
结果:
1 IL.17影响荷瘤小鼠脾细胞亚群分布研究
Real.Time PCR法检测结果显示,与接种C26、C26/pcDNA3.1的荷 瘤小鼠相比,IL.17可以使接种C26/pcDNA3.1.IL.17细胞的荷瘤小鼠脾
淋巴细胞中ROR.矿细胞、IFN.丫+细胞、Th2+细胞和IL.10+细胞细胞增多
(尸O.05),同时IL.17+细胞、T-bet+细胞和Foxp.3+细胞
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