LB10增加低氧环境下肝细胞肝癌对索拉菲尼敏感性研究.docx

浙江大学博士学位论文致谢 浙江大学博士学位论文 致谢 时光滴答一直向前，这一次停留的片刻，我博士毕业了!I口-J一句八年的时间 都去哪儿了?你有没有成为你想象中的模样? 庆幸能够成为梁廷波教授的博士生。感谢我的导师对我人生观和价值观的雕 琢，他电影快进般的打结速度，时刻提醒着我，应当怀抱医学的使命，甄综术艺； 感谢我的导师对我学术思维的训练，每一次科研组会不断地发问和质疑，都促使 我看到思维的盲区，填补研究的漏洞。感谢我的导师对我做事方法的督促，即使 是电话、邮件指导，均附送严谨凌厉的氛围，使我不断反思怎样可以把事情做得 更好，如何成为一个更加靠谱、值得信赖的人。 特别感谢浙江大学医学院附属第二医院肝胆胰外科白雪莉主任医师对我的悉 心指导。她专注投入的工作态度、精益求精的学习劲头，是女性在职场的精神标 杆。她时常提醒我，学术界发展日新月异，抓紧时间，不能落后；她对我的课题 给予的关键性的指导、为实验的开展创造必要的条件；她传授我科学论文书写词 句精炼、达意、优美的宝贵经验。 衷心感谢章琦师兄对我科研工作的带领和至今不断的帮助。感谢我们携手做 过的课题，他发散活跃的思维使辛苦积攒数据的每一天都变得新奇有趣，他的智 慧和经验都使大部分的困难都不那么困难了。他甚至成为了我努力的目标，3年后， 我能成为如此优秀的他吗? 感谢陈伟师兄、马涛师兄、俞夏榛师兄、叶龙云师兄、魏涛师兄、刘昊师兄、 陈琦师兄、胡奇达师兄、张谊博师兄、支枭师兄、徐韬师兄、张剑师兄、余磊师 姐，感谢你们对我的关照，并毫无保留地与我分享科研的心得和经验，并对我的 请教不厌其烦。感谢陈怡文博士、粟伟博士、苏日嘎博士、周悦博士、闻良博士、 陈伟硕士、孙旭硕士，你们都那么优秀，我也不敢落后。感谢杨加琦师弟、楼煜 师弟、王健鑫师弟、徐兴远师弟、杨津师弟、张靖莹师妹、张晓雨师妹对我工作 万方数据 浙江大学博士学位论文的支持和学术的奇妙探讨。感谢技术员秦浩、王艺、胡立强、王建锋、缪晓燕、 浙江大学博士学位论文 的支持和学术的奇妙探讨。感谢技术员秦浩、王艺、胡立强、王建锋、缪晓燕、 郑小小，感谢你们的有力协助。感谢与你们共处一个热爱学术，努力向上的团队， 此刻真高兴，愿为前程各奔赴，亦有岁月可回头。 特别感谢浙江大学医学院骆严教授及其团队纪冰琰硕士，感谢浙江大学医学 院夏强教授及其团队赵亮博士为我的课题提供良好的实验平台和诸多具体的帮 助。感谢浙江大学医学院吴希美教授及其团队龚滢博士、王勇杰博士、阮红峰博 士在我本科阶段给予的科研启蒙训练。 最后感谢傅先生和南女士，没有你们就没有傅博士的诞生。感谢所有无法具 名的朋友对我无微不至的关怀。 II 万方数据 浙江大学博士学位论文 浙江大学博士学位论文 中文摘要 LB．100增加低氧环境下肝细胞肝癌 对索拉菲尼敏感性研究 浙江大学医学院 外科学(普外) 博士研究生 傅琦涵 导 师 梁廷波教授 中文摘要 背景和目的： 肝细胞肝癌(HCC)是一种常见的肿瘤类型，预后较差。多激酶抑制剂索拉 菲尼是临床上唯一获批用于肝癌系统性治疗的药物。然而，仅有少数病人对索拉 菲尼敏感。低氧的微环境被认为是索拉菲尼耐药的原因之一。既往研究发现， LB一100，一种丝氨酸／苏氨酸蛋白酶磷酸酶2A(PP2A)抑制剂作用于肝细胞肝癌 具有化疗增敏作用。本研究中，我们检测了LB。100是否具有增加肝癌细胞对索拉 菲尼敏感性的作用。 方法： 使用Cell Counting Kit．8检测细胞活力；使用Annexin V-FITC Detection Kit试 剂盒检测细胞凋亡；使用免疫印迹法检测细胞蛋白表达水平相对变化；使用Ser／Thr phosphatase assay kit I检测PP2A活性。在裸鼠模型上，比较索拉菲尼单用或与 LB一100联合使用对肝细胞肝癌皮下移植瘤生长的影响。 III 万方数据 浙江大学博士学位论文 浙江大学博士学位论文 中文摘要 结果： 仅在低氧环境中，LB．100能够增加索拉菲尼对肝癌细胞的抑制效果。LB．100 能够显著地上调肝癌细胞中p．Smad3蛋白水平，P．Smad3水平的上调介导了LB．100 的化疗增敏效应。LB．100下调了抗凋亡蛋白Bcl．2表达水平，增加了索拉菲尼诱 导的肝癌凋亡。进一步地，我们证明LB一100诱导的P．Smad3过表达是通过抑制 PP2A活性实现的。此外，在低氧环境下，LB。100诱导了p38 MAPK通路激活， 这也增加了pSmad3依赖的Bcl．2下调及后续的凋亡。 结论： 低氧环境下，LB一100增加肝癌细胞对索拉菲尼的敏感性。这种化疗增敏作用 是通过抑制PP2A，引起p-Smad3水平的升高实现的。升高的p-Smad3下调了Bcl．2， 导致了肝癌细胞的凋亡增加。 关键词：p-Sm