HIF1α对氧微环境下垂体腺瘤侵袭机制调控的研究.docx

复 旦 复 旦 人 学 博 士 学 位 论 文 川 F 一l 。对 缺氧 微 环 境 下 垂 体 腺 瘤 侵 袭 机 制 调 控 的研 究 A b s tr a c t o b jectiv e : To in v e stig ate th e ex P ressio n o f h yP o x ia in d u e in g faeto r-la in P itUitary a d e n o m a s， a n d its re la tio n sh iP w ith th e tu m o r in v a siv e n e s s . T h e e x P re ssio n o f H IF 一1 a w a s su P P re ss e d b y R N A in te rf ere n c e re c o m b in a n t le n tiv ir u s ，to o b se rv e th e in v asiv e b eh av io r o f P rim ary eu ltured P itu itary ad en o m a eells (PA C s) in th e h yP o x ie m ie ro e n v io rllle n t. M e th o d s : T h e e x P re s sio n o f H IF 一l a ， M M P 一9 an d V E G F w e re d e te e te d b y im m u n o sta in in g .A n d th e m R N A le v e ls o f H IF 一l a ，M M P 一9 a n d V E G F w e re d e te e te d b y R T - P C R . T h e re la tio n sh iP s b e tw e e n th e a b o v e in d e x e s a n d th e tu m o r in v a siv e n e s s w e re a n a ly se d . T h e g o w th a n d im m ig ra tio n o f th e p r im a ry e u ltu re d a n d p u r if ie d PA C s w e re o b se rv e d in v itro . C e ll e y e le s w e re d ete ete d b y fio w e yto m e try. Th e e x P re s sio n o f h o r m o n e re e e P to r w a s d e te e te d b y im m u n o f lu o re se e n e e . T h e s e q u e n e e o f H IF 一l a s h R N A w a s d e sig n e d to sy n th e s iz e P R N A T ‘U 6 .2 le n tiv ir u s f o r sta b le tra n s f ee tio n o f P A C s . T h e in te rf ere n e e e f fi e ie n e y w a s e lle e k e d b y R T - P C R a n d W 亡stern一b lo t.T h e h yP o x ie In o d el an d in v asiee m o d el in v itro (B o y d en eh am b er) w ere b u ilt to o b se r v e th e e h a n g e o f H IF 一la e x P re ssio n le v e l re g u la te d b y R N A i，a n d th e in