Hu IL-37对寻常型银屑病角质形成细胞抗炎、抗殖研究.docx

四刖医科太堂亟±堂僮途塞——目 四刖医科太堂亟±堂僮途塞—— 目 录 1 Hu IL一37对寻常型银屑病角质形成细胞抗炎、抗增殖研究 1．1 中文摘要 1 1．2 英文摘要 3 1．3 前言 6 1．4 材料与方法 9 1．5 结果 20 1．6 讨论 27 1．7 结论 36 1．8 参考文献 37 1．9 英汉缩略词对照表 43 2 致谢 44 3 IL一37及其与疾病相关性的研究进展(综述) ···········································································46 万方数据 Hu Hu IL．37对寻常型银屑病角质形成细胞 抗炎、抗增殖研究 摘 要 目的：银屑病是一种以角质形成细胞(keratinocyte，KC)异常分化、 过度增殖为特征的常见的慢性炎性皮肤病。其确切病因尚不清，但可能与 遗传、环境和免疫因素有关。目前认为白细胞介素一6(interleukin一6，IL一6)、 肿瘤坏死因子一a(tumor necrosis factor一0【，TNF一0c)和丫一干扰素(interferon一丫， IFN吖)等免疫炎性因子在银屑病的发生发展中起重要促进作用。IL一37作 为一种新型炎性抑制因子，通过抑制促炎细胞因子、趋化因子等的产生以 及对基因转录的调控，在多种炎性反应及免疫相关性疾病中起重要的拮抗 作用。但目前未见IL一37对人银屑病皮损作用的相关报道。本研究通过观 察重组人IL一37蛋白(recombinant human IL一37，Hu IL一37)对人寻常型银 屑病皮损KC中IL．6、n师一0c和IFN吖mRNA表达的影响及对细胞增殖的 影响，初步探讨Hu IL一37在人银屑病中的抗炎、抗增殖效应，为银屑病的 治疗提供新的治疗思路与可能的靶点。方法：1．收集进行期寻常型银屑病 患者5例，切取患者皮损区皮肤进行原代培养，获得KC。2．将培养的KC 分为A、B、C、D 4组。其中A组、B组和C组分别加入浓度梯度逐渐升 高的Hu IL一37(A组：lOng／ml，B组：100ng／ml，C组：200ng／m1)进行 干预细胞，D组(对照组)不作任何干预措施。24h后收集细胞，采用CCK．8 法分别检测4组细胞的增殖情况；采用荧光定量PCR法分别检测4组细 胞中IL一6、TNF—O【和IFN—v mRNA表达水平。结果：1．二步消化法联合无 血清培养法可以分离和培养出人KC。2．Hu IL一37对人寻常型银屑病皮损 一1 万方数据 KC增殖的影响：不同浓度Hu KC增殖的影响：不同浓度Hu IL．37分别干预细胞24h后，B组和C组的 细胞数均明显低于D组(尸0．05)，尤以C组为甚；而A组与D组相比 细胞数无统计学差异(胗O．05)。A组、B组和C组细胞增殖的抑制率分 别为(10．49土5．65)％、(25．47土6．13)％和(42．49士3．81)％，其中C组 均高于A组和B组(PO．05)，B组高于A组(尸O．05)。3．Hu IL一37 对人寻常型银屑病皮损KC中IL．6、TNF一0c和IFN—v mRNA表达的影响： 不同浓度Hu IL一37分别干预细胞24h后，A组、B组和C组中IL．6 mRNA 表达水平均低于D组(尸O．05)，且C组IL一6 mRNA表达水平均低于B 组和A组(PO．05)，B组IL一6 mRNA表达水平低于A组(PO．05)。B 组和C组中TNF一0【mRNA表达水平均低于D组(尸O．05)，A组与D组 中TNF一0c mRNA表达水平无统计学差异(尸0．05)，B组和C组TNF一仅 mRNA表达水平均低于A组(P0．0fi)，B组与C组中TNF一仅mRNA表 达水平无统计学差异(尸0．05)。A组、B组和C组细胞中IFN一丫mRNA 表达水平均低于D组(尸O．05)，且C组IFN—Y mRNA表达水平均低于B 组和A组(尸O．05)，B组IFN—Y mRNA表达水平低于A组(尸O．05)。 结论：1．Hu IL一37可抑制人寻常型银屑病皮损KC增殖，且在一定浓度范 围内存在量一效关系，浓度越高，对细胞增殖的抑制作用越强。2．Hu IL一37 可降低人寻常型银屑病皮损KC中IL一6、TNF一0【和IFN—Y mRNA表达，具 有抗炎作用；且在一定浓度范围内存在量一效关系，浓度越高，作用越明显。 关键词：寻常型银屑病；角质形成细胞；Hu IL一37；细胞培养；IL．6 mRNA；TNF一仅mRNA；IFN—v mRNA；细胞增殖 万方数据 四刖医登太堂亟±堂僮途塞The 四刖医登太堂亟±堂僮途塞 The Study of Anti-inflammatory and Ant