IBV M41人工感染SPF鸡靶器官中固有免疫相关子应答的动态观察.docx

及气管和哈德氏腺中的SIgA进行分析，同时对感染后不同时相气管、 及气管和哈德氏腺中的SIgA进行分析，同时对感染后不同时相气管、 肾脏和哈德氏腺的组织病理学变化进行观察，旨在探讨IBV M41毒 株人工感染SPF鸡后病毒在气管、肾脏和哈德氏腺中的分布规律， 及其对TLR3信号通路和黏膜SIgA的影响，揭示IBV M41感染鸡的 致病机理和宿主天然抗病毒的防御机制。研究结果如下： 1、IBV M41感染SPF鸡后，气管、肾脏和哈德氏腺出现不同程 度的病理学变化。气管在感染早期(1-8DPI)出现黏膜上皮细胞变性 或坏死，黏膜下层淋巴细胞浸润，发生气管炎症，IHC检测结果表明 病毒含量在此期间维持较高水平，并在5DPI达到峰值；感染中期 (11．14DPI)，气管黏膜逐渐修复，上皮细胞再生，淋巴细胞浸润减 少，病毒含量快速降低；感染后期(21．28DPI)，气管中的病毒被清 除，组织基本结构恢复正常。肾脏组织在5DPI至1 1DPI出现明显的 病理学变化，肾小管轻度变性或坏死，间质有数个淋巴细胞浸润，病 毒含量在此期间较多，但较气管组织少，在8DPI达到峰值；14DPI 后病毒含量降低并逐渐消失，组织病变逐渐减轻至结构正常。1DPI 至3DPI哈德氏腺中无病毒分布也无明显病理学变化；5DPI至14DPI， 组织细胞变性或坏死，问质增宽，淋巴细胞增多，并检测到少量病毒 分布；21DPI后，病毒消失，组织结构逐渐恢复。研究结果显示气管 组织病变比肾脏和哈德氏腺严重，且病毒含量也明显高于肾脏和哈德 氏腺，表明IBV M41毒株对不同组织亲嗜性不同，造成的病理损伤 程度也不同，病理损伤程度和病毒含量存在相关性。 2、IHC检测结果显示TLR3、NF．r．B和IRF．7主要分布在气管黏 万方数据 膜上皮细胞和肾脏肾小管上皮细胞胞浆中，部分胞核也有NF。r,B和 膜上皮细胞和肾脏肾小管上皮细胞胞浆中，部分胞核也有NF。r,B和 IRF．7分布。试验组气管中的TLR3、NF．r．B和IRF．7的表达量在3DPI 至8DPI出现不同程度上调，分别在5DPI、5DPI和8DPI达到峰值 (PO．01)，IRF．7在细胞核中的表达量明显增多；11DPI至14DPI， 仍有较多的TLR3表达(PO．05)，NF．rd3和IRF．7的表达量逐渐恢 复到正常水平；21DPI后，TLR3表达量也恢复到正常水平；试验组 肾脏中的TLR3和NF．rd3的表达量在5DPI至1 1DPI出现不同程度上 调，分别在8DPI和5DPI达到峰值(PO．01)，IRF．7的表达量在3DPI 至5DPI略有上升，且细胞核中的表达量明显增多；14DPI后，TLR3 和NF．r,B的表达量逐渐恢复到正常水平；IRF．7的表达量在8DPI恢 复到正常水平，但细胞核中的表达量仍然较高，21DPI后减少。 3、在感染IBV M41前期(1DPI至11DPI)，试验组和对照组哈 德氏腺均无SIgA阳性细胞分布。14DPI，试验组和对照组哈德氏腺 均检测到SIgA阳性细胞，试验组SIgA阳性细胞较大较圆，充满棕 红色阳性颗粒，且局部数量增多；对照组SIgA阳性细胞较小，呈三 角形、椭圆形等。21DPI至28DPI，其形态和数量与对照组相近。而 整个试验过程中，气管组织中均未检测到SIgA阳性细胞分布。 综上所述，IBV感染早期，SPF鸡气管出现明显的病理学变化， 病毒含量从1DPI开始上升，在3DPI至8DPI维持较高水平，并在5DPI 达到峰值；在此期间，气管中TLR3、NF．1(B和IRF．7的表达量均有 不同程度上升，其中TLR3上升最明显且持续时间最长，与对照组相 比，从3DPI至14DPI，其阳性表达量差异显著；NF．rd3和IRF．7出 III 万方数据 现变化的时间分别在3DPI．8DPI和5DPI．8DPI，且两者在细胞核中的 现变化的时间分别在3DPI．8DPI和5DPI．8DPI，且两者在细胞核中的 表达量均增多，其中IRF．7最明显。IBV感染后期，气管组织结构恢 复正常，病毒含量迅速下降并逐渐消失，TLR3、NF．KB和IRF．7的 表达量恢复到正常水平。IBV M41感染后肾脏组织出现轻度的病理学 变化且出现病变的时间较迟，病变发生于5DPI．14DPI；其病毒含量 和TLR3、NF．1(B及IRF．7的表达量变化规律与气管基本一致，但变 化不如气管明显，且持续时间较气管短，病毒含量较高时间点和 TLR3、NF．1cB及IRF．7表达量变化时间基本是在5DPI．8DPI左右。 哈德氏腺中的SIgA阳性细胞在IBV M41感染中期变大变圆，局部数 量增多；感染后期形态数量恢复正常。说明IBV M41感染可引起TLR3 信号通路及其信号通路下游的转录因子NF