FoxMCMet正反馈环路促进舌鳞癌细胞上皮间充质转化及侵袭迁移的机制研究.docx

优秀毕业论文 精品参考文献资料 解放军医学院博士学位论文5 解放军医学院博士学位论文 5小结 ．22 第三章FOXMl通过C—MET信号通路促进舌鳞癌细胞上皮间充质转化及侵袭迁移 的机制研究 。23 1材料与试剂 ．．23 1．1菌株 23 1．2舌癌细胞系 ．．23 1．3实验仪器 一23 1．4实验试剂 一23 1．5实验缓冲液 一24 2方法 ．．25 2．1细胞培养 ．．25 2．2细胞转染 ．．26 2．3细胞总RNA提取及反转录 27 2．4 RT-PCR逆转录聚合酶链式反应 28 2．5蛋白印迹(western blot) ．．29 2．6 Transwell细胞迁移实验 ．．32 2．7 Transwell细胞侵袭实验 一32 2．8染色质免疫共沉淀(ChIP) 一32 2．9荧光酶素报告基因(Luciferase) ．34 2．1 0统计学分析 38 3结果 ．38 3．1干涉FoxMl舌鳞癌细胞系的鉴定及相关分子变化 38 3．2干涉FoxMl能显著降低舌鳞癌细胞的迁移侵袭能力 40 3．3在舌鳞癌细胞中过表达FoxMl对c．Met信号通路、EMT和侵袭迁移的影 响 一40 3．4 ChIP结果 ．42 3．5 Luciferase结果 ．43 4讨论 ．44 2 万方数据 解放军医学院博士学位论文5 解放军医学院博士学位论文 5小结 ．46 第四章C．MET信号通路通过调控FOXMl促进舌鳞癌细胞上皮问充质转化及侵袭 迁移的机制研究 ．47 1材料与试剂 ．47 1．1细胞培养 一47 1．2实验仪器 ．．47 1．3实验试剂 一47 1．4实验缓冲液 ．．48 2方法 ．48 2．1细胞培养 48 2．2细胞转染 ．．48 2．3细胞总RNA提取及反转录 49 2．4 RT-PCR逆转录聚合酶链式反应 ．49 2．5蛋白印迹(western blot) 一49 2．6 Transwell细胞迁移实验 一49 2．7 Transwell细胞侵袭实验 一49 2．8统计学分析 49 3结果 ．50 3．1干涉c．Met的舌鳞癌细胞系的鉴定及相关分子变化 50 3．2干涉c．Met能显著降低舌鳞癌细胞的迁移侵袭能力 51 3．3在舌鳞癌细胞中过表达c—Met对FoxMl信号通路、EMT和侵袭迁移的影 日I句 ．．5 1 4讨论 ．53 5小结 ．55 第五章结论 ．57 文献综述 ．58 参考文献 ．72 3 万方数据 解放军医学院博士学位论文缩略词表 解放军医学院博士学位论文 缩略词表 万方数据 解放军医学院博士学位论文PBS 解放军医学院博士学位论文 PBS phosphate buffered saline 磷酸盐缓冲液 PCR polymerase chain reaction 聚合酶链式反应 PET positron emission tomography 正电子发射断显像 PVDF polyyunylidene difluoride 聚偏氟乙烯 R，r-PCR reverse-transcription polymerase逆转录聚合酶链式反 chain reaction 应 印m rotate per minute 转|分 sbRNA short hairpin RNA 短发卡RNA SDS sodium dodecyl sulphate 十二烷基硫酸钠 SDS．PAGE SDS-polyacrylamide gel SDS聚丙烯酰氨凝胶 electrophoresis 电泳 TEMED N，N，N， N，N，N，N．四甲基 N-tetramethylethylenediamine 乙二胺 TGF．B transforming growth factor-B 转化生长因子B 瞄S tris(hydroxymethyl) 三羟甲基氨基甲烷 aminomethane TSCC tongue squamous cell carcinoma 舌鳞癌 VEGF vascular endothelial growth血管内皮生长因子 factor 2 万方数据 解放军医学院博士学位论文FoxMl 解放军医学院博士学位论文 FoxMl／e．Met正反馈环路促进舌鳞癌细胞上皮间充质转化及侵袭迁 移的机制研究 中文摘要 口腔肿瘤是人类最常见的肿瘤之一，舌鳞癌是最常见的口腔癌病理类型。舌鳞癌 早期容易发生淋巴结转移，而侵袭迁移是造成舌鳞癌不良预后的主要原因之一。越来 越多的研究证明上皮间充质转化(EMT)在肿瘤侵袭迁移过程中发挥重要作用。FoxMl 是一个与细胞增殖相关的转录因子，它的很多功能主要是通过转录调节其下游的靶基 因决定的。FoxMl在很多肿瘤组织中高表达，且其高表达常常提示肿瘤患者预后不 佳。既往