GDNFRET信号调控Hedgehog信号通路及其肿瘤生物学行为中的意义研究.docx

鲤丛墅墅!焦曼调控旦曼堕g宝塾Qg焦曼通整区甚查胜擅生堑堂红羞圭鲍意幺珏窒 鲤丛墅墅!焦曼调控旦曼堕g宝塾Qg焦曼通整区甚查胜擅 生堑堂红羞圭鲍意幺珏窒 ⑧ 论文作者签名： 指导教师签名： 论文评阅人1： 评阅人2： 评阅人3： 评阅人4． 评阅人5： 答辩委员会主席： 委员1： 委员2： 委员3： 委员4． 委员5： 万方数据 浙江大学研究生学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。 浙江大学研究生学位论文独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。 除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成 果，也不包含为获得逝塑太堂或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一 同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。 学雠文作者张I罗球鳓期：蝴立月7日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解逝婆太堂有权保留并向国家有关部门或机构送交本 论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权浙江太堂可以将学位论文的 全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段 保存、汇编学位论文。 (必威体育官网网址的学位论文在解密后适用本授权书) 学位论文作者签名： ＼罗酞 导师签名： 签字日期： 如侈年 一2月7日 签字日期：Ⅵ彦年 胡 7日 | 万方数据 浙江大学硕士学位论文 浙江大学硕士学位论文 致谢 致 谢 两年半的研究生生活即将过去，回首往昔，那些帮助过我完成课题的人们历 历在目，正是由于你们的帮助和支持，我才能克服一个个困难，本文才能顺利完 成，在这里请接受我诚挚的谢意! 首先，我要特别感谢我的导师吴希美教授，感谢他在科研上对我不厌其烦地 悉心教导和不断鞭策，感谢他为我提供了这样一个充满浓厚科研氛围的环境，让 我从一个零基础的本科生迅速成长成为可以独立完成课题的硕士研究生。在整个 课题完成的过程中，吴老师对我进行了耐心的指导和帮助，引导我不断开阔思路， 为我答疑解惑，鼓励我大胆创新，使我在这一段宝贵的时光中，不仅增长了知识、 开阔了视野、锻炼了心态，而且培养了良好的实验习惯和科研精神。这些技能将 让我受益终生。 接着，衷心感谢中国解放军一一七医院的戚晓平主任以及浙江大学张成宁教 授在课题相关背景知识上给予的帮助-9指点!感谢浙江大学附属第二医院的姚红 伊师姐教我实验基本操作，将我带入科研的殿堂，让我打下了坚实的基础!感谢 阮红峰师兄在学习和生活上给-9的巨大帮助和支持!感谢王继荣师姐在实验技术 和课题分析方面提供的帮助!感谢本实验室的唐超、潘熠斌、刘乃华、吉星、胡 新华、许成云、龚莹、吴小凯、石伟、梅柳、陈利华、何艳、陈玲琳、范雪迎、 瞿林杰、甄茹等在我实验和论文过程中给予的多方面的帮助和无私指导!感谢浙 江大学分子细胞生物学团队(PMCB)各实验室老师同学在学术和仪器试剂上对我 的帮助!感谢浙江大学公共技术平台提供的实验仪器的和技术服务!我还要感谢 培养我长大含辛茹苦的父母，感谢你们对我的支持和理解，有了你们，我才能走 得更远，飞得更高! 最后，感谢评阅本篇硕士论文和出席论文答辩的各位专家、教授，感谢你们 能在百忙之中给予指导。 罗 环 2014年12月于浙大紫金港 万方数据 浙江大学硕士学位论文 浙江大学硕士学位论文 中文摘要 GDNF／RET信号调控Hedgehog信号通路及其在肿瘤生物学 行为中的意义研究 浙江大学医学院 药理学 硕士研究生 罗 环 导 师 吴希美教授 中文摘要 大量研究表明，原癌基因RET和Hedgehog(Hh)信号通路的异常表达均与 发育和肿瘤的发生发展密切相关，但RET是否调控Hh通路却鲜有报道。基于以 上疑问，本研究首先借助Hh靶基因Gli-1的双荧光素酶报告基因系统，发现内源 表达RET的成神经母细胞瘤细胞系SH．SYSY经RET蛋白激活物胶质细胞源性神 经营养因子(Glial cell．1ine derived neurotrophic factor,GDNF)处理，Gli．1报告基 因的活性增加。进一步在293T细胞和SH—sY5Y细胞中共转RET过表达质粒和 Gli一1报告基因质粒，发现在这两种细胞系中过表达RET均可增加Gli．1报告基因 活性，证实RET参与调控Hh通路．过表达RET下游分子Akt的激活形式可增加 Gli．1报告基因活性。而使用MK-2206抑制Akt活性或慢病毒敲降Akt后，激活 RET并不能上调Gli-1的mRNA水平，证实RET通过Akt调控Hh通路。进一步， 为研究Hh通路中的哪个分子是RET调控的靶点，我们利用Cyclopamine特异性 抑制该通路的关键分子Smoothened