MiR132参与调控动脉硬化过程的初步研究.docx

硕士学位论文 MiR．132参与调控动脉粥样硬化过程中的 初步研究 硕士研究生：黄显莹 指导老师：刘正军教授 摘 要 动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)是一种严重危害人类健康的常见病， 是冠心病、脑血管病和血栓栓塞性疾病等缺血性心脑血管病的主要病理基础。 到目前为止，AS的发病机制尚未完全清楚，存在多种学说，涉及多种危险因素， 以至临床缺乏有效的防治药物。大量的基础和临床研究表明，致AS的危险因 素包括高脂血症、高血压、高血糖(糖尿病)、高纤维蛋白原血症、高半胱氨 酸血症、高尿酸血症、肥胖、肾素一血管紧张素一醛固酮系统(RAAS)活化、 吸烟、凝血功能亢进(组织因子、凝血酶)、微量元素代谢失调(如铁、铜、 锌、硒、铬、锰、锗等)、自体生物活性物质(如5一羟色胺、NO、内皮素一 1等)代谢紊乱、慢性应激引起皮质醇类、几茶酚胺类等应激激素的分泌使血 流量和血压改变，导致内皮损伤和血小板黏附。在这些学说中，AS发病的炎症 机制是相对新的一种学说，引起科学家的极大关注，并进行了大量的研究工作， 取得了丰硕的成果，形成了普遍的共识。1999年，ROSS教授强调AS是一种 慢性炎症性疾病。按照炎症反应的表现，AS的炎症反应可分为急性渗出性炎症 和慢性增生性炎症。急性渗出性炎症主要见于AS早期，如单核巨噬细胞浸润； 而慢性增生性炎症见于AS的进展期，主要表现为VSMCs大量增殖及细胞外基 质过度合成。 脂质代谢异常，在AS发生发展中是损伤内皮的主要因素。氧化低密度脂蛋 白(OX—LDL)对单核细胞具有趋化性，能上调内皮细胞产生单核细胞刺激因子 万方数据  中文摘要 (MCSF)幂IJ单核细胞趋化因子(MCP．1)。使单核巨噬细胞募集增殖，并使巨噬细 胞分化成泡沫细胞，参与AS的形成和发展。在对炎症刺激的反应过程中，内皮 细胞表达受炎症介质和过氧化脂质调节的蛋白酶，蛋白酶的激活可能切断内皮 细胞与其血管内膜基质间的联系，促使内皮细胞从血管内膜剥离，引起血管内 膜损伤。炎症可诱导低密度脂蛋白胆固醇(LDL．c)的氧化修饰，而修饰的LDL．C 可进一步导致动脉内膜的炎症过程，可见炎症可加速脂蛋白促AS形成作用。 AS的发生是由于血管内皮细胞和平滑肌细胞受各种危险因子，血管局部产生 的一种过度的慢性炎性增生反应。内皮细胞、巨噬细胞和平滑肌细胞始终是构 成AS的三要素。多种MicroRNA在上述细胞上特异性表达，通过调节内皮细 胞、巨噬细胞及平滑肌细胞的多种功能参与As发病过程，目前大部分的文献来 自血管疾病及血管生成的研究，主要集中于内皮细胞的完整性及参与血管形成 的能力，血管平滑肌细胞的增殖及巨噬细胞对致As脂质的炎症应答。而miRNA 对单核／巨噬细胞、内皮细胞及血管平滑肌细胞的功能均有调节作用。因此， miRNA可通过调节这3种细胞功能而影响动脉粥样硬化的发生发展并成为抗 动脉粥样硬化的靶点。 动脉粥样硬化(AS)是由多种原因造成胆固醇等脂质沉积于动脉内膜下，并 发平滑肌细胞(SMC)聚积，继而纤维组织增生和钙质沉着、斑块内出血和血栓 形成，最终致动脉管壁变硬、管腔狭窄甚至闭塞而引发临床事件。AS是一个 慢性复杂的病变过程，血脂等异常时，血管内皮细胞(VEC)损伤，血小板聚集 并释放血小板因子，血液中单核细胞进入内皮下被激活成巨噬细胞，并吞噬氧 化修饰的低密度脂蛋白(OX．LDL)，血管中层的SMC向损伤的内膜迁移、浸润、 增殖，使血管内膜增厚、纤维化、粥样斑块形成及管腔狭窄、闭塞¨巧1。最终 引发心、脑血管事件。因此，VEC、SMC、巨噬细胞及某些细胞因子等都参与 了AS的发生与发展。 Micro RNA影响血管内皮细胞的功能，参与血管平滑肌细胞的迁移和增殖 在动脉粥样硬化的形成过程中，血管壁细胞，如EC和VSMC的变化发挥了 II 万方数据  硕士学位论文 重要作用。内皮细胞功能障碍增加了内皮层的通透性和相应细胞因子和黏附分 子的表达，减少了内皮层的再生。VSMC的迁移及增殖则促进了粥样斑块的形 成，加速了冠状动脉粥样硬化的进程。而内皮细胞和平滑肌的功能障碍及迁移、 增殖均可受Micro RNA的调控。miR．1et．7c通过抑制Bcl．xl的表达，促进了 内皮细胞的凋亡，并参与促进动脉粥样硬化，而miR．126通过加强内皮细胞的 修复，发挥了抗动脉粥样硬化的作用。miR．126也可能通过直接抑制血管内皮 生长因子(VEGF)通路的负性调节因子，如Sprouty相关蛋白SPREDl和磷 酸肌醇激酶3的II型调节亚基(PIK3R2／p85．b)来调节内皮细胞对VEGF的 应答。mi R．22l和mi R．222通过抑制其靶点p27和p57，促进了VSMC的 增殖。miR．143和miR．145在平滑肌细胞中