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mir153和mir520b对肿细胞自噬的调控机制研究
摘要miR-153和miR-520b对肿瘤细胞自噬的调控机制研究
摘要
miR-153和miR-520b对肿瘤细胞自噬的调控机制研究 摘要
自噬,又称II型程序性细胞死亡,是细胞正常的生命活动之一,细 胞在正常状态下会保持较低的自噬水平,以此来作为一种细胞生存生长的 保护机制,但是当细胞受到来自内外某种特定刺激时,将发生异常自噬, microRNA作为一种非编码RNA,通过特异性结合靶基因的3’.UTR区域, 抑制靶基因mRNA水平和翻译。然而,至今仍有大量自噬相关microRNA
有待发掘。本课题发现了两种microRNA可以通过特异调控靶基因表达, 影响肿瘤细胞自噬水平,进而影响细胞增殖、迁移、侵袭等生物学表型。 采用筛选加验证的方法,前期工作首先是通过实验筛选出两种理想的 细胞模型,即确定研究的肿瘤细胞系,接着探索这两种细胞模型发生自噬 的最佳诱导条件:筛选环节是将所有未发表过的microRNA进行筛选,在
初步筛选出研究目标后,工作重点就是对筛选结果进行全方面多层面的验 证。此外,还通过生物信息学的方法,对目标microRNA的靶基因进行预 测,并采用实时定量PCR以及Western blot方法对预测结果进行验证,从 而完善了该调控机制。
本研究首次发现,miR.1 53和miR-520b均可显著促进食管癌 KYSE450细胞和乳腺癌MCF.7细胞自噬;其中miR-520b是与癌基因 CDCA7靶向结合使其沉默,且生物信息学提示,CDCA7与自噬相关基因 CASP2互为ceRNA,CASP2可以通过竞争性结合miR-520b来调节
万方数据
北京化工大学硕士学位论文CDCA7的表达。文献报道,自噬相关基因CASP2的消耗会引起细胞自噬
北京化工大学硕士学位论文
CDCA7的表达。文献报道,自噬相关基因CASP2的消耗会引起细胞自噬 水平升高;故高表达miR.520b可以促进细胞自噬。与此同时,体外细胞 功能实验结果表明,miR.153和miR-520b可以显著抑制肿瘤细胞的增殖、 迁移和侵袭。总而言之,这些结果表明miR.153和miR.520b是一种肿瘤 生物治疗的潜在靶分子。
关键词:自噬,miR-153,miR-520b,食管鳞癌,乳腺癌
万方数据
ABSTRACTREGULAToRY
ABSTRACT
REGULAToRY MECHANISM oF TUMoR CELL AUTOPHAGY BY MIl0153 AND MIR.520B
ABSTRACT
Autophagy,also called type-II programmed cell death,is one of the normal life activities of cells.In normal state,cells often maintain a low level of autophagy as a protective mechanism for the survival and growth,but,
when the cells are subjected by certain stimulus inside or outside,abnormal autophagy would happen.As a non-coding RNA,microRNA can inhibit target gene mRNA level and translation.However,there are still a large number of autophagy related microRNAs to be excavated.In this study,we found two kinds of microRNAs which can regulate their target gene expression specifically,thus affecting the level of autophagy,and then affecting the cell biological phenotypes,including cell proliferation,migration, invasion,etc..
For the preliminary work,we firstly selected two ideal cell models by screening and verification methods.After determining the tumor cell lines,we explorated the optimum induced condition of autophagy in the two
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