mir373在食管鳞状细胞癌中的功能及用机制研究.docx

CONTENTSchinese CONTENTS chinese abStract l English abstract ‘‘” Symb。I discripti。n 12 Pan 1 miR一373 eXpression level in esophageal squamous cell carcinoma锄d its clinical significance Introduction ～13 Materials a11d methods 16 Results 23 Discussion ·29 conclusion 33 Ref宅rences ·34 Part 2 Efrects of miR一373 on the biological behaviors of ESCC cell lines In仃oduction 42 Materials and methods 一q3 Results 48 Discussion ·55 Conclusion ，8 Ref．er锄ces 59 Part 3 Preliminary investigation of the mechanism of miR一373 in esophageal squamous cell carcinoma Introduction O， Materials and methods 67 Results 79 Discussion -84 Conclusion ·88 Reflerences 一89 lnnovati。ns and limitations 94 Acknowledgement ‘ Published paper ． ． ．．． ．． ． ． ． · · ·96 English paper I English paper 11 ·126 万方数据 山东大学博士学位论文miR-373在食管鳞状细胞癌中的功能及作用机制研究 山东大学博士学位论文 miR-373在食管鳞状细胞癌中的功能及作用机制研究 博士研究生：刘文稚 专 业：肿瘤学 导 师：李宝生教授 中文摘要 食管癌(esophageal carcinoma，EC)是全球第八大恶性肿瘤，死亡率高，5 年生存率不到15％。在我国，食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma， ESCC)是最常见的病理类型，具有易复发和转移等特点。对于早期病人，手术 切除是主要的治疗手段；中晚期病人则以放化疗为主，但治疗效果并不理想。然 而，因为缺乏典型的临床症状和有效的早期诊断技术，食管癌发现时往往已是中 晚期，因此，寻找一种早期发现食管癌的方法显得尤为重要。从分子水平了解食 管癌的发生发展机制，探索出有效的诊断及治疗靶点，对于食管癌的早期诊断及 治疗具有深远意义。 微小RNAs(miRNAs)是一类长约19．22个核苷酸的非编码RNA，通过连 接靶基因的3-UTR区域来发挥多重作用。目前已经在206种生物中发现了 miRNAs，从微生物到动物均有涉及。miRBase官方网站上公布了2000多个 miRNAs，预计超过60％的人类蛋白编码基因都会受到miRNAs的调控。miRNAs 在调节细胞分化、增殖、侵袭、血管生成及细胞凋亡方面均发挥了重要作用。 miRNAs的表达异常与恶性肿瘤密切相关，多种miRNAs参与食管癌的发生及发 展过程，其中miR．183、miR一142、miR一483高表达，发挥了癌基因的作用，而 miR一375、miR一98、miR一214、miR一143在食管癌中低表达，发挥了抑癌基因的作 用。 近年来大量研究表明，miR．373在多种恶性肿瘤中均发挥了重要作用。 Voorhoeve等人于2006年第一次提出miR一373，作为一个新的癌基因，它在睾丸 精原细胞瘤中通过阻断p53通路来参与肿瘤的进展。它也可以通过作用于靶基因 PPP6C调节细胞周期，来促进肝癌细胞的生长。而在乳腺癌中，通过监测循环血 万方数据 山东大学博士学位论文中miR．373的表达含量可以了解是否发生淋巴结转移。另外，miR-373通过作用 山东大学博士学位论文 中miR．373的表达含量可以了解是否发生淋巴结转移。另外，miR-373通过作用 于Rab22a来抑制人卵巢癌的侵袭和转移，从而发挥了抑癌基因的作用。基因芯 片技术分析，miR-373在ESCC组织中表达上调，比正常组织至少高1．5倍。然 而，miR．373在ESCC中的作用机制目前尚不清楚，尤其在血浆中的表达水平及 意义目前尚无研究。 基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase，MMPs)是一系列能够降解细胞 外基质的蛋白水解酶，通过破坏瘤细胞周围的组织学屏障，促进恶性肿瘤细胞