Hic5在肝细胞癌组织中的表及意义.docx

西南医科大学硕士学位论文Hic-5在肝细胞癌组织中的表达及意义 西南医科大学硕士学位论文 Hic-5在肝细胞癌组织中的表达及意义 摘 要 目的：肝细胞癌(hepatocellular carcinoma，HCC)是全世界第六大常见恶 性肿瘤，HCC具有侵袭性强、术后易复发及远处转移等特点。研究HCC 发生、进展及侵袭的相关机制对降低其发病率和死亡率有重要意义。本实 验通过检测HCC及正常肝组织标本中过氧化氢诱导的克隆．5(hydrogen peroxide—inducible clone一5，Hic一5)及0【-平滑肌肌动蛋白(0【．smooth muscle actin，a．SMA)的表达水平，探讨Hic．5及a．SMA与HCC发生、进展的关 系及相关机制，同时分析Hic．5及a．SMA的表达与HCC各项临床病理特 征之间的相关性。 方法：在获得医院伦理委员会批准及所有患者知情同意的情况下，收 集手术切除的HCC组织及相应癌旁肝组织标本共67例，包括高分化HCC 及相应癌旁组各22例，中分化HCC及相应癌旁组各24例，低分化HCC 及相应癌旁组各21例；同时收集15例肝血管瘤患者行手术切除时所获取 的血管瘤周围正常肝组织作为对照。采用免疫组织化学技术(immunohisto． chemistry，IHC)以及免疫印记技术(western blot，wB)检测Hic．5及a．SMA在 对照组肝组织、不同分化程度的HCC组织及相应癌旁肝组织中的表达情 况。IHC结果使用Image pro plus 7．0软件采集Hic-5与a．SMA的光密度值。 WB结果使用凝胶摄像分析系统进行扫描处理，并使用Quantity One 5．4 软件测定各条带的灰度值。同时收集各患者的临床资料，包括住院号、性 别、年龄、术前影像学检查、血常规检查、凝血功能检查、肝肾功能检查、 肝炎病毒标志物、血清甲胎蛋白浓度及术后肿瘤病理资料如肿瘤数目、大 万方数据 西南医科大学硕士学位论文小、分化程度、血管侵犯、区域淋巴结转移、TNM分期及肝硬化背景等。 西南医科大学硕士学位论文 小、分化程度、血管侵犯、区域淋巴结转移、TNM分期及肝硬化背景等。 实验数据使用SPSS 17．0统计软件进行处理、分析。计量资料采用“均数 士标准差(_士s)”的形式进行描述。使用的统计学方法包括t检验、单因素 方差分析、LSD．t检验以及Kruskal．Wallis H秩和检验。变量之间相关性 采用直线相关系数或Spearman秩相关进行分析。当P值O．05时，认为差 异具有统计学意义。 结果：1．IHC结果显示：在对照组肝组织中，Hic．5不表达或仅较少 地表达于肝小叶的汇管区周围。在HCC组织中，Hic．5主要表达于肿瘤间 质(HCC周围的肝血窦、纤维间隔或包膜)，且Hic．5表达强度(光密度 值)随着HCC分化程度的降低而逐渐增强。Hic．5在HCC组织中的表达 水平高于相应癌旁肝组织及对照组肝组织。不同分化程度HCC组之间或 相应癌旁组之间，Hic一5表达强度进行两两比较，差异具有统计学意义。 a—SMA在对照组肝组织中仅少量表达于肝小叶汇管区周围。在HCC组织 中，a—SMA主要表达于肿瘤间质，表达部位与Hic．5基本一致，主要表达 于癌周围的肝血窦、纤维间隔或包膜。在高分化、中分化及低分化HCC 组织中，a．SMA的表达强度依次增强。在HCC组织中a．SMA的表达水平 高于相应癌旁肝组织及对照组肝组织。不同分化程度HCC组之间或相应 癌旁组之间，a—SMA表达强度进行两两比较，差异具有统计学意义。Hic．5 及a-SMA在伴有肝硬化背景的癌旁肝组织中的表达水平高于无肝硬化背 景癌旁肝组织及对照组肝组织。2．WB结果显示：Hic．5蛋白与a．SMA蛋 白在HCC组织中的表达水平(灰度值)均明显高于相应癌旁肝组织及对 照组肝组织。其中，随着HCC分化强度降低，Hic一5蛋白与a—SMA蛋白 万方数据 西南医科大学硕士学位论文的表达水平亦逐渐升高。不同分化程度HCC组之间或相应癌旁组之间， 西南医科大学硕士学位论文 的表达水平亦逐渐升高。不同分化程度HCC组之间或相应癌旁组之间， Hic一5蛋白或a．SMA蛋白表达强度进行两两比较，差异具有统计学意义。 同时，在HCC组织及相应癌旁肝组织中Hic一5蛋白与a-SMA蛋白的表达 具有相关性。3．对HCC患者临床及病理特征分析表明Hic一5蛋白及a-SMA 蛋白的表达水平与患者的肿瘤数目、分化程度、血管侵犯、TNM分期及 肝硬化背景有关；与患者性别、年龄、区域淋巴结转移、肝功能分级、肝 炎病毒标志物及血清甲胎蛋白浓度无关。 结论：1．与对照组肝组织及相应癌旁肝组织相比，Hic一5、a．SMA高 表达于HCC组织中，提示Hic．5