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COXⅦa在中老年男子部雄激素缺乏综合征中的作用及机理研究
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目 录
中文摘要 1
英文摘要 8
英文缩写 17
研究论文COXVIIa在大鼠中老年部分雄激素缺乏综合征中的作用及机理 研究
引言 19
第一部分大鼠睾丸组织COXVIIa及类固醇合成酶和急性调节蛋白表达的 加龄变化
前言刖舌 2222
材料与方法 22
结果 32
附图 36
附表 41
讨论 46
小结 49
参考文献 49
第二部分COXVIIa对Leydig细胞睾酮合成能力影响的体外研究
前言月U舌 5252
材料与方法 53
结果 64
附图 69
附表 79
讨论 86
小结 88
参考文献 89
第三部分COXVIIa对类固醇合成酶的影响及RNA干扰的体内研究 前言日U吾 .. .9292
材料与方法 93
结果 97
附图 102
附图 102
附表 105
讨论 114
_、结 116
参考文献 117
第四部分COXVIIa影响Leydig细胞睾酮合成的机理研究
前言日U吾 121
材料与方法 121
结果 ..: 124
附图 130
附表 138
讨论 151
小结 153
参考文献 153
综述中老年男子部分雄激素缺乏综合征 156
致谢 184
个人简历 185
中文摘要COXVIIa
中文摘要
COXVIIa在大鼠中老年部分雄激素缺乏综合征中
的作用及机理研究
摘 要
中老年男性随着年龄的增长雄激素水平逐渐下降,并出现倦怠、乏力、 抑郁、失眠、情绪波动、易怒、性欲减退、勃起功能障碍、体重减轻和骨 质疏松等一系列临床症状,这一现象被称为中老年男子部分雄激素缺乏综 合征(partial androgen deficiency ofthe aging male,PADAM)。PADAM和许 多疾病有关,如心血管疾病、糖尿病等,老年人群因衰老引发的各种疾病 发病率逐年增高,严重影响中老年男性的身体健康和生活质量。关注老年 疾病,提高老年人生活质量,延长寿命,成为全球关注的重要医学课题。 COXVIIa(cytochrome c oxidase subunit VIIa)是线粒体呼吸链第4个复合 体的核编码亚基,参与该复合体的构成,在线粒体氧化呼吸链的电子传递 中发挥重要作用。研究表明,COXVIIa在老年人睾丸组织显著上调,推测 其可能与老年雄激素合成功能减退及老年男性雄激素部分缺乏综合征有 关,但其具体机制仍不清楚,国内外报道极少见。本研究以D.半乳糖所致 亚急性衰老大鼠为PADAM模型,利用基因转染和RNA干扰等现代分子生 物学技术,从体内和体外两方面深入研究了COXVIIa在PADAM中的作用
及机制,为研究PADAM的机理和基因靶向治疗提供理论基础。 第一部分大鼠睾丸COXVIIa及类固醇合成酶和急性调节蛋白的
加龄变化
目的:探讨大鼠出生后不同发育阶段睾丸组织COXVIIa及睾酮合成 酶和急性调节蛋白的表达变化并确定其与睾酮浓度的相关性。
方法: l实验动物:选用出生后1周龄、3周龄、5周龄、3月龄和24月龄
清洁级雄性SD大鼠,每年龄组6只(1周龄组为12只); 2睾酮测定:化学发光方法测定血清总睾酮水平,批内和批间变异系
数分别为2.2%.2.4%和3.4%.4.7%;
3 RT-PCR方法检测各年龄组睾丸组织COXVIIa、3 B.HSD.、1 7 J3.HSD、
中文摘要P450scc
中文摘要
P450scc和StARmRNA变化;
4 western blotting、免疫组化法检测各年龄组睾丸组织COXVIIa、 3B—HSD、1713.HSD、P450sec和StAR蛋白表达变化和定位。
结果: 1大鼠血清睾酮水平:3月龄组、24月龄组、5周龄组、3周龄组和1
周龄组依次降低, 3月龄组和24月龄组与各组之间差异有统计学意义
(pO.05),其余各组差异无统计学意义(砂O.05);
2 mRNA变化:COXVIIa mRNA水平24月龄组最高、3月龄组最低, 与各组之间差异均有统计学意义(胯O.05);3p.HSD、1 713.HSD和P450scc mRNA水平均为3月龄组和5周龄组高于其余各组,差异均有统计学意 义白o.05);StARmRNA水平3月龄组最高,5周龄组和24月龄组次之,
1周龄组和3周龄组最低,差异有统计学意义∞o.05)。
3蛋白表达和定位:COXVIIa蛋白表达于间质细胞胞质、胞核及精原 细胞胞核,24月龄最高,3月龄组最低;3p.HSD蛋白表达于间质细胞胞 质,1713.HSD蛋白表达于间质细胞胞质及精原细胞胞核,P450scc蛋白表
达于间质细胞胞质、胞膜及精子细胞胞质,StAR蛋白表达于间质细胞胞
质和胞膜以及精原细胞胞质;3D.HSD、1713.HSD、P450scc和StAR蛋白
表达均为3月龄组和5
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