核酸类药物分析.pptxVIP

核酸类药物分析;第一节 概 述; 核酸、核苷酸类药物是指具有药用价值的核酸、核苷酸、核苷和碱基以及它们的类似物或衍生物。 按照化学结构和组成可分成四类： ①核酸碱基及其衍生物，如硫鸟嘌呤、氟尿嘧啶、阿昔洛韦等； ②核苷及其衍生物，如肌苷、利巴韦林、阿糖胞苷； ③核苷酸及其衍生物，如三磷酸腺苷二钠、胞磷胆碱钠、环磷腺苷； ④多核苷酸，如寡聚核苷酸、核糖核酸Ⅰ、核糖核酸Ⅱ、抗肿瘤免疫核糖核酸等。 ;阿昔洛韦 其化学名为9-(2-羟乙氧甲基）鸟嘌呤。化学结构式： 药理作用：　　抗病毒药。体外对单纯性疱疹病毒、水痘带状疱疹病毒、巨细胞病毒等具抑制作用。　　①干扰病毒DNA多聚酶，抑制病毒的复制；　　②在DNA多聚酶作用下，与增长的DNA链结合，引起DNA链的延伸中断。本品对病毒有特殊的亲和力，但对哺乳动物宿主细胞毒性低。;二、理化性质 １溶解性 多核苷酸、核苷酸类药物均为磷酸盐，除环磷腺苷外，在水中均易溶。 ? ? 核苷类药物在乙醇、乙醚等有机溶剂中的溶解度均较差，部分核苷类 药物在水中易溶（如利巴韦林），部分核苷类药物在水中微溶（如肌 苷）。核酸碱基类药物大多能溶于酸性或碱性溶剂，如氟胞嘧啶，在稀 盐酸和稀氢氧化钠溶液中易溶。 ;２紫外吸收　 核苷酸的磷酸酯和戊糖均没有明显的紫外吸收，而嘌呤碱和嘧啶碱等碱基 具有共轭双键结构，在紫外光区有明显吸收。因此多核苷酸、核苷酸和核苷 与构成它们的碱基具有相似的紫外吸收光谱，最大吸收波长一般在２６０ｎ ｍ附近。 ３酸碱性　 核苷酸分子结构中的磷酸和戊糖均呈酸性，其中磷酸酸性较强，碱基为含 氮化合物呈弱碱性，故多核苷酸、核苷酸类和核苷类药物均为两性化合物。 核酸碱基类药物只有碱基，呈碱性。 ４水解性　 核苷酸类药物分子结构中磷酸与戊糖间的酯键和戊糖与碱基间的糖苷键都 会发生水解，同样条件下酯键先水解。 ;第二节　分析方法;一、鉴别 （一）化学鉴别 １戊糖的鉴别 （１）地衣酚反应　 核糖核酸、核糖核苷酸或核糖核苷与酸共热时，水解形成的戊糖基脱水变为糠醛，再与３，５二 羟基甲苯（地衣酚） 反应，缩合生成绿色化合物。用三价铁盐或铜盐作催化剂，可增加呈色的灵敏度。地衣酚反应特异性较差，凡戊糖均有此反应。? ? ;;２磷酸盐的鉴别 　 核酸、核苷酸类药物在酸性条件下加热水解产生的磷酸与过量 的钼酸铵［（ＮＨ４）３ＭｏＯ４］反应，生成磷钼酸铵放冷析 出黄色沉淀。此反应为磷酸盐的一般鉴别试验。 ? ３嘌呤碱的鉴别 　含有嘌呤碱的核酸类药物在水溶液中可与氨制硝酸银试液反应， 生成白色的银盐，遇光变为红棕色。此反应为嘌呤碱的特征鉴别 反应。 ;４氟元素的鉴别　 氟尿嘧啶、氟胞嘧啶等含氟有机化合物遇强氧化剂如三氧化铬的饱和硫酸溶液时，在微热条件下会产生氟化氢，腐蚀玻璃表面造成硫酸溶液不能均匀涂于管壁，产生类似油垢的现象。 ? ５硫元素的鉴别　 硫鸟嘌呤分子结构中的Ｓ元素在甲醇钠溶液中缓缓加热后会转化成硫化氢气体，使醋酸铅试纸显黑色或灰色。巯嘌呤分子结构中的巯基还可与醋酸铅试液反应生成黄色沉淀。;（二）光谱鉴别 １. 紫外吸收光谱法　 碱基结构中的嘌呤环和嘧啶环在紫外光区具有特征吸收， 可用于鉴别。 如吸收系数、最大吸收波长及其固定浓度下的吸光度、最 小吸收波长等。 ;２红外吸收光谱法　 红外吸收光谱法主要分为标准图谱对照法或对照品对照法，《中国药典》主要采用标准图谱对照法。 红外光谱具有叠加性，共存组分会使待测组分的红外光谱图发生变化，因此红外吸收光谱法一般用于纯度较高的原料药的鉴别。 影响红外吸收光谱的因素较多: 如试样的制备方法、水分、晶型等，因此鉴别时应严格按规定绘制图谱。对于可能发生转晶的药物，需按规定重结晶后再绘制图谱，如更昔洛韦的鉴别，本品的红外光吸收图谱应与对照品的图谱一致，如不一致，取本品和对照品适量，分别加水制成饱和溶液，滤过，取滤液在１０℃以下放置过夜，待析出结晶，滤过，滤渣经１０５℃干燥后，再次测定。 ;二、检查 核糖核酸、脱氧核苷酸钠多采用提取法制备，寡聚核苷酸多采用化学合成法，核酸碱基、核苷、核苷酸类药物大多采用酶解法、发酵法和半合成法制备。 核酸类药物的杂质检查包括一般杂质检查、特殊杂质检查和安全性检查。 一般杂质检查主要有氯化物、硫酸盐、重金属、砷盐、铵盐、铁盐、干燥失重、炽灼残渣等，安全性检查主要有细菌内毒素、异常毒性、无菌检查等，重点介绍从原料中带入或在生产过程中引