2016年GMP质量控制实验室管理.pptVIP

* （5）——方法适用性试验中的修订！ 上市抽验样品的最少检验数量（2015版） 供试品 液体制剂 固体制剂 血液制品 V＜50ml V≥50ml 医疗器具 供试品最少检验数量（瓶或支） 10 10 6 2 10 注：1.若供试品每个容器内的装量不够接种两种培养基，那么表中的最少检验数量加倍。 2.抗生素粉针剂（≥5克）及抗生素原料药（≥5克）的最少检验数量为6瓶（或支）。 桶装固体原料的最少检验数量为4个包装。 无菌及微生物检验 无菌检验所用容器具的灭菌一般需 干热灭菌法 温度(℃) 时间(小时) 灭菌效果 80-100 1 杀死细菌繁殖体 160-170 2 杀死所有微生物 180 2 除去热源 250 30min 除去热源 无菌及微生物检验 菌种来源 菌种编号 2015版 CMCC —— 中国医学菌种保藏中心 CMCC（F）真菌 CMCC（B）细菌 协调案 ATCC 美国标准菌种收藏中心 NCIMB 英国食品工业与海洋菌种保藏中心 NBRC 日本技术评价研究所生物资源中心 CIP 法国巴斯德研究所菌种保藏中心 应来自认可的国内或国外菌种保藏机构的标准菌株， 或使用与标准菌株所有相关特性等效的商业派生菌株。 无菌及微生物检验 常用菌种的保藏—2015指导原则 试验用菌株的传代次数不得超过5代（从菌种保藏中心获得的冷冻干燥菌种为第0代）。 采用适宜的菌种保藏技术进行保存，以保证试验菌株的生物学特性。 冷冻保藏：在低温下保藏，是有效的长期储藏方法。 冻干法保藏：是一种长期保藏菌种的方法。 冷藏：在2～8℃保藏，是短期储藏方法。 根据微生物菌种的生理、生化特性，尽量降低微生物细胞的代谢强度，处于休眠状态，以减低菌种的变异率。 低温、干燥、缺氧、缺乏营养等环境条件都可以抑制微生物的代谢和 生长繁殖，因此低温、干燥和真空是菌种保藏的重要手段。 无菌及微生物检验 菌种的保藏 方法 主要原理 适用的微生物 保藏时间 特点 液氮超低温保藏法 超低温 广泛 数十年 复杂、需要专门设备，有效 冷冻真空干燥保藏法 干燥、缺氧、低温 广泛 5～10年以上 复杂、需要专门设备和方法，有效 干燥（沙土、牛奶）保藏法 干燥、无营养 产孢微生物 1～10年 较简便，需制备沙土管，有效 液体石蜡保藏法 低温、缺氧 广泛 1年以上 简便 琼脂斜面低温保藏法 低温 4℃ 广泛 短时间 简便 液体冷冻保藏法 液体培养基 低温 广泛 半年以上 简便 一定比例甘油 低温、缺氧 广泛 数十年以上 简便 瓷珠冷冻保藏法 低温 广泛 1年以上 简便 无菌及微生物检验 琼脂斜面低温保藏法 菌种 培养基 保存温度 传接时间 金黄色葡萄球菌 ?营养琼脂斜面培养基 ? ? ? 4℃ ? ? 约1个月 ? 大肠埃希菌 乙型副伤寒沙门菌 枯草芽孢杆菌 铜绿假单孢杆菌 ?室温 生孢梭菌 疱肉培养基 ? 4℃ ? 约3个月 白色念珠菌 改良马丁琼脂斜面培养基 黑曲霉 无菌及微生物检验 菌种的传代和使用 冻干菌种（0代） ↓ 增菌培养 苏醒（1代) ↓ 增菌培养 复壮（2代） ↓ 斜面培养基 划线传代（3代） ↓ 斜面培养基 划线传代（4代） ↓ 斜面培养基