人神经母细胞瘤系sk-n-sh侧群细胞基因表达的研化究儿科学专业毕业论文.pdf.docx

人 神经 人 神经 母细 胞瘤 系 S K 一 S H 侧 群 细 胞 基 因表达 的研 究 硕 士 论 文 中 文摘 要 人 神 经 母 细 胞 瘤 系 S K 一N 一S H 侧 群 细 胞 基 因表 达 的研 究 中文 摘 要 研 究 背 景 : 神 经 母 细 胞 瘤 (n eur ob las tom a ，N B) 、是 小 儿 最 常 见 的 恶 性 实 体 瘤 之 一 ， 占 小 儿 恶 性 肿 瘤 的 10% 。 约 65 % 的 患 儿 在 发 病 时 就 有 肿 瘤 转 移 ， 是 复 发 、 死 亡 的 主 要 原 因 。故 深 入研 究NB 的转 移 机 制 至 关 重 要 。我 们 课 题 组 对 NB 侧 群 细 胞 (S ide Po Pu lat io n ，SP ) 的 研 究 发 现 ，侧 群 细 胞 具 有 干 细 胞 特 性 且 较 非 SP 细 胞 具 有 更 强 的迁 移 、侵 袭 能 力 。在 此 基 础上 ，我 们 试 图从 基 因层 面 上 探 寻 SP 细 胞 具 备 此 能 力 的 原 因 ，故 我 们 选 择 研 究 神经 母 细 胞 瘤 SP 细 胞 一与非SP 细 胞 在 基 因 表 达 方 面 的 差 异 ， 以 明 确 S P 细 胞 在 肿 瘤 转 移 中 的 作 用 ，为 N B 的 治 疗 寻 找 新 的 靶 点 。 研 究 目的 : Sp (s ide popu la t ion， Sp)分 析 法 从 神 经 母 细 胞 瘤 sK一N一sH 细 胞 株 中分 离 出 侧 群 细 胞 即 肿 瘤 干 细 胞 (can cer Stem ce n ，C SC) ，采 用 肿 瘤 基 因 组 寡 核 营 酸 微 阵 列 芯 片 ， 检 测 S P 细 胞 与 非 S P 细 胞 基 因 表 达 的 差 异 ， 明 确 S P 细 胞 与 N B 转 移 的 相 关 性 。 材 料 与 方法 : 培 养人 神 经 母 细 胞 瘤 系 SK一N一SH ， 检 测 条 件 稳 定 后 以流 式 细 胞 仪 行 SP 细 胞 分 选 ，染 色 条 件 为 H oe ch s ts p M 终 浓 度 ，维 拉 帕 米 100 p mo l/L 的 终 浓 度 水 浴 90 分 钟 。SP 及 非 SP 细 胞 分 选 后 ，采 用RN A 表 达 谱 芯 片 分 别检 测 其 基 因 表 达 情 况 ，筛 选 出差 异 表 达 基 因 ， 并 加 以分 析 ， 明确 SP 细 胞 与 肿 瘤 转 移 间 的 相 关 性 。 结 果 : 在 人 类 全 基 因 组 中 ， 共 筛 选 出差 异 基 因 位 点 5 3544 个 ，其 中 表 达 上 调 2 倍 以上 的基 因有 34 53 个 ，表 达 下 调 2 倍 以上 的基 因有 1256 个 。之 后 我 们 采 用 S ign al interac tion ne tw or k 分 析 方 法 对 差 异 基 因进 行 基 因 网络 分 析 ，基 于 文 献 报 道 的 相 互 作 用 基 因 ，共 发 现 322 个 基 因 产 物 功 能 相 关 。 对 所 有 表 达 差 异 在 2 倍 以上 的 基 因 进 行 互 相 作 用 网 络 分 析 得 到 MA PK 3/ E RKI 是 差 异 基 因 关 系 网 最 关 键 的 基 因 ， 其 他 的 还 包 括 M 八尸K 14 / p 38 。等 。 2 分 户 人 人 神 经 母 细 胞瘤 系 S K 一N 一S H 侧 群 细 胞基 因表 达 的研 究 硕 士 论 文 中 文 摘 要 结 论 : 1. MA PK 信 号 转 导通 路 关 键 组 分 M APK3/E RK I、M APK 14/p38 。在 SP 细 胞 中 高 表 达 ; 2. MA PK 信 一号通 路 中 的 ERK 及 p38MA PK 通 路 可 能 是 SP 细 胞 与 肿 瘤 转 移 高 相 关 性 的 关 键 分 子 通 路 ; 3. MA PK 信 号 通 路 可 能 是 潜 在 的抗 肿 瘤 治 疗 靶 点 。 关 键 词 : 神 经 母 细 胞 ，基 因芯 片 ，干 细 胞 ，肿 瘤 转 移 中 图 分 类 弓一: R 73 人 神 人 神 经 母细 胞 瘤 系 S K 一N 一S H 侧 群 细 胞 基 因表 达 的研 究