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临床细菌检验标本的处理 临床细菌检验标本的采集、运送、保存和处理 1、所有标本的采集、运送和处理应在无菌操作,防止污染原则下认真进行。 2、已采集标本都应置于防漏、密闭的容器中运送。已采集标本,常规性细菌学检验,不超过1h送实验室。保存在4℃也不能超过24hr。 3、每份标本都应标记患者姓名、化验单联号、标本来源、检验目的、日期及相关临床信息。 收到标本认真查对,看标本留取是否合格。 血液、骨髓标本的处理 了解血培养仪所用培养基的种类:需氧(成人、儿童)、厌氧、真菌培养基。标本用量:采血量:成人8-10ml,儿童1-3ml;骨髓用量:1-3ml;真菌:1-5ml; 厌氧菌:3-10ml 。 培养仪上阳性报警标本要及时处理:消警、登记报警时间、用注射器抽取培养液接种平板,血平板分离各类细菌特别?-溶血链球菌,肺炎链球菌;巧克力平板于CO2环境分离嗜血杆菌、奈瑟菌。真菌培养接种两个TTC-沙氏平板,分别放室温22℃及35℃孵育24-48hr。均需分区划线。 脑脊液标本的处理 涂片查抗酸杆菌:脑脊液以4000r/min离心30min,取沉淀物涂片,做抗酸染色。涂片查新型隐球菌:将脑脊液离心沉淀物进行墨汁染色,在黑色背景中见到菌体周围有透明荚膜,有时可见出芽的酵母菌。 脑脊液培养用血培养仪,阳性报警标本处理同血培养。 注意:涂片检到平面相对、成双排列G—C,可报告“找到G—C, 形似脑膜炎奈瑟菌”。巧克力平板于CO2环境分离脑膜炎奈瑟菌和嗜血杆菌。 尿标本的采集运送和处理 中段尿采集:清洁外阴及尿道口周围,自然排尿,让尿流不间停,截留中段尿不少于1ml。2hr内送交实验室,在4oC也不能超过24hr。实验室接到标本应立即处理。细菌培养接种血平板和麦康凯,真菌培养选用TTC-沙保罗平板。 尿定量培养:用10ul定量接种环取尿液标本划线于血平板上呈一条直线,不要划到底,然后沿直线左右划线,从上而下一次完成,不可来回划线和分区划线。 置35℃培养18-24hr,生长菌落数乘以100,可求出每毫升生长菌落数。 痰标本的处理 痰应用冷开水漱口咳痰,2hr内送实验室。培养前的处理:向痰液内加等量的胰酶溶液,放置35℃ 30min使痰均质化。然后挑选痰液中脓性或带血部分涂片直接镜检看白细胞和上皮细胞及真菌,待干后革兰染色检查细菌和真菌。标本信息及镜检结果都要登记。 痰涂片目的有二:其一为确定标本是否适合做细菌培养。符合要求的痰标本应在低倍视野中白细胞≥25个,上皮细胞≤10个。其二是初步判定是否有病原菌存在。 粪便标本的处理 涂片检查:当检查霍乱弧菌以及菌群失调优势菌时需作直接涂片检查。取新鲜标本涂片革兰染色镜检:观察①有无革兰阴性呈鱼群排列的弧菌②各种菌在涂片中所占相对比例、推断主要优势菌③有革兰阳性芽生孢子和假菌丝即报告检出酵母样菌。真菌也可湿片检查。 一般培养:直接挑取标本中脓血部分接种SS平板和血平板严格按照三区划线,保证有单个菌落的分离,置35℃培养。 眼耳鼻喉拭子标本的处理 根据这些部位感染细菌的特点,须用血平板和巧克力平板作分离培养,必要时加选麦康凯,需分区划线。巧克力平板在CO2 环境中孵育,利于肺炎链球菌、嗜血杆菌和脑膜炎奈瑟菌的生长。 涂片检查:将拭子直接在玻片上涂片,革兰染色镜检查细菌、真菌,如果查真菌还可以湿片直接在高倍镜下检查芽生孢子和假菌丝。 正常人的眼内,中耳及鼻窦内是无菌的。 脓液标本的处理(病灶分泌物) 1、涂片检查:脓液标本在培养的同时均须涂片,涂片的结果一方面为临床提供最初的诊治依据,另一方面可作为分离培养的质量指标。 2、涂片直接做革兰染色,镜下可观察细菌和酵母样菌。涂片做抗酸染色镜检查抗酸杆菌。 3、淋病奈瑟菌涂片,注意细菌形态是否典型,革兰阴性球菌,平面相对、成双排列分布在细胞内或外。 无菌体液标本的处理 1、无菌体液是指血液骨髓和脑脊液外的羊膜液、后穹隆穿刺液、透析液、心包液、腹膜穿刺液和滑膜液。 2、涂片检查:这类标本因原部位是无菌的,只要检出细菌即可做出诊断。所以,直接涂片很重要。 3、标本如为浆液,可先经3000r/min离心,取沉淀涂片。如为脓液,可直接涂片。涂片固定后,作革兰染色和抗酸染色。 生殖系统标本的处理 1、淋病奈瑟菌涂片检查:将拭子直接在玻片上涂片,革兰染色镜检,如看到白细胞内有革兰阴性双球菌,呈双肾形,即可根据形态作出初步报告。 2、如果查真菌可以用生理盐水制湿片直接镜检看芽生孢子和假菌丝,也可以革兰染色镜检。 3、查抗酸杆菌可直接涂片做抗酸染色镜检。 医院感染环境监测标本的处理 各类环境空气、物体表面、医护人员手培养菌落总数卫生标准 空气中微生物的采集与检测 采样时间 :选择消毒处理后与进行医疗活动之前期间采样。 采样高度 :与地面垂直高度80-15
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