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呼吸系统感染的病原菌特点及诊断 中南大学湘雅二医院呼吸内科 陈燕 呼吸系统疾病病原学检查作用 1 它能确定有无肺部感染; 2 通过明确病原体,确立肺部感染诊断; 3 通过病原体培养,药敏试验,判断细菌的耐药性,并指导临床医生合理使用抗生素; 4 通过比较前后病原学的检查结果,判断抗生素的治疗效果。 口腔的正常菌群 成人口腔有放线菌、拟杆菌、双歧杆菌、卡他布兰汉氏菌、痰弯曲杆菌、念珠菌、棒状杆菌、真杆菌、梭杆菌、嗜血杆菌、乳杆菌、微球菌、口腔微毛菌、支原体、奈瑟氏菌、消化球菌、葡萄球菌、链球菌、韦荣氏球菌、螺旋体等。但以草绿色链球菌为最多,约占30~60%。一些厌氧菌在于齿龈颈部,该处氧浓度低于0.5%。 鼻咽腔的正常菌群 主要的有不动杆菌、拟杆菌、痰弯曲杆菌、嗜血杆菌、莫拉氏菌、奈瑟氏菌、葡萄球菌、肺炎链球菌、草绿色链球菌、韦荣氏球菌、棒状杆菌、痤疮丙酸杆菌。 咽喉的正常菌群 主要有放线菌、拟杆菌、弯曲杆菌、念珠菌、梭杆菌、棒状杆菌、支原体、嗜血杆菌、奈瑟氏菌、消化球菌、消化链球菌、葡萄球菌、草绿色链球菌、肺炎链球菌、螺旋体、韦荣氏球菌等。 二、呼吸道感染病原菌的变迁和复杂化 40~50年代,肺炎致病菌中有85~90%为肺炎链球菌,对青霉素敏感性高。至60年代,金葡菌感染的比率增加。近30余年,肺炎链球菌的比例不断下降,而G-杆菌肺炎显著增加, 二、呼吸道感染病原菌的变迁和复杂化 新病原体相继发现,且有增加趋势,如嗜肺军团菌、肺炎衣原体,现已成于肺炎常见致病菌。过去认为不致病或很少致病的细菌如嗜麦芽假单孢菌、卡它其拉球菌、乙酸钙不动杆菌、无乳链球菌等可以成为肺炎的重要致病原。 二、呼吸道感染病原菌的变迁和复杂化 过去认为致病力弱的凝固酶阴性葡萄球菌感染呈增加趋势。器官移植、艾滋病及其他免疫抑制或免疫缺陷病人除常见病原体感染外,尚可见许多特殊病原体,如卡氏肺孢子虫、巨细胞病毒、弓形体、隐孢子虫、隐球菌、奴卡菌、鸟型分支杆菌等。过去仅感染于动物的某些病原体,现在也可感染人。肺真菌、病毒、支原体、衣原体的感染也有上升趋势。 二、呼吸道感染病原菌的变迁和复杂化 近年来医院内感染肺炎的病原学分布有以下特点:仍以G-杆菌占多数,约占60%,并且其中β-内酰胺酶阳性菌占3/4以上,给抗生素选用带来困难,在G+菌中,以金葡菌多见,产β-内酰胺酶的阳性率达90%以上,其中MRSA占5%~13%,肠球菌中产β-内酰胺的菌株也有所增加; 二、呼吸道感染病原菌的变迁和复杂化 由于广谱抗生素、激素和免疫抑制剂的应用,真菌感染增多,不容忽视的是结核分支杆菌感染又有增多趋势; 混合性感染占医院内肺炎50%以上,对选用抗生素提出更高要求; 厌氧菌感染也有一定比例,尤其是老年、患有食道返流、留置鼻胃管和易致误吸的患者中发生率高; 常用方法是收集标本前,让患者用清水或生理盐水嗽口数次,再用3%的双氧水漱口一次,以便去除口腔内的寄生菌,再让患者用清水或生理盐水漱口数次,再用3%的双氧水漱口一次,以便去除口腔内的寄生菌,再让患者用力咳出深部的痰液,盛于无菌容器内立即送检。 口痰标本的收集 作结核杆菌检查时,宜留取12h~24h痰液,经漂浮浓集后涂片作抗酸染色或结核杆菌培养检查。对无痰或少痰患者,可采用气溶法进行导痰。目前常用超声雾化吸入生理盐水或15%盐水加20%丙烯乙醇溶液,使气管内痰液稀释,易于咳出。另外,痰液标本的采集以晨痰为佳,因为此时患者咳出的痰液较多,其中细菌含量也较高。 咽拭子取痰 标本采集前数小时不得用消毒药物漱口或涂抹病灶局部。用棉拭子采集咽喉部的痰液标本时小心、准确,避免触及舌、口腔粘膜和唾液,以防污染。取得标本后应立即送检。咽拭子发现多量的肺炎链球菌、流感杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯杆菌等致病菌时,常考虑可能有感染存在 经环甲膜穿刺吸痰 方法是借套管针自环甲膜插入消毒塑料管抽吸痰液或分泌物,作病原体培养,由于不受口咽部病原体的污染,因此它可较准确地反映下呼吸道和肺部感染的真实情况。该方法简便实用,阳性率高,假阳性率约20%,定量培养可区别假阳性。但该法有轻微创伤。并发症包括皮下气肿、气管内出血,但发生率极低,且不严重。有出血倾向、凝血机制障碍者及严重心血管疾病者禁用。 经纤维支气管镜采集痰液标本 主要是通过对常规纤维支气管镜检查加以改进,使用具有防污染功能的特殊器具来采集下呼吸道分泌物,并对样本加以比较精细的实验室处理,以提高病原学诊断的敏感性与特异性。 经纤维支气管镜采集痰液标本 保护性标本刷(protected specimen brush, PSB)。将PSB从纤维支气管镜拔出后,经无菌处理并稀释后,取原液和稀释液分别接种于不同的培养基,再根据菌落数和稀释倍
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