美白剂实验研究及临床应用.pptVIP

1.研究方法 2.研究方向 3.美白剂的应用 1.主要研究方法 （1）美白活性成分分析 是指通过高效液相色谱等方法对美白化妆品中的美白活性物质进行种类和含量的测定。 1.主要研究方法 （2）细胞水平功效测定 检测内容：黑素含量测定、酪氨酸酶活性、蛋 白表达、mRNA水平测定、信号传导通路等。 1.主要研究方法 （2）细胞水平功效测定 1）细胞模型 B16黑素瘤细胞 大多数研究中，采用B16黑素瘤细胞检测色素抑制作用（PI） 1）细胞模型 melan-a或mel-ab黑素细胞或正常人黑素细胞(nHEM) 正常人黑素细胞(nHEM)更好的模拟体内环境，但黑素细胞更难维持培养。 源于小鼠或人皮肤的黑素细胞和角质形成细胞共培养更贴近体内环境，体外系统的皮肤等效模型（SEM）也用于皮肤美白研究。 2）主要实验方法 酪氨酸酶活性检测方法有放射性同位素法、免疫学法和生化酶学法，其中以生化酶学法较为简单成熟，如氧化多巴法。 细胞中色素含量测定是美白化学物功能评价的最重要检测指标。目前多采用生物化学-分光光度法测定黑素细胞中的黑素含量，此法经典稳定 。 2）主要实验方法 信号传导通路蛋白表达—Western Blot，免疫组化，流式细胞术，ELISA等 mRNA转录—Rt-PCR （3）动物实验 （4）人体实验 （4）人体实验 （4）人体实验 （4）人体实验 1.研究方法 2.研究方向 3.美白剂的应用 2.主要研究方向 2.1 抑制酪氨酸酶活性及表达 2.2 抑制黑素向角质形成细胞转移 2.3 抑制氧化反应 2.4 抑制炎症反应 2.5 调节黑素生成信号通路 2.1 抑制酪氨酸酶活性或表达 4-羟基茴香醚：作为酪氨酸酶替代底物引起色素减退 针叶中提取茶多酚或从黑桑树中分离的查尔酮衍生物可抑制酪氨酸酶活性。 2.1 抑制酪氨酸酶活性或表达 从大豆胚轴酒曲soygerm koji分离出来的两个8-羟基异黄酮： 具有不可逆抑制酪氨酸酶活性作用 面包树(Artocarpus incisus)或龙胆(根) (Sophora flavescens)分离的间苯二酚特有的侧基（与C4, C5 或C8位置置换）抑制酪氨酸酶活性 2.1 抑制酪氨酸酶活性或表达 对天然化合物进行修饰，如经Veratrum patulum提取物的纤维素酶的处理，使二苯乙烯化合物去糖基化，可提高对酪氨酸酶的抑制作用。 2.1 抑制酪氨酸酶活性或表达 N-乙酰氨基葡萄糖(Nacetylglucosamine，NAG)是构成细胞外基质透明质酸的主要成分，局部外用NAG可以减轻女性面部皮肤色素沉着。可能与抑制酪氨酸酶的糖基化有关。 2.2 抑制黑素向角质形成细胞转移 蛋白酶激活受体2（PAR-2）对于黑素小体从黑素细胞向角质形成细胞的转移非常重要，可以用于皮肤美白的靶点。 维生素B3衍生物烟酰胺是一种抑制黑素小体转移的制剂。 2.2 抑制黑素向角质形成细胞转移 黑素细胞表达高水平的sAPP sAPP在通过树突末梢释放黑素小粒过程中可能发挥重要的作用 阻断sAPP信号可能是另一种影响黑素小体输送的途径 2.3 抑制氧化反应 减少黑素细胞中活性氧ROS水平可能阻止黑素合成的活化 Fujiwara等发现每日给棕色豚鼠服用维生素C（抗坏血酸）、维生素E和半胱氨酸可减少UVB诱导的色素沉着 维生素C更稳定的衍生物如抗坏血酸葡糖苷和抗坏血酸棕榈酸酯已被用在不同的皮肤美白配方中 2.4 抑制炎症介质 马尾藻提取物具有抑制炎症介质产生的作用。通过这种间接的方法减少色素细胞内黑素生成。 2.5 调节黑素生成信号通路 2.5 调节黑素生成信号通路 UV反应通过cAMP和PKA介导信号系统及蛋白激酶C (PKC)，可能增加小眼畸形转录因子(MITF)表达，导致酪氨酸酶活化。 通过特异性PKC抑制剂bisindolylmaleimide (bis)可减少豚鼠的晒黑反应，使其毛发颜色变淡。 2.5 调节黑素生成信号通路 信号系统可诱导多种途径产生碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、肝细胞生长因子(HGF)、干细胞因子(SCF)、内皮素-1 (ET-1)、促肾上腺皮质激素（ACTH）和α-促黑激素(α-MSH)，结合黑素细胞上的受体，刺激色素产生。 2.5 调节黑素生成信号通路 Wnt/β-catenin途径 ： Wnt蛋白和其受体的结合可被Dikkopf 1(DKK1)抑制，DKK1是一种成纤维细胞分泌的因子，可抑制黑素细胞生长并强烈抑制黑素生成。 2.5 调节黑素生成信号通路 SCF/c-kit途径： 肝细胞因子是一