第十一章革兰氏阴性需氧杆菌.pptVIP

（三）变态反应检查 变态反应现象一般在感染后的20～25d出现，因此不宜作早期诊断。本法适合于动物的大群检疫，主要用于绵羊和山羊，其次为猪。 检测时，将布氏杆菌水解素0.2ml注射于羊尾根皱襞部或猪耳根部皮内，24及48h后各观察反应一次。若注射部发生红肿，即判为阳性反应。此法对慢性病例的检出率较高。 四、免疫防治 我国目前用的疫苗： M5弱毒活菌苗 可用于牛、羊和鹿布病的预防。皮下注射或气雾免疫。免疫期羊1年半，牛、鹿各为1年。 M90弱毒活菌苗 同M5弱毒活菌苗 。 S2弱毒活菌苗 可用于猪、羊、牛等动物，甚至可以接种怀孕动物而不引起流产。免疫方法采用饮水、气雾和皮下注射3种。免疫期猪为1年，牛和羊均为2年。 第二节 伯克氏菌属（Burkholderia） 是新建立的一个属，该属成员来自假单胞菌属Ⅱ群，现有30多种细菌，对人畜致病的主要有鼻疽伯克氏菌及伪鼻疽伯克氏菌。 一、鼻疽伯克氏菌（B.mallei） 鼻疽伯克氏菌，原名鼻疽假单胞菌，惯称鼻疽杆菌，为马、骡、驴等单蹄兽鼻疽病的病原体，也能感染人及其他家畜和多种野生动物。此病可呈急性或慢性经过，病变特征为皮肤、鼻腔粘膜、肺脏及其他实质器官形成典型的鼻疽结节和溃疡。 （一）形态及染色 G－中等大小杆菌，无芽孢、无荚膜、不运动。单独散在。美蓝染色可见异染颗粒，是本菌的形态特征。 （二）生长要求及培养特性 生长要求 专性需氧，普通培养基中生长缓慢，加入适量甘油、血红蛋白、血液、血清或葡萄糖可促进生长，适温37℃，最适pH为6.4～6.8。 培养特性 甘油肉汤 均匀浑浊生长，并逐渐形成灰白色粘稠沉淀，10～15d后液面形成灰白色菌环或菌膜。 甘油琼脂 24～48h后，形成灰白色至灰黄色中等大小菌落，直径2-3mm。 马铃薯琼脂斜面：48h后，可出现棕黄色蜂蜜样的粘稠菌苔，随着时间的延长色泽逐渐变深。 （三）致病性 本菌在自然条件下主要感染马、骡、驴等单蹄兽，引起鼻疽病。 骆驼、犬、猫等家畜以及狮、虎、豹、狼、狐、貂等野兽也可感染。牛、猪、绵羊、山羊及禽类不感染。 人类偶尔也可经创伤或吸入含菌材料而受感染，并引起致死性疾病。 实验动物猫和仓鼠最易感，豚鼠次之。 接种细菌于雄性豚鼠腹腔后可引起典型的睾丸炎，睾丸肿胀化脓而后破溃，此反应称为：Strauss反应，具有一定诊断价值。 Strauss反应 （四）微生物学诊断 包括细菌学检查、血清学检查和变态反应检查。 在进行大规模检疫时主要采用临床检查、变态反应和补反相配合的检查方法，其中任何一种呈阳性，都定为鼻疽病马。 而细菌学检查只有在特殊病例才被应用。 1、变态反应检查 是鼻疽诊断和检疫最常用的方法，所用诊断试剂为鼻疽菌素（mallein）。 马感染鼻疽菌后2～3周,对鼻疽菌素呈现阳性反应，以后随着病程的发展反应逐渐增强。病马保持变态反的时间有的可达8～10年，甚至终生。因此，该方法在鼻疽诊断、检疫和流行病学调查上是一种必不可少的手段。 变态反应诊断 点眼反应 眼睑试验 皮下试验 皮肤试验 喷雾诊断 其中以点眼法最为常用。为我国检疫规程主要采用方法。 点眼法 是将鼻疽菌素3～4滴滴入马匹一则眼结膜囊内，分别于点眼后3、6、9及24h观察反应。如眼结膜红肿并排出脓性分泌物，即为阳性反应；结膜无反应或轻度潮红、流泪或有少量的粘性分泌物判为阴性。 点眼法操作简便，特异性和检出率都很高，无论是对急性、慢性以及开放型和隐性感染的马匹均可检出。故此法最适合于畜群大批检疫，尤其是以5～6d的间隔反复点眼，检出率更高。所以点眼一般连续3次，每次间隔5～6天。 点眼法对骡子的检出率较低。驴的眼结膜对鼻疽菌素不敏感，一般检不出。此外，1～2的幼马驹眼结膜对鼻疽菌素也不敏感。 马、骡三次点眼检出率 第一次（%） 第二次（%） 第三次（%） 马 60～70 95 98 骡 16.9 60.7 89.3 2、血清学检查 常用补体结合反应。此法特异性很高，凡补反呈阳性的马，剖检时95％～99％都有鼻疽病变。但本反应检出率较低，只能检出大多数活动型鼻疽马；而对于点眼阳性但无临床症状的马只能检出10％～25％左右。因此，补反只能作为鼻疽菌素点眼的一种辅助诊断方法，用来检出其中的活动型病马，而不能代替鼻疽菌素点眼试验。 五、免疫防治 对于鼻疽免疫，迄今为止还没有研制出可供实用的有效菌苗。一般防制措施是采用全面检疫，然后将检出的开放性鼻疽病马予以扑杀或隔离治疗后划地使役，将检出的非开放性阳性病马划地隔离使役，并培养健康幼驹以更新畜群。 第三节 假单胞菌属(Pseudomonas) 假单胞菌为专性需氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。本属细菌种类繁多，广泛存在于土壤、水、植物及腐物中，多为条件致病菌，与