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取有污染的伤口分泌物,涂在玻片上(可医生直接涂好送检,也可去分泌物送实验室涂片),做革兰染色,在显微镜下镜检观察有无革兰阳性粗大杆菌 有污染的伤口进手术室前涂片找粗大杆菌是为了筛查是否有产气荚膜梭菌感染。产气荚膜梭菌感染不但可以一起严重的疾病造成患者截肢或者死亡,还能引起手术室污染。 但是涂片找到粗大杆菌并不是说明一定有产气荚膜梭菌感染,涂片阳性中百分之九十以上都是一些需氧芽胞杆菌(如蜡样芽胞杆菌、枯草芽孢杆菌等)污染所致。 排除污染方法,清创后多次送检,如果是污染,涂片中粗大杆菌量会减少甚至消失不见,如果清创后还是阳性需送厌氧菌培养,以鉴定粗大杆菌是否为产气荚膜梭菌感染,以排除污染菌。 厌氧盒、厌氧罐、厌氧袋+厌氧产气袋:方便实用,厌氧产气袋法应用最普遍。 厌氧罐抽气换气法:需要配备抽气换气装置 厌氧手套箱:比较昂贵 显示乳糖分解(加有酚红指示剂,菌落红色);分解卵磷脂在菌落周围形成浊斑;形成双溶血环,内为完全溶血由θ毒素致,外层不完全溶 血由α毒素致。 Cl. sporogenes 产芽孢梭菌 是由于该菌产生的卵磷脂酶分解蛋黄中的卵磷脂所致,这一现象可被特异性抗血清中和,称Nagler反应 目前产气荚膜梭菌罕见耐药菌,一般不做药敏试验,临床可以根据治疗经验直接用药。 产气荚膜梭菌 产气荚膜梭菌 学习重点: 掌握: 1.涂片找粗大杆菌的临床意义。 2.产气荚膜梭菌的鉴定流程(直接镜检、分离培养、鉴定药敏)。 熟悉: 1.产气荚膜梭菌的致病力,治疗原则。 为什么进手术室要先做涂片找粗大杆菌? → 图片来自网络,如有侵权,请联系删除 产气荚膜梭菌 有污染的伤口进手术室前涂片找粗大杆菌 但是涂片找到粗大杆菌并不是说明一定有产气荚膜梭菌感染 排除污染方法:送厌氧菌培养 产气荚膜梭菌 产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens) 是一类厌氧或微需氧的粗大芽胞杆菌,是临床上引起气性坏疽的病原菌中最多见的一种梭状芽孢杆菌,因能分解肌肉和结缔组织中的糖,产生大量气体,导致组织严重气肿,继而影响血液供应,造成组织大面积坏死,加之本菌在体内能形成荚膜,故名产气荚膜梭菌。 图片来自网络,如有侵权,请联系删除 产气荚膜梭菌 生物学特性 鉴定依据 致病力 药敏试验 临床意义 防治原则 生物学特性 形态特征: 涂片革兰染色:革兰阳性粗短大杆菌,两端纯圆,呈单或双排列,芽胞体于菌体中央或次极端,不大于菌体,镜下不易观察到。动力阴性。 在人工培养中很少形成芽胞,这是本菌的特点之一。 图片来自网络,如有侵权,请联系删除 生物学特性 培养特性: 属于厌氧菌,在厌氧环境种生长良好,常用的培养方法有:厌氧产气袋法、厌氧罐法、厌氧盒、厌氧手套箱等 生物学特性 培养特性: 在血平板上,多数菌株呈双层溶血环,内环为β溶血,外环为不完全溶血。 生物学特性 培养特性: 产气荚膜梭菌在乳糖蛋黄牛奶血琼脂平板上,呈红色菌落,有浊斑,双溶血环。 生物学特性 培养特性: 在牛乳培养基中产生大量的气体,呈“汹涌发酵”现象, 为本菌的特征。 图片来自网络,如有侵权,请联系删除 生物学特性 nagler试验:(卵磷脂酶试验) 产气荚膜梭菌在nagler卵黄琼脂平板上培养,平皿的左侧涂有抗毒素,右侧无抗毒素,无氧下孵育过夜后,在涂有抗血清的一侧不出现乳白色浑浊或只有 很少的浑浊(左),无抗 血清的一侧出现明显的乳 白色浑浊(右),为 nagler试验阳性。 图片来自网络,如有侵权,请联系删除 鉴定依据 形态特征、缺少芽胞,有荚膜的特征。 菌落特性、糖发酵反应,特别是汹涌发酵现象。 Nagler试验:阳性 动物试验:呈“泡沫肝” ,组织印片可见阳性粗大杆菌,有明显荚膜。 致病力 产气荚膜梭菌既能产生强烈的外毒素,又有多种侵袭性酶,并有荚膜,构成其强大的侵袭力,引起感染致病。 α毒素能引起溶血、组织坏死,血管内皮损伤,水肿。促使血小板凝集,导致血栓和局部组织缺血。 β毒素可引起人类坏死性肠炎。 取有污染的伤口分泌物,涂在玻片上(可医生直接涂好送检,也可去分泌物送实验室涂片),做革兰染色,在显微镜下镜检观察有无革兰阳性粗大杆菌 有污染的伤口进手术室前涂片找粗大杆菌是为了筛查是否有产气荚膜梭菌感染。产气荚膜梭菌感染不但可以一起严重的疾病造成患者截肢或者死亡,还能引起手术室污染。 但是涂片找到粗大杆菌并不是说明一定有产气荚膜梭菌感染,涂片阳性中百分之九十以上都是一些需氧芽胞杆菌(如蜡样芽胞杆菌、枯草芽孢杆菌等)污染所致。 排除污染方法,清创后多次送检,如果是污染,涂片中粗大杆菌量会减少甚至消失不见,如果清创后还是阳性需送厌氧菌培养,以鉴定粗大杆菌是否为产气荚膜梭菌感染,以排除污染菌。 厌氧盒、厌氧罐、厌氧袋+厌氧产气袋:
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