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刺激强度、刺激频率与骨骼肌收缩的关系 Effect of Stimulation with Different Intensities and Frequencies on Muscular Contraction 【目的要求】 掌握蟾蜍在体坐骨神经-腓肠肌标本的制备方法; 学习神经-肌肉实验的电刺激方法; 观察不同强度和不同频率的刺激对肌肉收缩的影响。 【实验原理】 刺激与兴奋 神经纤维具有兴奋性和传导性; 肌肉组织具有兴奋性与收缩性,肌肉收缩是其兴奋的外在表现。 刺激和兴奋 刺激stimulation:指细胞所处环境因素的变化。刺激要能使细胞发生兴奋,就必须达到一定的刺激量。 1. 刺激强度与肌肉收缩反应 阈强度:能引起组织发生反应的最小刺激强度,又称为阈值。具有阈强度的刺激称为阈刺激(threshold stimulus)。 刺激产生兴奋,神经兴奋无明显外观变化,肌肉兴奋则导致肌肉收缩 坐骨神经干属于混合神经,内含多条阈值各不相同的神经纤维。 腓肠肌也含有多条肌纤维,受多个运动单位的控制。 刺激强度的变化可以引起坐骨神经中被兴奋神经纤维数量的变化,通过运动单位控制相应数量的肌纤维收缩,产生不同的张力变化。 2.刺激频率与肌肉收缩反应 单收缩twitch:骨骼肌受到一次短促有效刺激时,可发生一次动作电位,随后出现一次收缩和舒张。单收缩时程100ms左右。 两/多个阈上刺激,相继作用于神经-肌肉标本,如果刺激间隔大于单收缩的时程,肌肉则出现两个分离的单收缩; 较高频率连续刺激作用于标本时,出现多个收缩反应的融合,新收缩过程与上次尚未结束的收缩过程发生总和,称为强直收缩tetanus (复合收缩)。 后一收缩发生在前一收缩的舒张期时,称为不完全强直收缩incomplete tetanus 。 后一收缩发生在前一收缩的收缩期时,各自的收缩完全融合,肌肉处于持续的收缩状态,称为完全强直收缩complete tetanus 。 在生理条件下,支配骨骼肌的传出神经总是发出连续的冲动,所以骨骼肌的收缩都是强直收缩; 静息状态下,中枢神经也经常发放低频率神经冲动至骨骼肌,产生一定程度的强直收缩,称为肌紧张(muscle tone)。 【动物和器材】 蟾蜍或蛙; 任氏液; 常规手术器械; 微机生物信号采集处理系统 毁髓针、锌铜弓、解剖盘、玻璃分针、培养皿、烧杯、滴管、蛙板、蛙钉等。 【方法和步骤】 1. 蟾蜍在体坐骨神经-腓肠肌标本制备 2. 实验装置连接 3. 实验观察 1)刺激强度对骨骼肌收缩的影响 2)刺激频率对骨骼肌收缩的影响 1. 蟾蜍在体坐骨神经-腓肠肌标本制备 双毁髓,剥去一侧下肢自大腿跟部起的全部皮肤,将标本俯卧位固定于蛙板上。 分离坐骨神经:在大腿内侧的股二头肌与半膜肌之间,纵向分离坐骨神经至膝关节处,并在神经下穿线备用。 游离腓肠肌:将腓肠肌分离至膝关节。在膝关节旁钉一大头针,折弯压住膝关节。 2. 实验装置连接 将腓肠肌跟腱的结扎线固定在张力换能器的悬臂梁上(不宜太紧,线与桌面垂直)。 把穿好线的坐骨神经轻轻提起,放在刺激电极上,保证神经与刺激电极接触良好。 换能器的输出端与生物信号采集处理系统的输入通道相连。 启动生物信号采集系统软件,选择好通道和采样参数设置,启动记录按钮,开始记录。 3. 实验观察 (1)刺激强度对骨骼肌收缩的影响 使用单刺激或自动强度调节方式,波宽为1ms,刺激强度从零开始逐渐增大,找出刚能引起肌肉出现最微小收缩的刺激强度(阈强度)。 继续增加刺激强度,观察肌肉收缩反应是否也相应增大。 继续增加刺激强度,至肌肉收缩曲线不能继续升高为止。找出刚能引起最大收缩的最小的刺激强度,即最适(大)刺激强度。 (2)刺激频率对骨骼肌收缩的影响 用最适刺激强度的连续刺激,选择经典方式逐渐增加刺激频率,分别记录不同频率时的肌肉收缩曲线,观察不同频率时的肌肉收缩变化。 实验结果? 【注意事项】 1.经常用任氏液浸润标本,保持生理活性。 2.肌槽两电极之间不要残留液体,防止电极间短路。 3.每次刺激后须让肌肉休息30s以上 ,连续刺激不可超过5秒,以免标本疲劳。 4.找准最适刺激强度,以防刺激过强而损伤神经. 5.换能器与标本连线的张力保持不变。 6.如果肌肉在未给刺激时即出现挛缩,需检查电器接地是否良好。 【思考与讨论】 1)实验中观察到的阈刺激是神经纤维的阈刺激,还是肌肉的阈刺激? 2)为什么肌肉收缩的幅度会随刺激强度而变化? 3)单收缩的潜伏期是指什么?其中包括哪些时间因素和生理过程。 4)分析不完全/完全强直收缩的条件与机制? 5)为什么刺激频率增高肌肉收缩的幅度也增大? 6)如果刺激直接施加在肌肉上会出现什么现象? 7)肌肉收缩由于刺激频率加快而融合,那么引起肌肉收缩的动作电位会不会融合呢?为什么
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