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免疫层析 青岛大学附属医院 青岛大学附属医院 青岛大学附属医院 【感染5~7周(或硬下疳出现后2~3周)】 * 青岛大学附属医院 梅毒实验室检测及结果分析 青岛大学附属医院检验科 孙树凯 梅毒螺旋体 梅毒是一种性传播疾病,病原体为梅毒螺旋体,属于密螺旋体属,苍白密螺旋体苍白亚种(Treponema pallidum subspecies pallidum) 极细亚种 雅司病 地方亚种 地方性梅毒 苍白亚种 梅毒 苍白螺旋体 品他螺旋体 品他病 密螺旋体属 青岛大学附属医院 梅毒螺旋体的生物学特性 1、直径 0.10~0.15μm,有8~14个致密而规则的小螺旋 ,两端尖直。 2、原生质圆柱体上紧绕着3~4根周浆鞭毛,故运动活跃,运动方式多样。 3、G-,但不易着色,镀银染色呈棕褐色。 4、在无活细胞的人工培养基中难培养,生长慢。 5、抵抗力极弱,对温度和干燥特别敏感;对青霉素、四环素、红霉素等抗生素敏感。在干燥条件下不易生存。肥皂水和一般消毒剂以及加温42℃以上均极易将其杀灭。 梅毒螺旋体 传播途径 性接触是主要的传染途径 未经治疗的患者在感染后的1年内最具有传染性 随着病期的延长,传染性越来越小 到感染后2年,通过性接触一般无传染性 母婴传播 在妊娠7周时,梅毒螺旋体即可通过胎盘传染未经治疗者,虽已无性传播(病期2年),但妊娠时仍可传染给胎儿 病期越长,传染性越小; 输血传染 间接传播:日常用品、接吻、哺乳、医疗器械等途径(接触部位附有梅毒螺旋体) 。 梅毒的分期 梅毒的诊断 梅毒的诊断 早期梅毒(一期、二期和早期隐性梅毒)和晚期梅毒(三期和晚期隐性梅毒) 必须依靠病史、症状及实验检查进行综合分析 梅毒的实验室检查 结果对诊断有决定性意义 常用梅毒实验室检测方法 病原学检测 血清学检测 病原学检查 取材方法 一期、二期梅毒时,取硬下疳、扁平湿疣、黏膜斑等皮损部位组织液或淋巴结穿刺术得到的组织液 暗视野显微镜 镀银染色 病原学检查的临床意义 病原学方法直接镜检到梅毒螺旋体,在临床可确诊梅毒,且具有快速、方便、易操作的特点。 螺旋体检查是诊断早期现症梅毒的最佳方法,对于患者的早期诊断、及时治疗、预后和尽早切断传染源都有十分重要的意义。 如未见到梅毒螺旋体,并不能排除患梅毒的可能性。 梅毒血清学检测方法 非梅毒螺旋体抗原血清学试验 (非特异性梅毒抗体) 梅毒螺旋体抗原血清学试验 (特异性梅毒抗体) 梅毒螺旋体非特异性抗体血清学试验 原理(抗心磷脂抗体): 人体感染了梅毒螺旋体后,组织受到破坏,释放出来的一种类脂成分,与梅毒螺旋体结合形成完全抗原,刺激机体产生类脂质抗体(反应素)。 主要是IgM和IgG混合抗体。 抗体产生时间 感染3周-4周,硬下疳出现1周-2周 抗体作用 无保护作用,治疗监测。未经治疗的病人,其血清内的反应素可长期存在。经正规治疗后,反应素可以逐渐减少至转为阴性。 原理和方法 反应原理 抗原抗体结合形成复合物,凝集成网状沉淀颗粒被肉眼所见 抗原基本成分 心磷脂、卵磷脂和胆固醇 方法包括: 快速血浆反应素环状卡片试验(RPR) 不加热血清反应素(USR) 甲苯胺红不加热血清试验(TRUST) 性病研究实验室试验(VDRL)等。 RPR定量试验 中等至大的凝块为阳性(圈4和7)有明确凝块但很小的为弱阳性(圈2和3)颗粒均匀分布(圈1,5,8-10)或稍粗糙(圈6)为阴性 TRUST试验结果 临床意义 早期梅毒(一期、二期)经足量规则抗梅毒治疗后3个月,梅毒抗体滴度下降2个稀释度,6个月下降4个稀释度。 一期梅毒1年后转为阴性 二期梅毒2年后转为阴性。 晚期梅毒治疗后血清滴度下降缓慢,2年后约50%病人血清反应仍为阳性 早期梅毒硬下疳出现1周-2周后,血清可呈阳性。 经治疗后血清滴度可下降并阴性,故可作为疗效观察、判断痊愈、复发或再感染的指征。 假阳性问题 假阳性:非梅毒患者的血清反应呈阳性 ①技术性假阳性 由于标本的保存不当(如细胞污染或溶血)、试剂质量差或过期、或实验室
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