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润燥降气方对小鼠食管癌前病变相关作因子表达的影响-中西医结合临床专业毕业论文.docx

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润燥降气方对小鼠食管癌前病变相关作因子表达的影响-中西医结合临床专业毕业论文

河北医科大学 学位论文使用授权及知识产权归属承诺 本学位论文在导师(或指导小组)的指导下,由本人独立完成。本学 位论文研究所获的研究成果,其知识产权归河北医科大学所有。河北医科 大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内 容相关的论文,第一署名单位为河北医科大学,实验材料、原始数据、申 报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则,承担相应的法律责任。 研究生签字:亨咖 导师签章袭知爱孑.二级学院签章: 河北医科大学 研究生学位论文独创声明 本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果,除了文中 特别加以标注等内容外,文中不包括其他人已经发表或撰写的研究成果, 指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写,文责自负。 压崭 研究生签字聊b 导师签章: 加rs年 6月≯ 日 万方数据 JIlll l rlJJl dfllJ l dillU l Ilrl ll IJU Y2784533 目 录 中文摘要 ·· ·1 英文摘要 4 研究论文润燥降气方对小鼠食管癌前病变相关因子表达的影响 前言日【J舌 : t·88 材料与方法 一 ·8 结果 · · ·1 6 附图 19 附表 27 讨{仑 28 结论 3 l 参考文献 32 综述 中医药对食管癌的认识及相关治疗概述 34 致谢 · ··41 个人简历 42 万方数据 中文摘要 润燥降气方对小鼠食管癌前病变 相关因子表达的影响 摘 要 目的:食管癌是严重威胁人类生命的恶性肿瘤之一,主要以鳞状细胞 癌为主,属于中医学“噎膈”范畴。一旦发病,发展迅速,极易发生转移, 失去手术机会。放化疗毒副作用大,寻求安全有效而无毒副作用的中医药 治疗具有重要意义。启膈散是治疗“噎膈”的名方,润燥降气方是在中医 名方启膈散的基础上化裁而成。有研究表明,桩蛋f兰t(Paxillin)是致瘤性酪 氨酸激酶的一种底物,能提高肿瘤细胞转移和侵袭的能力。黏着斑激酶 (focal adhesionkinase,FAK)是一种非受体蛋??酪氨酸激酶,分布在细胞黏 着斑部位。两者在食管正常组织中有基础表达,在食管癌组织中表达明显 升高,故探讨Paxillin和FAK在食管癌前病变组织中的表达及润燥降气 方的干预作用,对于明确润燥降气方防治食管癌的作用及机理至关重要。 方法:本研究采用C57BL/6小鼠作为研究对象,通过4一硝基喹啉。l一 氧化物(4一nitro—quinoline.1一oxide,4NQO)诱导建立食管癌前病变模型,将实 验小鼠分为正常对照组、模型组、阳性对照组、中药治疗组、中药预防组 5组,进行润燥降气方对食管癌前病变的影响研究;通过小鼠食管组织 HE染色,观察不同处置组的病理学变化;通过免疫组化法检测Paxillin 和FAK蛋白表达情况,并采用RT-PCR方法检测不同处置组的Paxillin和 FAK的基因表达情况;通过凝胶成像系统及软件推算表达量,并使用 SPSSl7.0对不同处置组间进行检验,比较组间差异(尸O.05)。 结果: l小鼠一般状况 正常对照组小鼠活泼,生存状态较好;模型组、阳性对照组、中药治 疗组、中药预防组小鼠2周内无明显异常,实验2周后个别小鼠开始出现 精神较差,颈部脱毛,实验lO周时小鼠开始皮毛蓬松,实验末期小鼠出现 皮毛蓬松,弓背卷缩,饮食下降,中药预防组比其他各组小鼠状态稍好。 2小鼠食管组织的HE染色 正常小鼠食管组织呈现正常的食管组织形态;经4NQO诱导后的模 万方数据 中文摘要 型组小鼠,食管组织会呈现食管癌前病变现象,即鳞状细胞组织增生现象, 呈现重度增生状况;模型形成后,经过全反式维甲酸灌胃治疗后,食管组 织的增生现象减弱;中药治疗组及中药预防组的增生现象也相应的减弱。 3各组小鼠食管上皮组织中Paxillin和FAK蛋白表达变化 Paxillin蛋白阳性表达于胞质和胞膜内,呈棕黄色。正常组食管上皮 Paxillin表达量少,其他组皆有Paxillin的不同程度表达。正常组Paxillin 表达水平为O.143±0.007,模型组Paxillin表达水平为0.218±0.021,与 正常组相比明显升高(尸0.05);阳性对照组、治疗组Paxillin表达水平 分别为O.195±0.016;0.153±0.015;两组分别与模型组相比,明显降低 (尸0.05);治疗组Paxillin表达水平低于阳性对照组,但统计学分析无 明显差异(尸0.05)。 FAK蛋白阳性表达于胞质内,呈棕黄色。正常组食管上皮FAK表达 量少,其他组皆有FAK的不同程度表达。正常组FAK表达水平为O.156 ±0.013,模型组FAK表达水平为0.239±O.03 1,与正常组相比明显升高 (尸O.05);阳性对照组、

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