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结核菌素试验使用指导 前 言 结核菌素试验是诊断结核感染的特异方法，是结核病流行病学调查、卡介苗接种、化学预防对象的筛选、临床医学诊断与鉴别诊断等不可缺少的应用技术之一。 结核菌素试验是用结核菌素来测定机体能否引起皮肤迟发超敏反应的一种实验，以判定机体对结核分枝杆菌有无免疫力。 一、结核菌素的简史 1890年首先公布发现结核菌素。该年4月4日罗伯特·柯赫在第10届世界医学会上讲演发表发现一种可以预防豚鼠结核病，并有治疗作用的物质。 1891年柯赫明确这种液体是结核菌的培养滤液，并命名为结核菌素。 1908年发现结核菌素试验方法(C.Mantoux)。 一、结核菌素的简史 1928年美国P.B.Seibert从结核菌培养液中制成了一种纯蛋白衍生物结核菌素(PPD)。 1941年美国研制成功一种标准纯蛋白衍生物结核菌素(PPD-S)。 1958年丹麦研制成了更纯、更浓的纯蛋白衍生物结核菌素(PPD-RT23)，为WHO推荐制剂; 注：日本生产的PPD称为PPDS 二、目前我国常用的结核菌素种类 2、结核菌素纯蛋白衍生物（PPD）：更为精纯，为纯结素，不产生非特异性反应。其制作过程：菌株→培养→灭菌、滤过→浓缩→盐析、脱盐→干燥、保存→分装。PPD-RT23是由丹麦制造供应世界许多国家使用，已经取代OT。我国从人型结核菌制成PPD（PPD-C），又从卡介苗制成卡介菌纯蛋白衍生物（BCG-PPD），0.1ml为5IU用于临床诊断。 三、适用范围 1、结核分枝杆菌感染率调查 2、结核病患者的辅助诊断 3、结核病公共卫生事件中肺结核患者密切接触者筛查 4、特殊人群的健康体检 5、预防性治疗对象的筛查：为了降低结核病发病率，对结核感染者进行化学预防性治疗是一个重要举措。 6、卡介苗接种者的筛选及接种后的阳转率考核 ：如出生时没有接种卡介苗，其补种原则是：未能在出生时接种卡介苗的小于3个月龄儿童可直接补种卡介苗；3月龄-3岁儿童需进行结核菌素皮肤试验，阴性者补种卡介苗；满4岁及以上儿童不予补种卡介苗 。 四、发生机制 其发生机制主要是由于致敏淋巴细胞和巨噬细胞积聚在真皮的血管周围，分泌TH1类细胞因子IFN—r，诱发炎症反应血管通透性增高，在注射局部形成硬结所致。结素反应属于迟发型变态反应（IV)。 所谓迟发型变态反应（IV）：结核杆菌侵入人体后4—8周，身体组织对结核菌及其代谢产物所发生的敏感反应。此时做结核菌素试验即呈阳性反应。 五、结核菌素试验方法 1、试验方法分类 皮上划痕法（Pirquet） 软膏粘贴法（Moro） 皮上多刺法（Heaf） 皮内注射法(C.Mantoux) 结核菌素皮内注射法操作 结核菌素皮肤试验的方法为皮内注射法（Mantoux法）。这是国际通用的标准结核菌素皮肤试验方法。该方法反应比较敏感，注射剂量准确。 操作前制备 1、物品准备 1）、测量卡尺（或小塑料尺）； 2）、标记硬结边缘的圆珠笔； 3）、1毫升一次性蓝芯注射器；4-5号针头； 4）、75%消毒酒精及消毒棉签； 5）、结核菌素试剂； 6）、携便式冰桶或冰包；健康教育材料； 7）、结核菌素测试记录表等； 8）、应急处理器材及药品等。 2、操作者准备 核对结核菌素试剂品名、剂量及有效期，如有沉淀、安瓿破损及过期者不得使用； 操作者洗手并戴上手套； 确认受试者信息，向受试者解释进行结核菌素皮肤试验的目的； 告知受试者不要在注射后在注射部位洗、擦，并保持局部干燥、清洁； 告知受试者局部出现瘙痒、红肿、水疱时的处理方法，在注射后48到72小时返回看结果。 皮内注射操作步骤 1.注射部位选择：位于左前臂掌侧中下1/3交界处，避开疤痕，血管和皱褶。如近期（2周内）已做过结核菌素皮肤试验，则选择在第一次注射部位斜上方3-4cm处，或取右前臂。 2.局部消毒：用75%酒精消毒皮肤。 3.皮内注射：待酒精蒸发干燥后，用1ml注射器吸取0.1毫升PPD，刻度和针孔斜面一致向上；托住被试验者的前臂并绷紧皮肤；将针尖平放在绷紧皮肤上，稍向下压，呈5°-10°角刺入皮内，不见针孔即可；一手固定针头，一手推药，缓慢准确地注射0.1ml（含5IU PPD或2IU PPD），呈直径约为6-10mm大小白色隆起，不要揉摩，将针稍捻转后退出。 4.注射后观察：注射后嘱受试者原地休息，观察30分钟后，如无不适方可离开。 （三）结果检查与记录 1.观察时间：根据结核菌素皮肤试验反应过程，一般于注射后8-12小时局部开始出现红肿，48-72小时反应达高峰，试验局部出现硬结。因此，以注射后72小时观察结果最佳。 2.硬结的测量：测量前首先找到注射针眼，然后用食指从红晕周边向中心轻轻触摸，找到硬结边缘，确定横径和纵径测量点，并用透明的毫米尺测量。