第18章 补体检测及补体参与的试验.ppt

二、补体结合试验 试验分两步，先将反应系统与补体系统发生反应，反应一定时间后再加入指示系统进行反应。根据是否发生溶血来判断试验结果。 结果不发生溶血反应为阳性，发生溶血反应为阴性。 比凝集反应与沉淀反应的灵敏度高、特异性强、可检测的抗原或抗体范围广、无需特殊设备、结果容易观察。 参与成分多，结果易受许多因素影响，各种参与成分需要繁琐的稀释和滴定，难于标准化。已基本被淘汰。 其试验原理和设计思路对新型免疫学检测方法的建立具有启迪和指导作用。 补体依赖的细胞毒（CDC）试验 正常细胞、肿瘤细胞、病毒感染细胞等带有特异性抗原的靶细胞与相应抗体结合后，在补体的参与下，可导致靶细胞膜损伤、通透性增加、细胞死亡，而不带特异抗原的细胞仍存活。 伊红-Y或台盼蓝等染料可通过损伤的细胞膜进入细胞，使损伤死亡或濒死细胞着色，而活细胞不着色。 可用于检测细胞膜抗原（如HLA分型、T细胞表面抗原等），也可用于鉴定抗体的特异性。 三、补体参与的其它试验 免疫粘连血凝试验：可检测多种病毒及其抗体。 溶血空斑试验：可检测抗体形成细胞（AFC）。 胶固素结合试验：可检测循环免疫复合物。 C1q抗体测定试验：常用ELISA法检测，多种自身免疫性疾病患者的血清中可检测到C1q抗体，其含量与疾病病情呈正相关。 第五节 补体测定的临床意义 重点提示 补体活性与含量增高 补体活性与含量降低或缺陷 补体裂解产物检测的临床应用 一、补体活性与含量增高 各种传染病 组织损伤 急性炎症 某些肿瘤患者 心肌梗死 糖尿病 妊娠 病情危重时，总补体活性常呈下降趋势 二、补体活性与含量降低或缺陷 1.先天性某些补体成分缺陷 C1INH缺陷：可致遗传性血管神经性水肿。 C2、C3缺陷：可导致严重的感染。 衰变加速因子（DAF）和膜反应性溶破抑制物（MIRL）缺陷：可导致阵发性夜间血红蛋白尿。 补体受体1（CR1）缺陷：可导致循环IC的清除障碍。 I因子、H因子缺陷：可引起肾小球肾炎。 C1q缺陷：可引起严重顽固性皮肤损害。 C1q、C1r、C4、C2缺陷：可致免疫复合物性血管炎（包括肾炎）。 2.后天性获得性补体活性与含量降低 补体消耗增多：系统性红斑狼疮（SLE）、Ⅱ与Ⅲ型超敏反应、自身免疫性溶血性贫血、冷球蛋白血症、类风湿关节炎、强直性脊柱炎、移植排斥反应等疾病时，补体消耗增加，导致血清补体活性与含量降低。其降低程度与疾病的活动、进程和疗效等有关。 补体大量丢失：如大面积烧伤、大出血和肾病综合征等，可使大量体液和蛋白质丢失，导致补体活性与含量降低。 补体合成不足：肝细胞受损或大量破坏、机体营养不良等可使补体的合成减少，导致血清补体活性与含量降低。肝病时血清补体活性与含量降低的顺序依次为慢性肝炎、肝细胞癌、肝硬化和重症肝炎。 三、补体裂解产物检测的临床应用 Ⅲ型超敏反应的发病机制与补体活化后产生的C3a、C5a等裂解产物（称为过敏毒素）有关。 Ⅲ型超敏反应性疾病可测定补体裂解产物C3a、C5a等，来了解疾病的进展程度。 本章小结 补体有30余种成分，存在于正常人或脊椎动物血清、组织液和细胞膜表面。 补体性质不稳定易受理化因素影响而失活。 补体系统可通过三条途径激活，发挥溶细胞溶菌溶病毒、调理吞噬、清除免疫复合物、介导炎症反应等生物学作用。 可通过血清总补体活性测定（CH50）和单个补体成分的含量及其活性的测定，来评价机体内补体系统的状况，对疾病的诊断、鉴别、疗效观察以及发病机理的研究等均有着重要的意义。 补体参与的试验对于开展各种抗原或抗体以及免疫复合物的检测，具有非常重要的临床应用价值。 Thank you ! 第一章 血液标本采集与处理 临床免疫学检验技术 第十八章 补体检测及补体参与的试验 陈育民 目 录 补体与补体系统的概念 补体的理化特性与生物学功能 血清总补体活性测定 单个补体成分的测定 补体参与的试验 补体测定的临床意义 补体与补体系统的概念 补体（complement）是存在于正常人或脊椎动物新鲜血清中的一种不耐热的成分，可辅助和补充特异性抗体介导的溶菌、溶血作用。 补体系统（complement system）因补体并非单一成分，是由30余种可溶性蛋白和膜结合蛋白组成，故称为补体系统。 补体系统根据各成分的功能不同，可分为补体固有成分、补体调节蛋白和补体受体三类。 正常人体内补体成分的含量相对稳定。 第一节 补体的理化特性与生物学功能 重点提示 补体成分的理化特性 补体系统的激活 补体系统的生物学功能 一、补体成分的理化特性 补体成分为糖蛋白和球蛋白（大多是β，少数为α或γ)，分子量在25kD（D因子）～550kD（C4bp）之间。 血清补体蛋白总量约为4g/L，约占血清球蛋白的10%、血清总蛋白的5%～6%，其中C3含量最高，