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基因工程仪器操作系统（二） 主讲人：高凤山 主要内容 超净工作台 培养箱 灭菌消毒设备 蛋白表达系统 第一节 超净工作台 一、普通超净工作台 二、生物安全柜 一 、普通超净工作台：垂直流层、水平流层 超净工作台可分不锈钢型和全钢型 超净工作台运作原理及应用方法 　　超净工作台的优点是操作简单自如，较为舒适，工作效率高，预备时间短，开机十分钟以上即可操作，基本上可随时使用。在工厂化生产中，接种工作量很大，需要经常长久地工作时，超净台是很理想的设备。超净台由三相电机作鼓风动力，功率145～260W左右，将空气通过由特制的微孔泡沫塑料片层叠合组成的“超级滤清器”后吹送出来，形成连续不断的无尘无菌的超净空气层流，即所谓“高效的特殊空气”，它除去了大于0.3μm的尘埃、真菌和细菌孢子等等。超净空气的流速为24～30m/min，这已足够防止附近空气可能袭扰而引起的污染，这样的流速也不会妨碍采用酒精灯或本生灯对器械等的灼烧消毒。工作人员就在这样的无菌条件下操作，保持无菌材料在转移接种过程中不受污染。 超净工作台上部为过滤、送风单元，两侧面是起支撑作用的箱体，中部设有全钢、不锈钢工作台。 工作台面与过滤、送风单元之间为净化工作区，侧面设有照明灯及紫外灭菌灯各一只，辐射波长为2537A，光照度≥300LX。 外壳采用316不锈钢、1.2mm冷轧钢材质(表面酸洗磷化再经环氧树脂静电粉末喷涂)。 过滤器：初效过滤器采用无纺布制作，高效过滤器由长纤维过滤纸与铝合金外框构成，具有初阻力小、容尘量大过滤效率高、使用寿命长、便于更换等特点。 脚轮：螺杆式制动脚轮 洁净等级：100级@≥0.5um（美国联邦209E） 粒径：≥0.5um的尘埃，≤3.5粒／升 风速0.32~0.48m∕s（可调） 菌落数：≤0.5个/皿?时（Ф90㎜培养平皿） 噪音：≤62dB(Decibel )（A） 震动半峰值：≤3um 单人超净工作台 二、生物安全柜（Biological safety cabinets, BSCs） 1.生物安全柜介绍 是为操作原代培养物、菌毒株以及诊断性标本等具有感染性的实验材 料时，用来保护操 作者本人、实验室 环境及实验材料， 使其避免暴露于上 述操作过程中可能 产生的感染性气溶 胶和溅出物而设计 的。 2.生物危害（Biohazard） 一种对人体能产生有害因子的生物源性的力量，例如：由植物和动物传播的微生物、毒素和过敏原感染和毒害人。 实验室生物安全（Biosafety ） 为防止实验室的生物危害采取合适的实验程序和操作，使用必要的防护设备保证人员及环境的安全。 ２００３年７月１９日，卫生部法监司在北京召开《生物安全实验室认证管理专家研讨会》呼吁： 　 尽快：建立机构、制订法规。 　 落实：建设前论证、建设后验收、使用中监督。 ２００３年１２月３０日，国家科技部召开“全国生物安全实验室管理工作会议”实验室生物安全应纳入法制管理 根据：“……实验室生物安全通用准则” 据所处理的微生物及其毒素的危害程度分为四级，依次为： 一级生物安全防护实验室（BSL-1） 无致病作用的微生物，如教学的普通微生物实验室等 二级生物安全防护实验室（BSL-2相当于P2 ) 具有中等潜在危害的微生物。 ( 其中“P”的定义为Physical Protecton物理的保护 / Physical containment物理的防护 ) 三级生物安全防护实验室（BSL-3相当于P3 ) 呼吸传播，使人传染严重甚至是致病微生物及其毒素，传播途径明确，目前已有疫苗 四级生物安全防护实验室（BSL-4相当于P4 ) 高度危险性，通过气溶胶传播或传播途径不明，目前尚无疫苗或治疗方法的致病微生物及其毒素。 一级生物安全防护实验室 无须使用生物安全柜 应穿工作服，手上皮肤有破损戴手套 实验室设计和建造无特殊要求： 有可开启的窗户，应设置纱窗，设洗手池， 围护结构内表面应易于清洁。 地面应防滑、无缝隙，不得铺设地毯。 实验台表面应不透水，耐腐蚀、耐热， 有专门放置生物废弃物容器的台（架） 二级生物安全防护实验室（BSL-2） 适用于： (1) 含漱液、血清和血液等样品的诊断检测 (2) 溶液、固定或用其他方法处理灭活的病毒和/或无传染性病毒基因片段 （3）常规的细菌和毒素检测 （4）能产生气溶胶的样品处理 （5）临床样品的包装、分装 （6）离心管和离心机转头的封闭与开启 BSL-2 Laboratory 4. 使用生物安全柜的场所 如下情况使用生物安全柜： （1）致病微生物气溶胶或溅出的操作应在生物安全柜 （Ⅱ级生