胶体金技术在药品非法添加快速筛查中应用.pptVIP

胶体金技术原理以及在药品非法添加快速筛查中的应用 简介 胶体金试纸条诊断是采用胶体金免疫层析技术研制而成，该技术是90年代初在免疫渗滤技术的基础上建立的一种简易快速的免疫学检测技术，最先用于人绒毛膜促性腺激素（HCG）的测定和乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）等检测。 简介 胶体金快速诊断技术的应用 胶体金免疫层析技术在医疗诊断领域应用广泛，包括乙肝、艾滋病、梅毒等病毒的快速检测，以及海洛因、吗啡、可卡因、摇头瓦等毒品的快速检测。其具有快速、灵敏、特异、简便等优点。随着人们对食品安全的日益重视和进出口贸易的高速增长，迫切需要一种能快速、稳定地检测药物残留的方法。胶体金免疫层析快速检测技术开始逐渐应用于蜂产品中农兽药残留的现场快速检测。 胶体金（Colloidal gold）是氯金酸（HAuCl4）的水溶胶，氯金酸在还原剂的作用下，聚合成特定大小的金颗粒，并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态。 质量好的胶体金：溶液呈红色，胶体金颗粒为球形，大小均一，无棱角。 质量差的胶体金：溶液呈紫色，大小不一，形状各异。 胶体金的质量判定标准 光吸收性胶体金在可见光范围内有一单一光吸收峰，这个光吸收峰的波长（λmax）在510～550nm范围内，随胶体金颗粒大小而变化，大颗粒胶体金的λmax偏向长波长，反之，小颗粒胶体金的λmax则偏于短波长。 呈色性微小颗粒胶体呈红色，但不同大小的胶体呈色有一定的差别。最小的胶体金（2～5nm）是橙黄色的，中等大小的胶体金（10～20nm）是酒红色的，较大颗粒的胶体金（30～80nm）则是紫红色的。 表 四种粒径胶体金的制备及特性 胶体金粒径（nm） 1％柠檬酸三钠加入量（ml） 胶体金特性 呈色 λmax 16 2.00 橙色 518nm 24.5 1.50 橙红 522nm 41 1.00 红色 525nm 71.5 0.70 紫色 535nm 胶体金标记技术（Immunogold labeling technique）是以胶体金作为示踪标记物应用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。 胶体金标记的原理：胶体金在碱性条件下带负电荷，与蛋白质分子的正电荷基团藉静电吸引而形成牢固结合。 二、胶体金试纸条诊断技术的原理 以硝酸纤维素膜为载体，利用了微孔膜的毛细血管作用，滴加在膜条一端的液体慢慢向另一端渗移，通过抗原抗体结合，并利用胶体金呈现颜色（红色）反应，检测抗原/抗体。 最常用的是双抗夹心法检测抗原 胶体金试纸条示意图 检测线 质检线 吸收垫 样品垫 硝酸纤维素膜 连接垫 （胶体金垫） 背衬 （底板） 测定时将试纸条下端浸入液体标本中，下端吸水材料即吸取液体向上端移动，流经C处时使干片上的免疫金复合物复溶，并带动其向膜条渗移。 测 定 若标本中有待测特异抗原，即可与免疫金复合物中的抗体结合，此抗原抗体复合物流至测试区即被固相抗体捕获，在膜上显出红色反应线条（T）。 测 定 测 定 过剩的免疫金复合物继续前行，至参照区与固相抗小鼠IgG结合（免疫金复合物中的单克隆抗体为小鼠IgG），而显出红色质控线条（R）。 测 定 阴性标本则无反应线条，而仅显示质控线条。 测定 H5亚型AIV尿囊液阳性结果 阴性对照 阴性对照 H5ＡIV细胞毒阳性结果