化妆品中抗感染类药物检测方法征求意见稿-中国食品药品检定研究院.PDF

化妆品中抗感染类药物检测方法 （征求意见稿） 1 范围 本方法规定了采用高效液相色谱- 串联质谱法测定化妆品中抗感染类药物。 本方法适用于液态水基类、膏霜乳液类等化妆品中36 种抗感染类药物的筛查、定性与 定量。 本方法所包含的36 种抗感染类药物名称、CAS 号及化学结构式见附表1。 2 方法提要 本方法以乙腈为溶剂提取样品中抗感染类药物成分，用高效液相色谱仪分离，质谱检测 器检测，对样品中的36 种抗感染类药物进行初筛。筛查结果呈阳性的样品，以相应的标准 品为对照，根据保留时间和特征离子对的相对丰度比定性，定量离子对峰面积定量，以标准 曲线法计算含量。 本方法中36 种抗感染类药物的检出限、定量下限及取样量为0.2g 时检出浓度和最低定 量浓度见附表2 。 3 试剂和材料 除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯，水为 GB/T 6682 规定的一级水。 3.1 甲醇，色谱纯； 3.2 乙腈，色谱纯； 3.3 甲酸，色谱纯； 3.4 氯化钠。 3.5 饱和氯化钠溶液：称取40 g 氯化钠，置于250mL 磨口锥形瓶中，加入100 mL 水，超声 15 分钟，即得。 3.6 0.5% 甲酸乙腈溶液：量取200mL 乙腈于500mL 容量瓶中，加入2.5mL 甲酸，用乙腈稀 释并定容至刻度，摇匀。 3.7 5mmol 乙酸铵缓冲溶液（pH4.0 ）：称取0.7708g 醋酸铵于1000mL 容量瓶中，加水980mL 溶解后，用甲酸调节pH 至4.0，加水定容至刻度，混匀，过0.22μm 微孔滤膜。 3.8 氯霉素标准储备溶液[ （氯霉素）= 1.0mg/mL] ：精确称取10 mg （精确至0. 1 mg）的氯 霉素对照品，置10 mL 棕色容量瓶中，分别加入甲醇 （3.1 ）充分溶解后，用甲醇 （3.1 ）定 1 容至刻度，摇匀。该储备液质量浓度为1.0mg/mL。置于-18℃冰箱中贮存。 3.9 其他组分标准储备溶液[ （待测组分）= 0.1 mg/mL] ：分别精确称取附表 1 中处氯霉素 外其他待测组分对照品各10 mg （精确至0. 1 mg ）置于100 mL 棕色容量瓶中，加甲醇（3.1 ） 使溶解（对于溶解性差的物质可加入少量甲酸或水促进溶解），并用甲醇（3.1 ）定容至刻度， 摇匀，即得质量浓度为0.1mg/mL 的标准储备溶液。置于-18℃冰箱中贮存。 3.10 质控标准品混合储备液：分别精确移取各待测组分标准储备溶液（3.8 和 3.9 ）1.0 mL 于 100 mL 容量瓶中，用甲醇 （3.1 ）稀释并定容至刻度，作为质控标准品储备液。置-18℃ 冰箱中贮存。 4 仪器 4.1 高效液相色谱-三重四极杆质谱联用仪。 4.2 分析天平：感量0.0001 g 和0.00001 g 。。 4.3 超声波清洗仪。 4.4 冷冻离心机。 4.5 涡旋混合仪。 4.6 精密移液器。 5 测定步骤 5.1 分析系统的建立与固化 根据所使用的仪器类型、色谱柱品牌及型号，对附表 1 中的待测组分以标准品为基准， 采用自动或手动的方式优化质谱参数，确定其定性离子、定量离子、碰撞能等测定参数，并 进行高效液相色谱条件的优化，建立最优的分析条件。 本方法以随行质控标准品溶液对分析条件、结果的重复性进行控制。如发生更改仪器、 色谱条件、质谱条件等情况，均需重新建立分析系统。 5.2 质控标准品混合溶液的制备 分别取质控标准品混合储备液（3.10）适量，用 10% 乙腈水溶液进行稀释，配制浓度 原则上介于其检出浓度与定量浓度之间。固化的分析系统建立后，根据实际情况，可选择有 代表性的待测组分配制作为质控标准品溶液，不必随行所有待测组分标准品进行测定。 5.3 样品预处理 准确称取化妆品样品约（实际样品或空白样品）0.2 g，置于15mL 离心管中，加入3 mL 饱和氯化钠溶液（3.5 ），涡旋 30s，分散均匀，加入 0.5% 甲酸乙腈溶液（3.6 ）5mL，涡旋 30 s，超声提取30 min，涡旋混合摇匀，以8000 r/min 转速0℃冷冻离心5min，取上清液适 2 量用初始流动相稀释，稀释液经0.