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毕 业 论 文 (设计 )
课题名称: 2,4-二硝基氟苯柱前衍生
HPLC法测定18种氨基酸
学 院: 药学院
专 业: 制药工程
班 级: 一 班
指导教师: 教授
学生姓名:
学 号:
佳木斯大学教务处
2,4-二硝基氟苯柱前衍生高效液相色谱法测定18种氨基酸
摘要:目的 建立2,4-二硝基氟苯柱前衍生高效液相色谱法测定18种氨基酸的分析方法。方法 以ZORBAX Eclipse XDB-C18 (4.6mm×150mm I.D.5-micron)为色谱柱,2,4-二硝基氟苯为衍生化试剂,梯度洗脱。流动相A:5 mmol/L乙酸钠缓冲溶液(pH=6.5,含1%N,N-二甲基甲酰胺),流动相B:乙腈/水(体积比为1比1),流动相C:甲醇,流动相D:水。结果 所测氨基酸组分的浓度在9.8mg/L -162.2mg/L范围内与峰面积之间具有良好的线性关系。测定结果的相对标准偏差为0.269%-7.97%。结论 建立了13种氨基酸高效液相色谱谱图,各种氨基酸较好的分离。
关键词:高效液相色谱法;柱前衍生;2,4-二硝基氟苯;氨基酸
Determination OF 18 Kinds OF Amino Acids BY HPLC With Precolumn 2,4-Dinttrofluorobenzene Derivatization
Abstract: Objective Establish 18 kinds of amino acid high performance liquid chromatographic spectra. Methods Chromatographic conditions include using a ZORBAX Eclipse XDB-C18 column(4.6mm×150mm.i.d.5-Micron),the separation is performed with gradient elution,with2,4-dinitrofluorobenzene(DNFB),the mobile phase A is 5mmol/Lsoium acetate buffer(pH=6.5 containing 1%N,N-dimethylformamide),the mobile phase B is acetonitrile-water(volume ratio being 1:1),the mobile phase C is methanol ,the mobile phase D is water Results There is a good linear relationship between the peak area and the concentration of the amino acids in the range of 9.8mg/L -162.2mg/L and the RSD is 0.269%-7.97%.Conclusions Established 13 kinds of amino acid high performance liquid chromatographic spectra and all kinds of amino acid get better separation.
Keywords: high performance liquid chromatographic;pre-column derivatization;2,4-dinitro fluorobenzene;amino acid.
目 录
TOC \o 1-3 \h \z \u HYPERLINK \l _Toc232303480 摘 要 I
HYPERLINK \l _Toc232303481 Abstract Ⅱ
HYPERLINK \l _Toc232303482 前 言 5
HYPERLINK \l _Toc232303483 1 仪器、材料和试剂 6
HYPERLINK \l _Toc232303484 1.1 实验仪器 6
HYPERLINK \l _Toc232303485 1.2 实验材料和试剂 6
HYPERLINK \l _Toc232303493 1.2.1 氨基酸标准品 6
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