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通常,1atm,25℃,(空气中氧)在发酵液内的浓度为0.2mMol/L,摄氧量为10-50mMol/L.hr。 无菌空气的获得:发酵设备的空气系统 三、溶氧的浓度及控制 第二节 发酵过程调节控制 第四章 发酵代谢及调节控制 发酵过程中溶解氧的变化 初期:耗氧量大,氧浓度下降,菌体摄氧量达高峰; 中后期,耗氧量较恒定,氧浓度变化较小; 后期,呼吸强度下降,氧浓度上升。 三、溶氧的浓度及控制 第二节 发酵过程调节控制 第四章 发酵代谢及调节控制 最适pH: 细菌——6.5-7.5 霉菌——4.0-5.8 酵母——3.8-6.0 pH影响发酵过程的机制 影响酶的活性 影响微生物细胞膜所带电荷 影响培养基中某些营养物质和中间代谢产物的离解,从而影响微生物对其利用。 四、pH的变化及控制 第二节 发酵过程调节控制 第四章 发酵代谢及调节控制 发酵过程pH变化: 菌体生长期,pH变化较大,因为微生物利用营养物质产生酸或碱,使pH下降或上升; 产物合成期,pH相对稳定; 菌体自溶期,基质耗尽,蛋白酶活跃,氨基氮上升,pH上升 四、pH的变化及控制 第二节 发酵过程调节控制 第四章 发酵代谢及调节控制 控制pH的方法: 在基础培养基内加入生理酸性或生理碱性物质 添加氮源物质,如尿素,氨水等; 增加溶氧,提高搅拌速度(中间产物被氧化,pH上升): 利用缓冲溶液配制缓冲能力强、pH变化不大的基础培养基。 四、pH的变化及控制 第二节 发酵过程调节控制 第四章 发酵代谢及调节控制 1、泡沫带来的危害 影响装液量 导致逃液,若密封较好,泡沫从排气管排出,致染菌;若密封不好,沿轴上升,致污染; 影响通气搅拌的正常进行,从而妨碍菌的呼吸,造成代谢异常,导致产物减少和菌体过早自溶; 影响后提取。 五、泡沫的消除 第二节 发酵过程调节控制 第四章 发酵代谢及调节控制 2、泡沫的产生 培养基成分: 产生泡沫物质——蛋白胨、玉米浆、豆饼粉、酵母膏、发酵用水不清洁 持泡物质——糖、淀粉糊精、菌体本身 菌体本身有产生泡沫的作用,感染噬菌体或杂菌污染时泡沫更多 机械搅拌 五、泡沫的消除 第二节 发酵过程调节控制 第四章 发酵代谢及调节控制 3、消泡 物理法:改变温度法——改变泡沫、黏度或弹性→泡沫破裂,工业上少用 机械法: 罐内消泡法——利用消泡浆(碟片式、耙式) 罐外消泡法——利用旋风分离器分离气体、液体、无气体入缸 化学消泡法:消泡剂 五、泡沫的消除 第二节 发酵过程调节控制 第四章 发酵代谢及调节控制 A.消泡剂特点及要求: 表面活性剂:泡沫本身表面张力比较低,泡沫表面张力平衡被打破 在气液界面上具有足够大的铺展性能和一定的亲水性; 在水中的溶解度极小,以便长久消泡功能; 无菌、安全,对菌体代谢没有影响,不影响提取; 来源方便,价格便宜。 五、泡沫的消除 第二节 发酵过程调节控制 第四章 发酵代谢及调节控制 B.常用消泡剂 天然油脂: 豆油、菜油、花生油,主要用精炼油。 缺点:不含亲水基团,不易铺展 用量:1‰-2‰ 聚醚类: 优点:不易挥发,稳定性高; 用量:万分之一至万分之三 GP:用于稀发酵液 GPE:消泡能力强,但作用时间短,用于稠液 一般将GPE与植物油混用 五、泡沫的消除 第二节 发酵过程调节控制 第四章 发酵代谢及调节控制 醇类:正十一醇、聚二醇(霉菌发酵用) 硅酮类: 须与分散剂(微晶二氧化硅)一起使用才行 聚二甲基硅氧烷及其衍生物 增效措施: a.将泡敌与豆油1:1.5混合使用,效果较好 b.将泡敌、玉米油和水比例1:1.5:9 五、泡沫的消除 第二节 发酵过程调节控制 第四章 发酵代谢及调节控制 合理判断对提高发酵单位时间内产量和质量有很大影响,不同类型发酵达到终点目标不同,因而对发酵终点判断也不同 放罐前的补料: 根据糖的消耗速率,计算到放罐时允许残留量。 一般: 40~50吨罐,放罐前10小时不能补料; 大于90吨罐,放罐前16小时不能补料 六、发酵终点的判断 第二节 发酵过程调节控制 第四章 发酵代谢及调节控制 1、确定放罐时间。 放罐过早: 原料利用率不高,浪费 影响终产物提取(因为有许多糖、脂肪、蛋白质、微生物残留) 缩短了产物合成期,总产量下降 放罐过迟: 增加单位产品的原料的能耗 由于菌体自溶影响过滤及产品提取 代谢产物分解 六、发酵终点的判断: 第二节 发酵过程调节控制 第四章 发酵代谢及调节控制 2、判断放罐指标: 产物的产量增加率开始下降(产物量/体积.小时 称增长率) 菌体形态出现衰老(胞内出现颗粒),部分菌体出现自溶; 过滤速度明显下降(用移液管吸取发酵液看其流出时间) 残糖低,还原糖0
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