草莓高效再生及遗传转化体系的建立.PDF

中国农学通报 2017,33(15):36-42 Chinese Agricultural Science Bulletin ‘晶瑶’草莓高效再生及遗传转化体系的建立 向发云，韩永超，曾祥国，张庆华，陈丰滢，顾玉成 （湖北省农业科学院经济作物研究所，武汉430064 ） 摘 要：以草莓‘晶瑶’为试材，研究不同激素种类和浓度配比对叶片诱导愈伤、愈伤分化出芽的影响，建 立‘晶瑶’草莓叶片的高效离体再生体系。结果表明，‘晶瑶’叶片在MS+ 2,4-D 0.05 mg/L+ TDZ 2.0 mg/L 的诱导培养基上不定芽再生率达到79.18% 。在‘晶瑶’草莓遗传转化试验中，叶盘对卡那霉素的敏感性 最适筛选浓度为30 mg/L ，羧苄青霉素的最适抑菌浓度为400~500 mg/L ，150 µmol/L 乙酰丁香酮的加入 可提高GUS 的瞬时表达率；10 min 是最适合农杆菌侵染‘晶瑶’叶片的时间；共培养48 h 对叶片转化较 适宜，得到抗卡那霉素并呈GUS 阳性的抗性芽频率为2.38% ，获得了转化阳性植株。 关键词：草莓；叶片；植株再生；转化 中图分类号：S663.9 ，Q812 文献标志码：A 论文编号：cas RegenerationandTransformationof‘Jingyao’Strawberry:SomeInfluencingFactors XiangFayun,HanYongchao,ZengXiangguo,ZhangQinghua,ChenFengying,GuYucheng (IndustrialCropsInstituteofHubeiAcademyofAgriculturalSciences,Wuhan430064) Abstract: Inthispaper,strawberry ‘Jingyao’wasinvestigatedforfactorsaffectingleafcallusinductionand budsdifferentiationbydifferenthormoneconcentrationcombinations.Weestablishedanefficientregeneration systemof ‘Jingyao’strawberrywithleaf.Theresultsshowedthattheoptimumregenerationmediumofthe leavesfrom ‘Jingyao’wasMS+ 2,4-D0.05 mg/L+TDZ 2.0 mg/Landtheregenerationofadventitiousbuds ratereached79.18%.Thegenetictransformationconditionsofstrawberrywerediscussedindetailmediatedby Agrobacteriumtumifaciens.Theoptimalselectivepressureconcentrationofkanamycinwas 30mg/L，andthe optimalbacteriostaticconcentrationofcarbenicillinwas400-500mg/L.Itwashelpfultoincreasethetransient expressionradioofGUSbyadding 150 μmol/LAStothemedium.TheappropriatetimeforAgrobacterium infectiontotheleaveswas 10minutesandtheoptionalco-cultivationtimewas 48 hours.Thefrequencyof kanamycin-resistantandGUSpositiveresistantshootswas2.38%,andthepositiveplantswereobtained. Keywords:strawberry;leaf;plantregeneration;transformation 0 引言