第三章_天然产物提取分离及结构鉴定.ppt

● 如果被测定物是已知物，只要和已知对照品做一张共红外光谱图，二者红外光谱完全一致则为同一物质； ● 如无对照品也可检索有关红外光谱数据图谱文献。 ● 1945年，F. Bloch和E. M. Purcell 几乎同时发现了核磁共振现象，获得1952年诺贝尔物理奖。 ● 核磁共振仪器的发展： 40?60 ? 90 ? 100 ? 300 ? 500 ? 600 ? 750 MHz ●核磁共振： ●天然药物化学成分以有机物为主，分子结构中必然有C、H原子，它们的结合类型、化学环境不同，均可用NMR测定，是天然化合物结构测定的重要手段。 氢核磁共振（1H-NMR)谱 碳核磁共振（13C-NMR)谱 ● 氢核磁共振（1H-NMR)谱： ? 化学位移范围：在0～20 ppm ? 三大要素：化学位移(ppm)、偶合常数(J)及峰面积。 ? 灵敏度高，样品用量少（1～5 mg），测试时间短 ●碳核磁共振（13C-NMR)谱： ? 化学位移范围：在0～250 ppm ? 要素：化学位移(ppm) ?灵敏度较低，样品用量较多（5～20 mg），测试时间长 C=O C=C-O CH2 溶剂 C=C DEPT-135 适用范围：信号过于复杂、重叠严重时，而对结构推断产生困难时，可以简化谱图，有助判断； 特点： ? 对测试仪器要求比较高（超导核磁共振仪）； ? 谱图测试价格比较贵； ? 测试时间长，样品用量比较多（只需5～20 mg） NOESY HMQC H-H cosy 作用： ? 用于确定分子量； ? 求算分子式； ? 提供其他的结构信息； 特点： ? 适宜测定极性偏小和中等极性的化合物； ? 常规质谱仪价格比较便宜，一些特殊质谱仪很昂贵； ? 样品用量少（只需5～10 μg） 1243.8 [M+Na]+ 1219.7 [M-H]- ESI-MS MW=1218, C58H94O27 1.极性吸附剂 被分离得化合物极性基团极性越大、数量越多吸附力越强，共轭双键越多吸附力越强。 2.非极性吸附剂 极性越小吸附力越强。 1.正向柱 大极性物质后出峰 2.反相柱 大极性物质先出峰 （二）操作方式 二、分配色谱法 （一）基本原理 分配色谱法 基本原理 正 相 分 配 色 谱 反 相 分 配 色 谱 正相 色谱 极性物质吸附强 小极性物质吸附弱 后出 先出 反相 色谱 极性物质吸附弱 小极性物质吸附强 先出 后出 （二）支持剂 （三）操作方式 1.纸色谱 2.分配薄层色谱 3.分配柱色谱 （一）聚酰胺结构 （二）基本理论－氢键 吸附强度的影响因素 1.溶剂种类 2.化合物结构 （1）形成氢键的基团越多，吸附越牢。 （2）形成氢键基团的位置不同，吸附强度不同。 （3）芳香化程度越高，共轭程度越多吸附性越强。 （4）形成分子内氢键则吸附强度减弱。 洗脱剂 聚酰胺 操作步骤： 装柱 上样 洗脱 三、离子交换色谱法 离子交换色谱法 原理 操作 装 柱 上 样 洗 脱 四、大孔吸附树脂法 大孔吸附树脂法 影响分离的因素 洗脱剂的选择 应用 分离原理 五、凝胶色谱法 1.分类 2.分离原理 3.应用 六、高效液相色谱法 七、气相色谱法 岛津GC2010 第四节 天然药物有效成分结构测定 一、结构测定的主要程序 分子式 分子结构 波谱确认 确定纯度 结构测定 第四节 天然药物有效成分结构测定 一、结构测定的主要程序 分子式 分子结构 波谱确认 确定纯度 结构测定 纯度鉴定 推测母体结构类型 功能基情况 分子量分子式的确定 波谱、化学方法 推测出结构式 人工合成进行确认 纯度确定--最基本的条件 检查纯度的方法： ? 外观、颜色、形态是否均一； ? 测定各种物理常数，如熔点、沸点、比旋光度、折光率等，这些物理常数都反映了化合物的纯度。 ? 如果可能是已知物，用已知结构的对照品进行对照测定或测定它们的共熔点等； ? 也可对照文献报导值（注意各种测定条件的一致性） ? 薄层层析（三种展开系统和三种显色方法） ? 高效液相层析； ● 某些成分或功能基，可以和一些特定试剂产生各种颜色或沉淀，有助于判断化合物类型和功能基： ? 生物碱类大都能和生物碱沉淀试剂产生沉淀； ? 羟基葸醌类遇碱呈红色； ? 盐酸一镁粉试剂能和许多黄酮类化合物呈色。 ● 鉴别功能基的化学反应： ?三氯化铁反应、三氯化铝反应等等。 ?利用在酸水或碱水中的溶解度情况，提示该化合物碱性功能基或酸性功能基的存在以及有无内酯、内酰胺结构。 ?利用在酸水或碱水中的溶解度情况，提示该化合物碱性功能基或酸性功能基