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心血管活动的神经体液调节 实验中心机能实验室 张 福 梅 ? ??? [实验目的] 1.学习直接测定家兔动脉血压的急性实验方法。??? 2.观察神经、体液因素对心血管活动的影响。 [实验动物]??? 家兔 [实验器材] 兔手术台、常用兔手术器械、铁支架、气管插管、动脉插管、三通管、动脉夹、BL-420F生物机能采集系统、压力传感器、保护电极、纱布、棉球、注射器 (1 ml、5 ml、20 m1) [实验药品] 生理盐水、25%乌拉坦、肝素(500 U/ml)、肾上腺素(1:10 000)、乙酰胆碱(1:10 000)。 [实验方法与步骤] 1. 动物的准备??? 1)麻醉动物 ??? 取家兔一只,仰卧位固定,颈正中备皮, 25%乌拉坦(4mL/kg)全醉。 2)手术 剪去颈前部兔毛,于颈部正中切开皮肤约7cm。用止血钳分离皮下组织,暴露胸骨舌骨肌。沿正中线分开肌肉可暴露出气管,并继续沿气管两侧分离结缔组织使气管游离。然后用拇指和食指捏住气管上的肌肉和皮肤外翻,用另外三个手指在皮外将外翻的组织抬起。此时,可在气管外侧见到神经血管丛。 丛内包含颈总动脉、迷走神经、交感神经、减压神经。在外翻而抬起的组织上可以仔细区别三根神经的粗细:迷走神经最粗、交感神经次之、减压神经最细。 在分离的气管、颈总动脉及神经下方各穿一不同颜色的线备用。并在神经表面滴37℃液体石蜡,以防止神经干燥,并起到绝缘效果。 3)气管插管 4)颈动脉插管 尽可能长地分离一侧颈总动脉,在其下方穿两根丝线,其中一根在远心端结扎动脉,用动脉夹夹住动脉的近心端, 在结扎线与动脉夹之间的动脉长度越长越好,一般至少有3cm左右。将另一条丝线置于此段动脉下方以备插管插入后结扎用。用锐利的眼科剪刀在尽可能靠远心端结扎处作一斜形切口,约切开管径的一半,然后将动脉插管向心脏方向插入血管,用已穿好的丝线结扎牢固,并用此丝线在插管的突起上缚紧固定,以防插管从动脉切口滑出。 2.实验仪器的准备???1)减压神经下放置刺激电极;通过三通管将压力传感器及动脉插管中充满500 U/ml的肝素溶液。 2)打开BL-420F生物机能采集系统,接通压力传感器,从显示器的“实验项目”中选择“循环实验”中“动脉血压调节” 。 3.实验项目的观察 1)观察正常血压曲线? 调节扫描速度与增益,可以明显地观察到心室射血与主动脉回缩形成的压力变化与收缩压、舒张压的读数。有时可以观察到血压曲线随呼吸变化,心搏为一级波,呼吸波为二级波。然后将扫描速度调慢,观察正常血压曲线。??? 2)夹闭颈总动脉 用动脉夹夹闭对侧颈总动脉10-15s,记录血压的变化,当出现一段明显变化后,突然放开动脉夹,血压有何变化。 3) 牵拉颈总动脉 手持左侧颈总动脉上的远心端结扎线,向心脏方向快速牵拉3s,观察血压的变化。持续牵拉,观察血压的变化。 4)静脉注射乙酰胆碱 待血压基本稳定后,由耳缘静脉注射1:10,000乙酰胆碱0.2ml,观察血压的变化。 5)静脉注射肾上腺素 待血压基本稳定后,由耳缘静脉注射1:10,000肾上腺素0.2ml,观察血压的变化。 6)刺激迷走/交感神经 刺激交感神经,记录血压变化后。用同样的方法刺激迷走神经,观察血压下降曲线与?2)有何不同(如果血压下降很快、很低,应立即停止刺激)。 7)刺激迷走外周端 结扎对侧迷走神经后剪断,电刺激迷走外周端,观察血压有何变化。血压出现明显变化时立即停止刺激。 8)刺激减压神经 待血压基本稳定后,双重结扎减压神经,并在两线间间断减压神经,分别用中等 强度电流刺激减压神经的中枢端和外周端,观察血压变化,待血压出现较明显变化后,停止刺激。 9)失血 待血压基本稳定后,调节三通管与50ml注射器(内留肝素约0.1ml)相通,放血30ml → 5min记录血压变化,再放血10-20ml → 5min 记录血压变化,当血压维持在40mmHg以下时,立即回输血,观察血压变化。 实验完毕,结束实验,进行资料反演、剪辑并打印结果。 [注意事项] 1.每观察一个项目,必须待血压恢复正常后,才能进行下一个项目。 2.每次静脉注射完药物后应立即输约5ml的生理盐水,以防止药液残留在针头内及局部静脉中而影响下一种药物的效应。 3.实验结束后,必须结扎颈总动脉近心端后再拔除动脉插管。 心血管系统的调
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