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《检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质》.pptVIP

《检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质》.ppt

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检测生物组织中的 糖类、脂肪、蛋白质 苹果 马铃薯 黄豆 花生 ? 它们中那种有机物最丰富 某些化学试剂能够使生物组织中的相关有机化合物产生特定的颜色反应。 实验原理: 鉴定物质 还原性糖 脂 肪 蛋 白 质 淀 粉 试 剂 实验现象 斐林试剂 砖红色沉淀 苏丹Ⅲ 橘黄色 苏丹Ⅳ 红色 双缩脲试剂 紫色 碘 蓝色 实验的材料的选择和处理有什么要求? 材料的选择 材料的处理 还原性糖的鉴定 脂肪的鉴定 含还原糖高,颜色为白色的植物组织如苹果和梨 富含脂肪的种子 ,如花生 浸泡3~4小时 / 蛋白质的鉴定 富含蛋白质的 牛奶或鸡蛋清 鸡蛋清要先稀释 淀粉的鉴定 马铃薯 / 一、可溶性还原糖的检测: 还原糖:具有还原性基团(醛基或酮基)的糖类, 如葡萄糖、果糖和麦芽糖等。 蔗糖、淀粉和纤维素属于非还原糖。 1、选材:苹果、梨、白萝卜等。(含糖量较高,颜色为白色或近于白色的植物组织) 2、检测试剂: 斐林试剂 甲液: 0.1g/mL的NaOH 乙液: 0.05g/mL的CuSO4 等量混匀后制成 选材: 3.实验流程(步骤) 制备组织样液: 制浆:去皮、切块、研磨, 过滤:(用单层纱布) 样液: 显色 反应 现象: 2 ml组织 样液 1 ml新配制的 斐林试剂 50?65℃水浴加热 约2min 棕 色 浅蓝色 砖红色 一、可溶性还原糖的检测: 4、检测原理: 0.1g/mL的NaOH溶液与0.05g/mL的CuSO4 溶液混合后,立即生成淡蓝色的Cu(OH)2悬浊液。 还原糖在水浴加热的条件下,可将Cu(OH)2还原为砖红色的Cu2O沉淀。 二、蛋白质的检测: 1、选材:鸡蛋清、牛奶 2、检测试剂 双缩脲试剂 A液: 0.1g/mL NaOH B液:0.01g/mL CuSO4 三、淀粉的检测: 1、选材:面粉、马 铃薯样液 2、试剂: 碘液 3、检测过程: 2 ml组织样液 滴加碘液 观察颜色变化 3.检测过程: 鸡蛋清溶液 结果显示 NaOH 溶液 滴加CuSO2 溶液, 滴加后均需摇匀 二、蛋白质的检测: 4、实验原理: 碱性环境(NaOH)中,蛋白质中的肽键能和双缩脲试剂中的Cu2+反应生成紫色的络化物,这个反应叫做双缩脲反应 三、淀粉的检测: 4、原理: 蓝色 淀粉 + 碘液 比较项目 试剂及成分 原理 方法 加热与否 结果 可溶还原糖的鉴定 斐林试剂 甲液:NaOH,0.1g/mL 乙液:CuSO4,0.05g/mL 砖红色沉淀 蛋白质的鉴定 双缩脲 试剂 A液 NaOH 0.1g/mL B液 CuSO4 0.01g/mL 溶液呈紫色 斐林试剂与双缩脲试剂两者有何不同? 新配制的Cu(OH)2 溶液与加入的还原糖,在加热条件下生成砖红色的Cu2O 在碱性环境下的Cu2+,与类似于双缩脲结构的肽键发生反应生成紫色络合物 甲乙等量混合而后立即使用 先A液 1mL,然后再加B液4滴 水浴 加热 不 需 要 四、脂肪的检测 1、选材:经浸泡去种皮的花生种子。 2、检测试剂: 苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液 3、实验步骤: 橘黄色小圆颗粒即为脂肪颗粒 脂肪 + 苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ)染液 橘黄色(或红色) 4、实验原理: 若取少量植物油,加入苏丹Ⅲ(IV),震荡,可看到溶液呈什么颜色? 橘黄色(红色) 问题探讨: 1、在做还原糖、蛋白质鉴定的实验时,为什么要留出一部分样液? 作对照 2、使用双缩脲试剂时为什么B液只能加3~4滴而不能 过量? 过量的双缩脲试剂B会与试剂A反应,使溶液呈蓝色,而掩盖生成的紫色。 3、为什么斐林试剂要现配现用,不能放置太久? 时间太长,Cu(OH)2悬浊液就沉淀在试管底部而无法参与反应。 拓展 4.若有西瓜、西红柿,适合作检测还原性糖的材料吗? 不适合,此材料中虽富含还原糖, 但含有色素,会遮盖反应颜色 5.甘蔗、甜菜根适合作检测还原性糖的材料吗? 此材料中虽不含色素,富含蔗糖,但蔗糖是非还原性糖 安徽阜阳劣质奶粉事件震惊全国,引起世人注目。鉴定脱脂淡奶粉是否为伪劣产品,肯定不需要用到的化学试剂是( ) A.斐林试剂

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