生理学实验设计报告.doc

不同浓度的K+ Ca2+ 对离体蛙心兴奋性的影响 引言：心脏的功能是兴奋与收缩，兴奋以离子为基础，因此细胞外或血浆中的离子浓度的变化，对心脏有重要影响，其中K+ ，Ca2+ 极为重要。根据比较不同浓度 K+ ，Ca2+ 引起离体蛙心发生期前收缩的最低刺激强度，刺激强度大则兴奋性较低。从而得出结论。因此我们设计以下实验，初步研究 K+ ，Ca2+ 对心脏兴奋性的影响，以期加深对心脏正常功能的了解和初步探讨异常功能的形成原理。 一、 研究内容 1、离体蛙心灌流的操作方法 2、不同浓度的K+ ，Ca2+ 对离体蛙心兴奋性的影响 二、材料与方法 1 实验材料 实验动物：蟾蜍 规格：体型大小适中（腓肠肌适于实验）、体重相差±0.1g 选用原因：肌肉易分离、操作简便、体形适中，适于实验 实验试剂：不同浓度的Kcl溶液与Cacl2溶液 标准任氏液 实验器械：BL-420生物机能实验系统，张力换能器，铁支架，双凹夹，试管夹，蛙心套管，蛙心夹，蛙板，蛙类手术器械，滑轮，滴管，小烧杯 ，棉线，刺激器 2 实验步骤及方法 不同K+ ，Ca2+浓度的任氏液的制备 以标准任氏液中K+ 的浓度为“1”，分别配置1/8倍， 1/4倍，1/2倍， 1 倍，2倍， 4 倍，8倍的K+ 同理，配置同样不同的Ca2+ 浓度的任氏液。 蟾蜍的选取与分组 （1）按实验材料规格取蟾蜍6只，随机分成A， B两组，每组3只，对A组的3只蟾蜍分别标记为A1 A 2 A 3 对B组的3只蟾蜍分别标记为 B1 B2 B （2） 将A组的A1 A2设为实验组， A 3 设为对照组； B组的 B1 B2设为实验组 ，B3 （3）分别对A， B 两组的6只蟾蜍制作离体蛙心标本 离体蛙心标本的制备 （1）暴露蛙心：取蟾蜍一只，毁坏脑和脊髓，将其仰卧固 定在蛙板上。从剑突下将胸部皮肤向上剪开或剪掉，然后 剪掉胸骨，打开心包，暴露心脏和动脉干。 （2）观察心脏的解剖结构：在腹面可以看到一个心室，其上方有两个心房，心室右上角连着一个动脉干，动脉干根部膨大为动脉圆锥，也称动脉球。动脉向上可分左右两支。用玻璃针从动脉干背部穿过，将心脏翻向头侧，在心脏背面两心房下面，可以看到颜色较紫红的膨大部分，为静脉窦，这是两栖类动物心脏的起搏点，观察静脉窦、心房、心室间收缩的先后关系 （3）心脏插管：先用丝线分别结扎右主动脉、左右肺动脉、前后腔静脉，也可以在心脏下方绕一丝线，将上述血管一起结扎，但此结扎应特别小心，勿损伤静脉窦，以免引起心脏骤停。结扎时，可用蛙心夹在心舒期夹住心尖，将心脏连线提起，看清楚再结扎。准备插管，在左主动脉下穿一丝线，打一松结，用眼科剪在左主动脉上向心剪斜口（一定要剪破动脉内膜），让心脏里的血尽可能流出（以免插管后血液凝固）。用任氏液将流出的血冲洗干净后，把装有任氏液的蛙心插管插入左主动脉，插至主动脉球后稍退出，再将插管沿主动脉球后壁向心室中央方向插入，经主动脉瓣插入心室腔内。此时可见插管内液面随心搏上下移动。将预先打好的松结扎紧，并将线固定在插管壁上的玻璃小钩上防止滑脱，用滴管吸去插管内液体，更换新鲜的任氏液，小心提起插管和心脏，在上述血管结扎处的下方剪去血管和所有的牵连组织，将心脏离体。此时，离体蛙心已制备成功，可供实验 。 （4）6只离体蛙心标本制备好后，随时滴加任氏液于心脏表面，使心脏保持正常的体液环境. 连接标本及实验装置 （1） 将插好的离体心脏套管A1固定在支架上，用带有一段棉线的蛙心夹在蛙心舒张期夹住少许心尖部肌肉。将蛙心上的系线绕过一个滑轮与张力换能器相连（注意不要让心脏受到过度的牵拉），张力换能器与计算机前面板信号输入接口相连（注意勿使灌流液滴到传感器上）。并将刺激器的输出孔与刺激电极相连。 （ 2） 启动计算机进入BL---420生物机能试验系统操作界面，用鼠标左键单击菜单条的“实验项目 ”→“循环实验”→“蛙心灌流” ，系统自动进入该实验记录存盘状态。可根据曲线的具体情况，调节基线及参数设置：显速→1.00～2.00s/div;G→100;T→DC;F→30HZ，使曲线达到理想状态。 （3）观察正常的心跳曲线并分析 曲线的疏密代表心跳的频率，可根据显速来计数。曲线的规律性代表心跳的节律性。曲线的幅度代表心室收缩的强弱。曲线的顶点水平代表心室收缩的程度。曲线的基线代表心室舒张的程度。 不同浓度的K+对离体蛙心兴奋性的影响 在上述观察的蛙的心跳曲线正常的情况下，吸出插管内的全部灌流液，换入