药敏试验和耐药检测.ppt

4、耐甲氧西林葡萄球菌（methicillin resistance staphylococci, MRS）筛选 MRS多是MecA基因编码了对β-内酰胺类药物低亲和力的蛋白PBP2a，取代了固有的青霉素结合蛋白PBPs。 MRS的简便检测方法是用头孢西丁纸片扩散法，要基于头孢西丁的结果报告苯唑西林敏感或耐药。 MRS不论其体外药敏试验结果如何，其对所有的β-内酰胺类药物和β-内酰胺/β-内酰胺酶抑制剂均无临床疗效；绝大多数的MRS具有多重耐药性，包括氨基糖苷类、大环内脂类、四环素类。 临床治疗MRSA引起的感染首选万古霉素。 * * 葡萄球菌mec-A介导的耐药性检测 头孢西丁 * * 5、耐青霉素肺炎链球菌检测试验（penicillin resistance streptococcus pneumonia, PRSP） K-B法 OX19 mm时做青霉素MIC≧2 μg/ml * * mic:只能完全抑制细菌生长的最低药物浓度 欢迎同学们学习实验诊断学 * * 感染性疾病的实验诊断--药敏试验及耐药检测 * * 重点掌握 1 常用的药敏试验方法 ※ ※ 2 药敏试验结果表示及其临床意义 ※ ※ * * 药敏结果的表示及其临床意义 耐药菌检测试验 抗微生物药物敏感性试验 耐药机制 耐药菌历史 主要内容 * * Antibiotic Resistance A Global Problem * * 耐药机制 1、遗传学机制 染色体介导的耐药　为细菌本身所固有的耐药，一般具有种属特异性，如肠球菌耐头孢菌素，革兰阴性杆菌耐万古霉素等。 质粒介导的耐药　耐药基因易于传播，目前该类耐药在临床上占有重要地位。如由质粒介导的产超广谱β-内酰胺酶（ESBL）的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌。 * * 2.生物化学机制 产生灭活酶或钝化酶使抗生素失活。如β-内酰胺酶、氨基糖苷类钝化酶、氯霉素乙酰基转移酶。 作用靶位的改变使抗生素失去作用位点。如MRSA产生青霉素结合蛋白2a。 主动外排机制　如铜绿假单胞菌其外膜存在着独特的药物泵出系统。 细菌生物膜的形成。 耐药机制 * * * * 抗菌药物敏感性试验（antimicrobial susceptibility test AST） 简称药敏试验，是指在体外测定抗菌药物抑制或杀菌的能力的实验 药敏试验用抗菌药物的分组 CLSI将抗菌药物分成A、B、C、U、O、Inv六个主要组别 A组（一级试验并常规报告药物） B组（一级试验，有选择报告药物） C组（补充试验，有选择报告药物） U组（仅用于泌尿道的补充试验药物） O组（有适应症，不允许常规试验并报告药物） Inv组（处于研究阶段，未被FDA认可药物） 常规药敏试验报告药物为前四种 * * 肠球菌 A组：氨苄西林、青霉素 B组：达托霉素、利奈唑胺、奎奴普汀/达福普汀、万古霉素? C组：高水平庆大霉素、链霉素 U组：环丙、左氧、诺氟沙星、呋喃妥因、四环素 * * 铜绿假单胞菌 A组：头孢他啶、庆大霉素、妥布霉素、哌拉西林 B组：阿米卡星、氨曲南、头孢吡肟、环丙、左氧、亚胺培南、美罗培南、哌拉西林/他唑巴坦，替卡西林? U组：洛美或氧氟沙星、诺氟沙星 * * 常用药敏试验的方法 体外AST包括：※ 抑菌试验：纸片扩散法 稀释法 E-test 联合药敏试验 全自动药敏检测系统 * * 纸片扩散法（改良Kirby-Bauer法，K-B法） 将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上。纸片中所含的药物吸收琼脂中的水分溶解后不断向纸片周围区域扩散形成递减的梯度浓度。在纸片周围抑菌浓度范围内测试菌的生长被抑制，从而形成透明的抑菌圈。 抑菌圈的大小反映测试菌对测定药物的敏感程度，并与该药对测试菌的最低抑菌浓度(MIC)呈负相关，即抑菌圈越大，MIC越小。 根据CLSI标准，对量取的抑菌圈直径判断病原菌对该药物的敏感S/中介I/耐药R。 * * 下一张有视频呦！ * * 源 /show/MVioGWfEmjxJOMQDpChF5w.html * * 纸片扩散法操作简易，结果直观易于理解，但非定量结果，且对慢生长菌和扩散慢的药物纸片法不适用。 * * 稀释法 Dilution antimicrobial susceptibility test 直接测定抗菌药物的最低抑菌浓度（minimal inhibitory concentration, MIC) 稀释法包括两种：肉汤稀释法和琼脂稀释法。 基本原理：在肉汤或琼脂中将抗菌药物进行一系列（倍