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专题八 现代生物科技专题;1.基因工程的诞生(Ⅰ)。
2.基因工程的原理及技术(Ⅱ)。
3.基因工程的应用(Ⅱ)。
4.蛋白质工程(Ⅰ)。
5.植物的组织培养(Ⅱ)。
6.动物的细胞培养与体细胞克隆(Ⅰ)。
7.细胞融合与单克隆抗体(Ⅱ)。;构建网络;栏目索引;考点一 基因工程;重点提炼;作用特
点(条件);2.基因工程的操作程序
(1)目的基因的获取
①从基因文库中获取。
②利用PCR技术扩增:其实质是在体外对目的基因进行大量复制。
③用化学方法人工合成
a.对于核苷酸序列已知的直接人工合成。
b.可通过反转录法获取,即mRNA逆转录酶单链DNADNA聚合酶双链DNA。;(2)基因表达载体的构建
①基因表达载体的组成:目的基因+启动子+终止子+标记基因+复制原点。
②基因表达载体的构建方法;(3)将目的基因导入受体细胞;(4)目的基因的检测与鉴定;个体
水平
鉴定;1.携带链霉素抗性基因受体菌的筛选必须通过分子检测(2014·天津,4A)( )
2.转基因抗虫棉植株抗虫效果的鉴定必须通过分子检测(2014·天津,4C)( )
3.一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列(2007·全国Ⅱ,4A)( )
4.用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸(2010·
浙江,2A)( );5.每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点(2011·浙江,6B)( )
6.自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上,属于基因工程(2010·大纲全国Ⅱ,5D)( )
7.转抗虫基因的植物,不会导致昆虫群体抗性基因频率增加(2010·江苏,18B)( )
8.重组质粒与探针能进行分子杂交是因为DNA分子脱氧核糖和磷酸交替连接(2013·安徽,6C)( );9.应用DNA探针技术,可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达(2011·四川,5D)( )
10.动物的生长激素基因转入植物后不能表达(2010·江苏,18C)( );命题视角;解析 A项,②为重组Ti质粒,其构建需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶。
B项,含重组Ti质粒的农杆菌侵染植物细胞后,重组Ti质粒上的目的基因整合到受体细胞(④)的染色体上,而并非整个重组Ti质粒整合到④的染色体上。
C项,目的基因导入受体细胞后不一定能进行表达,所以抗虫基因导入植物细胞后,培育成的植株也不一定具有抗虫性状。;D项,转基因抗虫植株是否培育成功,可以从个体水平上进行检测,即观察植株是否具有抗虫性状,如果具有抗虫性状则说明发生了可遗传变异(基因重组)。
答案 D;2.(2014·海南,31)下面是将某细菌的基因A导入大肠杆菌内,制备“工程菌”的示意图。;请据图回答:
(1)获得A有两条途径:一是以A的mRNA为模板,在____________的催化下,合成互补的单链DNA,然后在______________作用下合成双链DNA,从而获得所需基因;二是根据目标蛋白质的__________序列,推测出相应的mRNA序列,然后按照碱基互补配对原则,推测其DNA的______________序列,再通过化学方法合成所需基因。;(2)利用PCR技术扩增DNA时,需要在反应体系中添加的有机物质有________、________、4种脱氧核苷酸和耐热性的DNA聚合酶,扩增过程可以在PCR扩增仪中完成。
(3)由A和载体B拼接形成的C通常称为_____________。
(4)在基因工程中,常用Ca2+处理D,其目的是______
____________________________________________________________________________________________。;解析 (1)利用反转录法合成目的基因的过程是:以mRNA为模板,在逆转录酶的催化作用下合成单链DNA,然后在DNA聚合酶的作用下,合成双链DNA分子;根据蛋白质工程合成目的基因的过程是:根据目标蛋白质的氨基酸序列,推测相应的mRNA序列,然后按照碱基互补配对原则,推测DNA中脱氧核苷酸的排列顺序,通过化学方法合成。;(2)PCR过程中需要酶、底物、模板、引物和能量等条件。
(3)目的基因和载体结合,形成基因表达载体。
(4)在利用大肠杆菌做受体细胞时,需要先用Ca2+处理,使之成为感受态细胞,有利于其吸收重组DNA分子。
答案 (1)逆转录酶 DNA聚合酶 氨基酸 脱氧核苷酸 (2)引物 模板(A基因) (3)基因表达载体 (4)使其成为感受态细胞,有利于吸收重组DNA分子;总结提升;作用
部位;考点二 细胞工程;重点提炼;动物细
胞培养;动物细胞
的融合;核移植;单克隆
抗体的
制备;2.容易混淆的三种细
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