化学药物临床药代动力学研究技术指导原则.ppt

化学药物临床药代动力学研究技术指导原则 --------------要求，常见问题与解决办法 中国药科大学 陈西敬（教授） 2012年4月14日?上海 指导原则的主要内容 一、概述 二、药代动力学研究生物样品分析方法的建立和确证 三、药代动力学研究的具体内容 四、结语 五、参考文献 一、概述 新药的临床药代动力学研究主要涉及如下内容： 1、健康志愿者药代动力学研究 （1）单次给药的药代动力学研究； （2）多次给药的药代动力学研究； （3）进食对口服药物药代动力学影响的研究； （4）药物代谢产物的药代动力学研究； （5）药物－药物的药代动力学相互作用研究。 2、目标适应症患者的药代动力学研究 3、特殊人群药代动力学研究 （1）肝功能损害患者的药代动力学研究； （2）肾功能损害患者的药代动力学研究 （3）老年患者和儿童患者的药代动力学研究 二、药代动力学研究生物样品分析方法的建立和确证 生物样品的种类：全血、血清、血浆、尿液或其他临床生物样品； 特点：取样量少、药物浓度低、干扰物质多以及个体差异大等特点 要求：必须根据待测物的结构、生物介质和预期的浓度范围，建立灵敏、专一、精确、可靠的生物样品定量分析方法，并对方法进行确证。 生物样品测定中常见的问题及解决办法 1、特异性(Specificity) 特异性是指在样品中存在干扰成分的情况下，分析方法能够准确、专一地测定分析物的能力。必须证明所测定物质是受试药品的原形药物或特定活性代谢物，生物样品所含内源性物质和相应代谢物、降解产物不得干扰对样品的测定，如果有几个分析物，应保证每一个分析物都不被干扰。应确定保证分析方法的最佳检测条件。对于色谱法至少要考察6个不同个体的空白生物样品色谱图、空白生物样品外加对照物质色谱图（注明浓度）及用药后的生物样品色谱图，以反映分析方法的特异性。对于以软电离质谱为基础的检测法（LC-MS、LC-MS-MS）应注意考察分析过程中的介质效应，如离子抑制等。 2、标准曲线和定量范围（Calibration Curve） 标准曲线反映了所测定物质浓度与仪器响应值之间的关系，一般用回归分析法（如用加权最小二乘法等）所得的回归方程来评价。 配制标准样品应使用与待测样品相同生物介质，测定不同生物样品应建立各自的标准曲线，用于建立标准曲线的标准浓度个数取决于分析物可能的浓度范围和分析物/响应值关系的性质。必须至少用6个浓度建立标准曲。标准曲线各浓度点的实测值与标示值之间的偏差*在可接受的范围之内时，可判定标准曲线合格。可接受范围一般规定为最低浓度点的偏差在±20%以内，其余浓度点的偏差在±15%以内。 3、定量下限（Lower Limit of quantitation，LLOQ） 定量下限是标准曲线上的最低浓度点，表示测定样品中符合准确度和精密度要求的最低药物浓度。LLOQ应能满足测定3～5个消除半衰期时样品中的药物浓度或能检测出Cmax的1/10～1/20的药物浓度。其准确度应在真实浓度的80%～120%范围内，相对标准差(RSD)应小于20%。至少应由5个标准样品测试结果证明。 4、精密度与准确度（Precision and Accuracy） 精密度是指在确定的分析条件下，相同介质中相同浓度样品的一系列测量值的分散程度。通常用质控样品的批内和批间相对标准差（RSD）来考察方法的精密度。一般RSD应小于15％，在LLOQ附近RSD应小于20％。 准确度是指在确定的分析条件下，测得的生物样品浓度与真实浓度的接近程度(即质控样品的实测浓度与真实浓度的偏差)，重复测定已知浓度分析物样品可获得准确度。一般应在85％～115％范围内(一般偏差应少于15％)，在LLOQ附近应在80％～120％范围内。 对精密度的要求 一般要求选择高、中、低3个浓度的质控样品同时进行方法的精密度和准确度考察。低浓度通常选择在LLOQ的3倍以内；高浓度接近于标准曲线的上限；中间选一个浓度。在测定批内精密度时，每一浓度至少制备并测定5个样品。为获得批间精密度，应在不同天连续制备并测定，至少有连续3个分析批（不少于45个样品）的结果合格。 5、样品稳定性(Stability) 根据具体情况，对含药生物样品在室温、冰冻和冻融条件下以及不同存放时间进行稳定性考察，以确定生物样品稳定的存放条件和时间，应在确保样品稳定的条件下进行测定。还应注意考察储备液的稳定性以及样品处理后的溶液中分析物的稳定性，以保证检测结果的准确性和重现性。 6、提取回收率 从生物样本基质中回收得到分析物质的响应值除以标准品产生的响应值即为分析物的提取回收率。也可以说是将供试生物样品中分析物提取出来供分析的比例。考察高、中、低3个浓度的提取回收率，其结果应精密并具有可重现性。 7、微