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配料时先将土豆去皮切片,与麸皮混合后用不锈钢锅煮熟并取汁,在将辅料KH2PO4、MgSO4等溶入,混匀后装入罐中加热,至121.3℃并维持40分钟左右进行灭菌,灭菌结束后用冷水冷却至培养温度,而后将并瓶后的三角瓶种接上进行培养,培养时根据不同的菌种,设定适宜的温度。 培养期间应注意观察,并做好记录。包括温度、压力、气流量、排出气体的气味等。如遇到停电,排气阀自动关闭或人工关闭来保持罐中处于正压状态。来电后重新启动,并打开排气阀继续培养。培养过程中,可随时无菌操作采样分析,几天后待菌球密度合适(从视镜观察)即可接种。 液体菌种的摇瓶培养,其主要设备是摇床(摇瓶机),有往复式和旋转式两种。将液体培养基装入500毫升三角瓶内,每瓶装量为100毫升,加入15粒左右的小玻璃珠或小块的玻璃碎片,用棉塞封口后置1.5千克压力下灭菌30分钟,取出冷至30℃时接种。每瓶接入1.5~2平方厘米的斜面菌种一块,让其悬浮于液体培养基表面且使菌丝朝上,在适温下静置培养48小时。当菌丝长至液体培养基中时,置摇床上进行振荡培养。往复式摇床振荡频率为80~100次/分,振幅6~10厘米;旋转式摇床偏心距为4毫米,振荡频率为150~220转/分。旋转式摇床因旋转速度过快,菌丝球一般较大,且菌丝球表面绒毛状菌丝少,一般不能用作菌种。 五、液体菌种的摇瓶培养 液体菌种接种的培养液的培养温度一般控制在24~26℃,培养时间72~96小时。培养结束后,因菌种不同,培养液出现不同色泽。 平菇、金针菇的培养液呈浅黄色;香菇、猴头的培养液呈棕色; 而蜜环菌则会有荧光现象; 木耳的培养液呈青褐色、粘稠、有香甜味。 若出现培养液混浊,并伴有腐败及酸味,多为细菌性污染所致。 液体菌种需镜检后方可应用于生产。 摇床培养的液体菌种数量较少,一般只适用于固体菌种的接种。也可作为发酵罐种源,或接种于三角瓶内,每瓶接种菌液10毫升,继续进行摇瓶培养。因菌丝球正处于旺盛生长状态,菌丝球分散性好,能缩短摇瓶培养时间,快者2天即可终止培养。 液体菌种在4℃左右温度下可保存1~2个月,在15~20℃室温下可保存7~10天,使用时对接种成功率、产量均无不良影响。 1. 用于原种或栽培种生产 液体菌种可以作为母种和原种使用。就目前国内现有水平来说,用深层发酵方法大规模生产液体菌种还有困难,大多用摇瓶培养或小型通气发酵方法生产,以液体菌种代替母种较为理想。用液体菌种制出的原种,生活力强,上下菌龄一致,用于接种栽培种,定植快,污染率低。用摇瓶方法培养液体菌种,周期短,可连续多次扩大培养(一般不超过5代),对生长速度、菌种质量均无不良影响。 六、液体菌种使用方法 2. 用于砖状菌种生产 在棉籽[BFQ]壳等培养料内,按50%~100%的量加入液体菌种,拌匀后,装入消毒的纸盒、木箱、塑料箱内,用塑料薄膜包好,3~7天菌丝充分发育连接成菌块,作为栽培种使用。可用于平菇、凤尾菇、金顶蘑生产,不适用于香菇、黑木耳。 3. 用于菌床播种 床栽:适用于平菇、凤尾菇、香菇栽培,每平方米用菌液300~1000毫升,常用量为500毫升,以穴播法最好,条播次之,撒播最差,将穴播与撒播结合效果最好。栽培平菇、凤尾菇20天菌丝满床,20~25天可以出菇,香菇压块栽培,在播种后40天出菇。 袋栽:将液体菌种由袋口注入或用混播法拌料。液体菌种用量为30%~50%,播种后一般26~35天出菇。 瓶栽:每千克干料用100毫升液体菌种,栽培平菇、凤尾菇、草菇、猴头、木耳等,15~25天菌丝满瓶。 1.液体菌种的科研、生产、制种和工厂化的大规模生产单位;2.用于多种微生物的培养; 3.含食用菌活性成分的保健食品生产; 4.各种奶制品的活性因子生产; 5.生产菌丝体,提取生物活性成分来生产各种食品添加剂; 6.微生物发酵工程来制取农药、医药、激素等; 7.适用于科研单位、菌业公司、工业企业和从事食用菌栽培人员的菌类生产。 七、 应用领域 用液体菌种培养器生产一批菌种仅需3天,是使用固体菌种周期的1/10。由于液体菌种具有流动性,因而接入的菌种可流散在不同的部位萌发生长。接种后6小时左右即可看到菌种萌发变白,24小时就可吃料生长,使杂菌没有浸染机会。在25℃的条件下,养菌18天-20天即可长满袋,生长期是使用固体菌种的50%。 八、用液体菌种栽培杏鲍菇 杏鲍菇需要较丰富的碳源和氮源,特别是氮源越丰富菌丝生长越好,产量也越高。 配方是:木屑65%、棉籽壳10%、麦麸23%、石膏1%、石灰1%。 水分:在栽培杏鲍菇菌丝生长阶段,要求空气相对湿度60%左右,子实体形成和发育阶段要求相对湿度在85%-90%。子实体发育和生长阶段,水分管理极为重要。初期菇房相对湿
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