方法一是微生物法.为等效采用美国公职分析化学师协会（.PDF

GB/T 5413-17-1997 前 言 木标准给出两种方法，方法一是微生物法.为等效采用美国公职分析化学师协会(AOAC)的方法， 虽然操作步骤萦杂，但测定结果准确度高.方法二是高压液相色谱法，是经实验确定的一种快速、准确的 方法。 木标准方法一为仲裁法。 木系A标准从实施之日起，代替GB5413-85. 木标准由中国轻工总会提出。 木标准由全国乳品标准化中心归口。 木标准负责起草单位:国家乳制品质量监督检验中心。 木标准参加起草单位:卫生部食品卫生监督检验所、浙江省轻工业研究所、哈尔滨森永乳品有限公 司、雀粱(中国)投资服务有限公司。 木标准主要起草人 :张玉杰、工芸、殷晓红、杨金宝、吕为群。 中华人 民共和 国国家标准 婴 幼 儿 配 方 食 品和 乳粉 GB/T 5413.17-1997 泛 酸 的 测 定 代替GB5413-85 MilkpovMerandformulafoodsforinfantandyoungchildren Determinationofpantothenicacid 范围 木标准规定了用微生物法和高压液相色谱法测定泛酸的方法。 木标准方法一适用于婴幼儿配方食品和乳粉中泛酸的测定，方法二适用于乳粉中泛酸的测定。 方法一 微生物法 2 方法原理 利用植物乳杆菌(Lactobaciliusplantarum)的繁Via与样品中的泛酸含址成正比的关系可计算出 样品中的泛敌含a.. 3试剂、菌种和培养基 所有试剂，如末注明规格，均指分析纯，所有实验用水，如未注明其他要求，均指三级水。 3.1 生理盐水:她氯化钠溶于100O.L容址瓶中。 东2 泛酸钙 :标准品。 3.3 乙酸:c(HAc)为0.2..i/L.吸12mL冰乙酸用燕馏水稀释至IL. 3.4 甲苯。 3.5 乙酸钠:c(NAc)为0.2m0i/L.溶解16.4g无水乙酸钠于水中，稀释至100O.L. 6 菌种— 植物乳杆菌(UdubaciUnsplanta、二). 忍7 培养基 7.1乳酸杆菌琼脂培养基:光解陈15g,醉母浸青59,葡萄械log,番茄汁 100mL.磷酸二氧钾29,聚 [h梨糖单A酸酷18，琼脂I飞，加燕馏水至1000mL,pH6.8士0.2(25C1). 7.2 乳酸杆菌肉汤培养基:光解陈I宛.解母浸青宛，荀萄翻.飞，番茄汁 100.1.,磷酸二氧钾飞，聚 山梨糖单油ffiffliIll,加燕馏水至1000,nL,pH6.8土0.2(25C). 忍7.3泛酸测定用培养墓:荀萄械4飞，乙敌钠2飞，无维生素酸水解酪蛋白I飞，磷酸牡二钾 Ill,磷酸 二氧钾19,L-KU酸0.49,L一色氨酸0.lg,%酸镁0.4g,氮化钠20.g,硫酸qp.铁20.g,硫酸锰20.g,硫 酸腺嗓岭20.g,盐酸鸟嗦吟20mg,尿喃咤20.g，胡萝 卜索400pg,盐酸硫胺素20Q,g，生物素0.8pg,p- 氨基苯甲酸200pg,烟酸lmg,盐酸毗哆醉800}g,聚山梨抽单油酸M0.Ig,加燕馏水至1000,nL,PH6.7 士0.1(25r). 国家技术监普局1997-05-28批准 1998-09-01实施 GB/T541117-1997 4 仪器 常用实验室仪器及分光光度计。 5 制备 5.1 菌种的制备 5.1.1将保存在直柱状thl体培养基中的植物乳杆菌接种到新的乳酸杆菌琼脂培养基中，培养后再继代 培养一次，然后将其转接到乳酸杆菌肉汤培养基中培养后备用。 5.1.2 将5.1.1中的菌怂液以20OOr/min离心2-3min,倾出上济液，加入】O.L生理盐水((3.1), 搅匀，再离心2-3min,如此清洗3次.吸1.OmL该菌悬液于Ih(nL生理盐水((3.1)中。 5.1.3用721型分光光度计，于550nm波长下.以生理盐水((3.1)做对照，侧5.1.2菌悬液的浊度值， 此值应在6